1、高效液相色譜使用操作步驟一、泵操作面板PUMP：運(yùn)行鍵 START：梯度運(yùn)行鍵 PURGE：快沖鍵 RESET：復(fù)位鍵 HOLD： 程序暫停鍵 STOP： 泵停止鍵TIME： 程序開啟鍵 FLOW：流速： RSVR： A B C 精品文檔，超值下載PROG：程序 DEL：刪除程序 PMAX：最大壓力 PMIN：最小壓力 ENTER：確定TIME 0 FLOW ENTER （設(shè)置流速）TIME 0 RSVR ABC ENTER （設(shè)置溶劑）TIME 0 PROG ENTER （設(shè)置程序）TIME 0 % A 30 ENTER （設(shè)置比例）TIME 0 % B 30 ENTER （設(shè)置比例）TIM

2、E 0 % C 40 ENTER （設(shè)置比例）DEL PROG 1 ENTER （刪除程序）1. 對(duì)于梯度泵設(shè)定舉例如下：(人參皂苷的梯度)TIME 0 PROG 1 ENTERTIME 0 % A 81 ENTERTIME 15 % A 81 ENTERTIME 60 % A 65 ENTERTIME 65 % A 0 ENTERTIME 80 % A 0 ENTERTIME 81 % A 81 ENTERTIME 100 % A 81 ENTER因?yàn)锳+B之和始終是100%，所以B相就不用設(shè)了。7對(duì)于對(duì)照品在這種條件下只要對(duì)照品的峰全部出完后按下RESET鍵等20分鐘即可進(jìn)第二針進(jìn)完針后按

3、START鍵運(yùn)行梯度程序。但是對(duì)樣品來說一定要等峰出完后再按下RESET鍵等基線基走直才可進(jìn)下一針。二、檢測(cè)器操作面板RESET：復(fù)位鍵 A/Z：調(diào)零鍵 WL：調(diào)波長(zhǎng) ENTER：確定三、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作1、實(shí)驗(yàn)前流動(dòng)相提前配好過濾脫氣。2、置換流動(dòng)相時(shí)把泵的濾頭從原來的流動(dòng)相中換到新的流動(dòng)相中濾頭要輕拿輕放。3、液路排氣順序：首先打開排氣閥按PURGE鍵進(jìn)行排氣結(jié)束后按STOP鍵停止再擰緊排氣閥按PUMP鍵讓泵運(yùn)行。4、打開檢測(cè)器首先觀察右上角氘燈指示燈確認(rèn)氘燈是否點(diǎn)亮，按WL鍵調(diào)好實(shí)驗(yàn)波長(zhǎng)后按A/Z鍵調(diào)零。5、打開電腦打開在線工站選擇對(duì)應(yīng)的通道，輸入實(shí)驗(yàn)信息、方法、包括采樣控制，積分和儀器

4、條件，積分面積外標(biāo)法測(cè)絕對(duì)含量歸一法相對(duì)含量?jī)?nèi)標(biāo)法測(cè)絕對(duì)含量；后點(diǎn)數(shù)據(jù)采集，將電壓調(diào)到-2020，時(shí)間調(diào)到030，點(diǎn)零點(diǎn)校正后再點(diǎn)查看基線，大約1個(gè)小時(shí)左右基線基本穩(wěn)定（就是基本成直線，因?yàn)闄z測(cè)器打開后需要一定的穩(wěn)定時(shí)間，檢測(cè)器基本穩(wěn)定泵里面的流動(dòng)相同時(shí)也就置換好了），就可以進(jìn)樣了。6、進(jìn)對(duì)照品：對(duì)照品配成溶液后要過濾再進(jìn)樣等對(duì)照品的峰出來以后點(diǎn)停止采集輸入文件名后保存。（一般連進(jìn)三針為準(zhǔn)）7、進(jìn)樣品：樣品配成溶液后要過濾再進(jìn)樣等樣品的峰出來以后點(diǎn)停止采集輸入文件名后保存。8、進(jìn)樣閥搬閥順序搬到LOAD位置時(shí)進(jìn)針打完針后搬到INJECT位置進(jìn)樣要求打針勻速輕快搬閥輕快每次基本一樣，外標(biāo)法進(jìn)樣量

5、是定量管的四五倍。9、用以下公式算出樣品含量：C標(biāo)/C樣=S標(biāo)/S樣10、做校正曲線：打開離線點(diǎn)打開打開對(duì)照品的譜圖點(diǎn)積分方法（選用面積外標(biāo)法）點(diǎn)組分表點(diǎn)全選輸入所需要對(duì)照品的峰名點(diǎn)采用點(diǎn)校正點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)含量輸入含量（可以是對(duì)照品的濃度也可以是百分?jǐn)?shù)）OK點(diǎn)加入標(biāo)樣再次打開剛才打開的對(duì)照品的譜圖校正完畢點(diǎn)峰名看校正曲線圖點(diǎn)輸出取名保存。11、計(jì)算樣品的含量：打開離線-打開樣品的譜圖-點(diǎn)預(yù)覽點(diǎn)加載加載剛才對(duì)照品的校正曲線譜圖即可得出樣品的含量四、液相色譜儀注意事項(xiàng)：1、泵正常工作時(shí)，在流動(dòng)相和流速不變的前提下柱壓應(yīng)該是穩(wěn)定的，當(dāng)然在換流動(dòng)相時(shí)壓力變化是正常的，正常情況下如果柱壓升高基本上都是由色譜柱使

6、用時(shí)間長(zhǎng)引起的（只有更換色譜柱），如果正常情況下壓力突然降低有可能是（1）接頭處有漏液的地方，采取的方法是有濾紙檢查，如有漏液的地方用扳手?jǐn)Q緊即可。如果沒有漏液則可能是（2）白色的管子里面有氣泡從而導(dǎo)致流動(dòng)相進(jìn)不到泵里面去，采取的方法是排氣泡排氣時(shí)：先STOP停泵打開排氣閥按PURGE（快沖）鍵等氣泡排完后先STOP停泵擰緊排氣閥，其先后步驟不要搞反了。2、泵正常工作時(shí)最高壓力最好不要超過200KG，所以打開泵以后可以將泵的最大壓力調(diào)到200KG，這樣如果壓力超過上限則會(huì)自動(dòng)報(bào)警停機(jī)，流速最好不用超過1ML/MIN，如果使用時(shí)壓力超過200KG，建議將流速調(diào)低點(diǎn)以降低壓力（在色譜柱正常的情況下

7、），如果是因?yàn)樯V柱長(zhǎng)時(shí)間使用造成壓力升高則建議更換色譜柱（因?yàn)樯V屬于耗材長(zhǎng)時(shí)間使用就需要更換，更換的主要依據(jù)色譜柱出峰不正?；蛘咧鶋毫^高）。3、泵正常工作時(shí)平均每15天左右向注油孔加潤(rùn)滑油23滴。4、流動(dòng)相里面如果有鹽或酸類，做完實(shí)驗(yàn)后要先用95%二次蒸餾水與5%甲醇洗色譜柱40分鐘左右，然后用純甲醇洗30分鐘左右才可以關(guān)機(jī)。第二天如果繼續(xù)做實(shí)驗(yàn)流動(dòng)相里面仍舊有鹽或酸類，最好先用95%二次蒸餾水與5%甲醇過度20分鐘，再用流動(dòng)相。如果流動(dòng)相里面只有甲醇，水，乙腈。做完實(shí)驗(yàn)后就不用95%二次蒸餾水5%甲醇沖洗，可直接用純甲醇洗30分鐘即可關(guān)機(jī)。5、C18色譜柱的耐酸PH值范圍38使用時(shí)不要超出。6、儀器長(zhǎng)期不用時(shí)一定要將濾頭泡在甲醇里半月開機(jī)一次，如果開機(jī)時(shí)泵抽不上液可以打開排氣閥按PURGE快沖。7、調(diào)反壓器時(shí)要注意等液體流出