1、動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體,提問(wèn)： 哪種植物細(xì)胞工程技術(shù)可以突破不同生物之間的生殖隔離障礙，培育出新的作物類型？,植物體細(xì)胞雜交技術(shù),你能回憶出植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程嗎？,植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過(guò)程圖,動(dòng)物細(xì)胞融合,動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程 請(qǐng)同學(xué)們閱讀課本P52動(dòng)物細(xì)胞融合,動(dòng)物細(xì)胞融合的概念,動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程,動(dòng)物細(xì)胞融合,融合后形成的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞,問(wèn)題討論,2、動(dòng)植物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別？這與它們雜交或融合過(guò)程有什么影響？,3、植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？那動(dòng)物細(xì)胞融合呢？,、植物體細(xì)胞雜交最終得到的是完整的植物個(gè)體，動(dòng)物細(xì)

2、胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎?,4、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是否相同？ 什么原理？,5、為什么要用滅活的病毒？,6、動(dòng)物細(xì)胞融合有什么意義？,2、動(dòng)植物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別？這與它們雜交或融合過(guò)程有什么影響？,3、植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？,離心、振動(dòng)、電激等物理方法；PEG等化學(xué)方法,問(wèn)題討論,動(dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁，動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中不須去除細(xì)胞壁和再生出細(xì)胞壁。,、植物體細(xì)胞雜交最終得到的是完整的植物個(gè)體，動(dòng)物細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎？ 不能，只能得到雜交細(xì)胞,4、動(dòng)物細(xì)胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？,能 ， 還可以利用滅活的病毒（生物

3、方法）進(jìn)行誘導(dǎo),問(wèn)題討論,、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是否相同？ 相同，都是細(xì)胞膜的流動(dòng)性,問(wèn)題討論,7、動(dòng)物細(xì)胞融合有什么意義？,6、為什么要用滅活的病毒？,病毒一般對(duì)生物體是有傷害的。,仙臺(tái)病毒,物理或 化學(xué)方法,喪失感染活性,保留融合活性,突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)源雜交成為可能。,有何同？不同？,動(dòng)物細(xì)胞融合,動(dòng)物細(xì)胞融合,獲得雜種植株,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較,抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？ 2 . 抗體是如何產(chǎn)生的？,單克隆抗體,B淋巴細(xì)胞,動(dòng)物在免疫過(guò)程中產(chǎn)生的抗體種類可達(dá)百萬(wàn)種 每一個(gè)淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 但是： 一個(gè)B淋巴細(xì)

4、胞在體外不能無(wú)限增殖,.,.,產(chǎn)量少、純度低、特異性差,單克隆抗體,、傳統(tǒng)制備抗體的缺點(diǎn)是？如何改進(jìn) ？,3、傳統(tǒng)制備抗體的方法是？,、如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？,單克隆抗體,問(wèn)題討論,提示：,1 .什么樣的細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體？ 2 . 什么樣的細(xì)胞可以無(wú)限增殖？,、瘤細(xì)胞和癌細(xì)胞有何區(qū)別？,共同點(diǎn)：兩者都有無(wú)限增殖的能力 不同點(diǎn)：瘤細(xì)胞不能轉(zhuǎn)移,設(shè)計(jì)方案： 一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖,雜種細(xì)胞,單克隆抗體,單克隆抗體制備過(guò)程,細(xì)胞融合、篩選,足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群,單克隆抗體,（選擇性培養(yǎng)基）,單克隆抗體,誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？,B

5、BB B瘤 瘤瘤 瘤,、細(xì)胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞？,思考：,雜交瘤細(xì)胞,、制備過(guò)程中應(yīng)用哪些細(xì)胞工程技術(shù)手段？,細(xì)胞融合技術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),診斷疾?。ㄗR(shí)別作用，如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）,單克隆抗體的應(yīng)用,優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速,用于治療疾病和運(yùn)載藥物（主要用于癌癥治療，也可運(yùn)載藥物，如 “生物導(dǎo)彈”）,（導(dǎo)向作用，作為載體，生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物，治療腫瘤） （位置準(zhǔn)確、療效高、副作用小）,小結(jié),兩個(gè)過(guò)程,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程,單克隆抗體制備過(guò)程,三個(gè)“一”,一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 滅活病毒,一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)

6、,單克隆抗體,下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的抗體實(shí)驗(yàn)方案,制備單克隆抗體,B細(xì)胞,抗體,細(xì)胞融合,滅活病毒,雙親細(xì)胞,分泌抗體,無(wú)限增殖,原代,傳代,50,世界上第一只克隆羊“多莉”的培育過(guò)程如圖所示，請(qǐng)據(jù)圖回答：,乙,甲,a,b,c,d,e,f,(1)圖中的甲為蘇格蘭綿羊，乙為多莉羊。那么，a和b是通過(guò)_分裂形成的，其DNA含量是體細(xì)胞的 _ ；c肯定是_ 細(xì)胞，乙的遺傳性狀與提供 _的綿羊 一致.,減數(shù),一半,體,細(xì)胞核,乙,甲,a,b,c,d,e,f,(2)產(chǎn)生 甲和乙的過(guò)程分別是和 （3）在形成乙是的過(guò)程中，需要將d的細(xì)胞核取出，將c細(xì)胞核移入d細(xì)胞內(nèi)，此技術(shù)叫。所需的受體細(xì)胞大多采用動(dòng)物卵細(xì)胞的原因是（4）綿羊的白色對(duì)黑色為顯色。若甲是白色綿羊，要判斷它是否純合體，選用與它交配的綿羊最好是-,有性生殖,克隆,核移植,卵細(xì)胞大，易于操作；卵細(xì)胞具有繼續(xù)分化的潛能。,黑毛,乙,甲,a,b,c,d,e,f,（5）在產(chǎn)生多莉羊時(shí)，需將e細(xì)胞形成的早期胚胎移入另一頭母羊（f）子宮里，這種技術(shù)在細(xì)胞工程中叫 （6）繼植物組織培養(yǎng)后，克隆綿羊的培育成功