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文檔簡介
1、實驗課題:觀察DNA和RNA在細胞中的分布,一、實驗原理 1.堿性染料能使核酸著色,甲基綠和吡羅紅均為堿性染料; DNA甲基綠綠色,RNA 吡羅紅紅色。 甲基綠與吡羅紅作為混合染料使用可顯示細胞中DNA和RNA在細胞中的分布。 2.鹽酸能夠改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,同時使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合。,補:高溫酸堿等條件能改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞。,我們觀察到細胞核中的DNA被染成綠色 而細胞質(zhì)中的RNA被染成紅色。,步驟總結(jié),生物組織中還原性糖、脂肪、蛋白質(zhì)和DNA的鑒定,1、實驗原理:,還原性糖+斐林試劑磚紅色沉淀 還原性糖:葡萄糖、麥
2、芽糖、果糖 非還原性糖:蔗糖、淀粉等,+,2、配制斐林試劑:,實驗一:還原性糖的鑒定,水浴加熱,實驗一:脂肪的鑒定,1、實驗原理:,脂肪+蘇丹橘黃色 脂肪+蘇丹紅色,取少量脂肪樣液,加入蘇丹,震蕩,可看到溶液呈了橘黃色,本實驗我們用蘇丹做染液。,實驗一:蛋白質(zhì)的鑒定,1、實驗原理:,蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑紫色絡(luò)合物,2、材料用具:,豆?jié){、蛋清、牛奶都是很好的實驗材料。,本實驗我們用蛋清做實驗材料,在用蛋清做實驗材料時,要注意將蛋清稀釋,如果稀釋不夠,反應后的產(chǎn)物會粘固在試管內(nèi)壁上,使反應不容易徹底。,問題探討: 1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實驗時,為什么要留出一部分樣液?,作對照,2、使用雙縮脲試
3、劑時為什么B液只能加34滴而不能 過量?,過量的雙縮脲試劑B會與試劑A反應,使溶液呈藍色,而掩蓋生成的紫色。,3、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久?,時間太長,Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應。,深化,實驗綠葉中色素的提取和分離,實驗原理:色素能夠溶解在有機溶劑無水乙醇中 實驗關(guān)鍵點: 1.選材時應注意選擇鮮嫩、色濃綠、無漿汁的葉片。如菠菜葉等。 2.畫濾液細線時,應以細、直、顏色濃綠為標準,重復畫線時必須等上次畫線干燥衙再進行,重復2-3次。3.層析時不要讓濾液細線觸及層析液。,綠葉中的色素不止一種,他們都能溶解在層析液中。然而,它們在層析液中的溶解度不同;溶解度高的
4、隨層析液在濾紙上擴散的快;反之則慢。這樣,幾分鐘之后綠葉中的色素就會隨著層析液在濾紙上的擴散而分離開。且溶解度最高的是胡蘿卜素,它隨層析液在濾紙上擴散的最快;葉黃素和葉綠素a的溶解度次之,葉綠素b的溶解度最低,擴散的最慢。,實驗總結(jié) (1)在研磨綠葉時,加入少許SiO2是為了研磨得充分,加入少許的CaCO3是為了防止研磨過程中色素受到破壞,加入10ml無水乙醇是使色素溶解在其中,便于提??; (2)因無水乙醇和層析液都是易揮發(fā)且層析液是有一定毒性的有機溶劑,所以研磨要快,收集的濾液要用棉塞塞住,層析時要加蓋,盡量減少有機溶劑的揮發(fā)。 (3)用毛細吸管畫濾液細線時,線條越細越直效果越好,重復劃幾次的目的是使濾液細線中含有較多的色素 (4)如果層析液浸沒了濾紙條上的
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