1、急性腎衰竭動物模型的建立,【實驗?zāi)康摹?1.學(xué)習(xí)復(fù)制急性腎衰竭動物模型的方法 。 2.觀察急性腎衰竭時機體的典型表現(xiàn)及血 酐水平的變化。 3.掌握急性腎衰竭的概念及發(fā)病機制 。,2,【實驗原理】,急性腎功能衰竭 指各種原因在短期內(nèi)引起腎臟泌尿功能急劇障礙，以致機體內(nèi)環(huán)境出現(xiàn)嚴(yán)重紊亂的病理過程，臨床表現(xiàn)有水中毒、氮質(zhì)血癥、高鉀血癥和代謝性酸中毒等,急性腎功能不全的分類 根據(jù)病因?qū)W，臨床上將急性腎功能不全分為腎前性、腎性、腎后性三種。,3,急性腎功能的發(fā)病機制,腎缺血,腎中毒,血流動力學(xué)異常,腎小管損傷,濾過膜受損,皮質(zhì)缺氧,髓質(zhì)充血,腎小管阻塞,原尿反漏,濾過系數(shù),外髓部供氧,GRF,少尿,4,

2、【實驗動物】,健康家兔，雄性，體重1.51.8Kg,5,【實驗器材和藥品】,20%烏拉坦溶液、慶大霉素注射液（1ml:4萬單位）、150U/ml肝素、0.9%生理鹽溶液、苦味酸 BL-420F實驗系統(tǒng)、哺乳動物手術(shù)器械一套、動脈導(dǎo)管、動脈夾、膀胱導(dǎo)尿管、注射器（2ml、5ml）、皮頭針一套、水浴箱、離心機、絲線,6,【實驗步驟】,家兔稱重、分組-體重相似為一組，并且實驗組和對照組體重相同或相似,生理鹽水作靜脈點滴輸液-耳緣靜脈滴注,家兔固定-仰臥位固定,剪去頸部和上腹部毛、麻醉- 20%氨基甲酸乙酯注射液4ml/kg，耳緣靜脈注射麻醉,在麻醉狀態(tài)下，做頸總動脈插管，并連接到試驗系統(tǒng)-取血1mL

3、測血肌酐和在實驗系統(tǒng)上讀取血壓以及記錄此時在尿量,7,在麻醉狀態(tài)下，自恥骨聯(lián)合上方腹部正中線切開皮膚，切口長46cm,夾閉腎動脈-沿腹白線打開腹腔，將內(nèi)臟推向左側(cè)，打開后腹膜，暴露腎蒂，分離腎動脈，實驗兔和夾閉腎動脈30分鐘，對照組腎臟不夾閉。,二組家兔耳緣靜脈注入慶大霉素4萬U/Kg,每隔10分鐘，取一次尿液，測定尿量，并做尿肌酐試驗。共取三次。,8,頸總動脈取血，做血肌酐試驗,最后將家兔一并處死，取出腎臟，觀察并比較家兔的腎臟。,9,血、尿肌酐測定方法（見表1）和內(nèi)生肌酐清除率的計算從頸總動脈取血置盛有肝素的離心管內(nèi)，離心后取血漿，按下表進(jìn)行實驗。 表1 血漿和尿液肌酐含量測定,-,10,計算：,11,【觀察項目】,表2 處理前和處理后對照組家兔各指標(biāo)變化,12,表3 處理前和處理后實驗組家兔各指標(biāo)變化,13,【預(yù)期實驗結(jié)果】,二組家兔兔子血壓升高，呼吸加深加快，心率加快，尿量減少，血/尿肌酐的濃度增高，內(nèi)生肌酐清除率升高，各項癥狀明顯易于測定。,14,正常腎臟切面圖,15,急性腎衰竭腎臟切面圖,16,急性腎衰竭鏡下圖,毒素引起的腎小管壞死通常彌散性累及腎小管，而由缺血（如心衰引起的嚴(yán)重低血壓）引起的腎小管壞死則成片狀受累。,17,【注意事項】,1.選擇體重相差不超過250g的家兔進(jìn)行對照 2.注意麻醉藥的劑量與注入劑量、觀察麻醉情況。 3.專人測定血/尿