1、臨床微生物質(zhì)量控制,臨床微生物檢驗是對人體的各種物質(zhì)進(jìn)行微生物學(xué)檢驗，整個檢驗過程包括病人樣品的采集、運(yùn)送、處理，樣品中致病微生物的分離、培養(yǎng)、鑒定，藥物敏感試驗，出具檢驗報告。臨床微生物檢驗，在感染性疾病及相關(guān)病患的診斷治療預(yù)防及研究工作中起著越來越重要的作用，為了保障檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，日常工作中要注意開展質(zhì)量控制。,臨床微生物檢驗質(zhì)控工作的特點(diǎn),環(huán)節(jié)多 涉及的知識面廣 復(fù)雜性高、需要超強(qiáng)的責(zé)任心,臨床微生物檢驗質(zhì)量控制的有關(guān)概念,細(xì)菌檢驗的質(zhì)量 結(jié)果真實顯示標(biāo)本中存在的病原菌及其生化特征和抗藥性 細(xì)菌檢驗的質(zhì)量控制 制定細(xì)菌檢驗的質(zhì)量水平，并采取監(jiān)測手段，這一過程稱為細(xì)菌檢驗的質(zhì)量

2、控制。 質(zhì)量保證 為達(dá)到應(yīng)有的質(zhì)量水平而采取的措施 質(zhì)量評價 用一個客觀的公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)來評定一個實驗室或?qū)嶒炇抑心稠椩囼炇欠襁_(dá)到標(biāo)準(zhǔn)的過程,室間質(zhì)量控制,室間質(zhì)量控制是各地實驗室之間進(jìn)行質(zhì)量控制的一種方式，也是上一級實驗室對各實驗室進(jìn)行質(zhì)量管理的手段。參加由省臨床檢驗中心或衛(wèi)生部臨床檢驗中心組織的室間質(zhì)控，會遇見一些平時罕見或未見過的菌株，通過質(zhì)控檢驗對它們的生長條件、菌落形態(tài)、染色、鏡下形態(tài)等有了較深的感性認(rèn)識。日后工作中倘若再遇見這些菌將不再會漏檢。,室內(nèi)質(zhì)量控制,做好室內(nèi)質(zhì)控直接關(guān)系到日常檢驗工作的質(zhì)量。室內(nèi)質(zhì)控主要包括幾個方面：實驗室前的質(zhì)量控制、標(biāo)本接種前的質(zhì)量控制、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制、

3、試劑質(zhì)量控制、常用儀器的質(zhì)量控制、藥敏實驗的質(zhì)量控制、及發(fā)報告前的質(zhì)量控制。,實驗室前的質(zhì)量控制,要想獲得可靠的檢驗結(jié)果，首先要取得一份合格的標(biāo)本，所以實驗室前的質(zhì)量控制是保障檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵。包括標(biāo)本采集時間（時 機(jī)）、采集方法與運(yùn)送等。,血液細(xì)菌培養(yǎng),臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血流感染的患者，需做血液細(xì)菌培養(yǎng)以明確病原。及時、準(zhǔn)確地從患者血液中分離出病原菌，才能正確實施有效地抗菌治療，從而有助于提高治愈率和降低醫(yī)療費(fèi)用。,1.采血時機(jī),應(yīng)在用抗菌素治療前, 最好在患者發(fā)冷發(fā)熱前半小時采血為宜。,2.采血次數(shù)與間隔,急性感染患者 從兩臂分別采2份血樣。 感染性心內(nèi)膜炎患者 24h內(nèi)

4、采血3次, 每次間隔不少于30分鐘。 發(fā)熱原因不明患者 2448h后可再采血2次,間隔不少于60分鐘。,呼吸道標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng),標(biāo)本留取質(zhì)量的好壞直接影響到對下呼 吸道病原學(xué)的診斷 標(biāo)本的采集要盡量減少上呼吸道正常菌 群干擾 應(yīng)在用藥前或停藥1天后留取標(biāo)本。,泌尿道標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng),應(yīng)在用藥前或停藥5天后留取標(biāo)本, 并使尿液在膀胱內(nèi)停留68h以上。 盡量避免或減少尿道口正常菌群干擾。 采集中段尿 尿量不宜太多，試管塞子與尿液不應(yīng)直接接觸 留取導(dǎo)尿管尿要排空導(dǎo)尿管內(nèi)陳舊尿液，倘留置尿管超過三天應(yīng)避免采用。,糞便標(biāo)本的采集,應(yīng)在發(fā)病早期并且盡量在用抗生素治療前采集，稀便不少于1ml，固體便不少于1克，無便

5、患者可用直腸拭子采集標(biāo)本。 要挑取含膿、黏液、血等病理改變或水樣糞便送檢。直腸拭子采樣量要足夠，拭子上肉眼應(yīng)可見糞便。,膿液標(biāo)本,要盡量避免病灶表面細(xì)菌污染。開放性膿腫，采樣前無菌鹽水沖洗傷口，拭去表面污染膿液，挑取病灶深部膿液；封閉性膿液，嚴(yán)格病灶皮膚或黏膜表面的消毒后用無菌干燥注射器穿刺抽取，置無菌試管內(nèi)送檢，或切開排膿時用無菌拭子采集深部膿液。,標(biāo)本接種前質(zhì)量控制,各種臨床標(biāo)本送到實驗室后，大致檢查其是否合格。不合格的標(biāo)本不應(yīng)進(jìn)行檢驗。,痰,外 觀 分為膿痰（P）、粘液（M）、血（B）、唾液（S）、水樣（W）五個級別，以P、M、B級別適合細(xì)菌培養(yǎng)。,痰標(biāo)本顯微鏡檢查的分類,13類為不合格

6、標(biāo)本, 不做培養(yǎng)。 45類為合格標(biāo)本。 油鏡下觀察并記錄可能的病原菌，尤其是白細(xì)胞內(nèi)吞噬的細(xì)菌,首先用滅菌生理鹽水將痰液洗3次，然后將痰塊打碎，或加入等量10g/L的胰蛋白酶將痰塊消化后再接種。,培養(yǎng)基的質(zhì)量控制,一般性狀 無菌試驗 細(xì)菌生長試驗,、一般性狀,外觀透明、清亮、無混濁、無沉淀，顏色符合要求，表面濕潤但無水汽、平整、光潔無凹坑和氣泡。整塊平板厚薄均勻。 厚度一般厚度在3mm，但MH平板厚度不得小于4mm。斜面的長度不得超過試管長度的2/3。 pH 是細(xì)菌生長的重要條件之一，合格培養(yǎng)基的pH應(yīng)在規(guī)定值上下0.2的范圍內(nèi)。,2、無菌試驗,新制備的培養(yǎng)基要隨機(jī)抽取一定數(shù)量的樣品作無菌試驗

7、。對于壓力蒸氣滅菌后傾注的固體培養(yǎng)基，抽樣后放351溫箱培養(yǎng) 2448h；滅菌后經(jīng)無菌操作分裝的液體培養(yǎng)基要全部放入351溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h；對有些無需高壓滅菌只需煮沸消毒的選擇性培養(yǎng)基要取部分瓊脂，放入無菌肉湯管培養(yǎng)24h。上述試驗證實無細(xì)菌生長時才算合格。若有細(xì)菌生長，說明培養(yǎng)基制備過程中已受雜菌污染，除了尋找原因外，應(yīng)不再使用。,、細(xì)菌生長試驗,所有的培養(yǎng)基在使用前除了做無菌試驗外還必須用已知的標(biāo)準(zhǔn)菌株做細(xì)菌生長試驗以測定培養(yǎng)基性能是否符合要求。標(biāo)準(zhǔn)菌株分 2 種：一種是已知的可在某種培養(yǎng)基上生長并產(chǎn)生典型生物學(xué)性狀的，對培養(yǎng)基中的某種物質(zhì)產(chǎn)生陽性反應(yīng)的菌株；另一種是用已知的不能在某種培養(yǎng)

8、基上生長或?qū)ε囵B(yǎng)基中的某種物質(zhì)產(chǎn)生陰性生化反應(yīng)的菌株。,試劑質(zhì)控,臨床微生物實驗室常用的試劑包括染色液、診斷血清以及各種生化反應(yīng)試劑等。,染色液及染色方法質(zhì)量控制,染色液的配置必須按標(biāo)準(zhǔn)方法與分量，過濾后使用，每次記錄配置量與操作者。還要進(jìn)行染色步驟質(zhì)控。如革蘭染色在一張玻片上同時涂有金葡菌和大腸桿菌。以保證染色性判斷準(zhǔn)確無誤。,常用生化試劑的質(zhì)控,隨著細(xì)菌鑒定儀和快速微量生化鑒定板條的普及，臨床微生物檢驗常用的生化試劑種類日趨減少，應(yīng)注意在用試劑在貯存時的避光、冷藏等要求，保證試劑的穩(wěn)定性。不要使用過期的試劑。,診斷血清的質(zhì)控,診斷血清是一種重要的細(xì)菌鑒定的試劑，應(yīng)從有資質(zhì)的生產(chǎn)單位購買。驗

9、收時必須看清生產(chǎn)批號、血清效價、透明度與色澤。試驗中應(yīng)注意無菌操作，避免細(xì)菌污染。要經(jīng)常檢查貯存在4冰箱中的各種血清，若發(fā)現(xiàn)混濁，出現(xiàn)絮狀，應(yīng)停止使用。為保證血清凝集反應(yīng)結(jié)果準(zhǔn)確，應(yīng)每3個月對血清進(jìn)行一次質(zhì)控。不要使用過期的血清。,儀器設(shè)備的質(zhì)控,包括對冰箱、二氧化碳孵箱、普通孵箱、水浴箱等基本設(shè)備的每日溫度、氣體濃度的監(jiān)控記錄；顯微鏡、細(xì)菌鑒定儀等儀器的使用、保養(yǎng)、維修記錄。以保障實驗室各種設(shè)備、儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。,藥物敏感試驗的質(zhì)控,藥物敏感試驗是臨床微生物檢驗的重要步驟之一，其結(jié)果正確與否涉及治療效果的好壞。,影響藥敏試驗的因素,菌懸液濃度 藥敏紙片的質(zhì)量 MH 培養(yǎng)基的質(zhì)量 孵育的時間、溫度、氣體 操作人員的技術(shù),藥敏質(zhì)控系統(tǒng),經(jīng)過正規(guī)培訓(xùn)，掌握藥敏試驗操作方法的人員 有標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，包括藥敏試驗方法、標(biāo)準(zhǔn)菌株種類及應(yīng)用、藥敏試驗的質(zhì)控方法及允許范圍、藥物種類選擇與判斷標(biāo)準(zhǔn)等 有試驗所需的質(zhì)控菌株 使用質(zhì)量合格的消耗性檢驗材料 儀器設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)正常，控制標(biāo)準(zhǔn)在允許范圍內(nèi),紙片藥敏試驗的室內(nèi)質(zhì)控,基礎(chǔ)質(zhì)控：連續(xù)做30天，如失控超過3次還需繼續(xù)，如失控低于3次可改為每周1次。 糾控：每周質(zhì)控中發(fā)生失控應(yīng)糾控，方法：連續(xù)5天，每天1次，每次重復(fù)5個紙片，如找到明確失控原因，可立即改為每周1次，否則繼續(xù)。,發(fā)報告前的質(zhì)量控制,核實病原菌鑒定結(jié)果 被鑒定的細(xì)菌