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1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)第 1 課時(shí)【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1 、簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用。2 、比較動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別?!緦W(xué)習(xí)重點(diǎn)】1 、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件?!咀灾鲗W(xué)習(xí)】一、動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段1、動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有哪幾種?2、 _ 是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念( 1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,它分散成_ ,后放在 _ 中,讓這些細(xì)胞 _ 和 _ 。( 2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是:_ 。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程( 1)基本概念什么是細(xì)胞貼壁?什么是接觸抑制?什么是原代培養(yǎng)?什么是傳代培養(yǎng)?

2、說明:分瓶之前,稱原代培養(yǎng);出現(xiàn)接觸抑制用胰蛋白酶處理,再分瓶培養(yǎng)為傳代培養(yǎng)。( 2)過程幼齡動(dòng)物組織或胚胎剪碎原代培養(yǎng)細(xì)胞懸液?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)胞細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)胰蛋白酶胰蛋白酶?jìng)鞔囵B(yǎng)細(xì)胞懸液細(xì)胞株或細(xì)胞系【思考探究】為什么選用幼齡的動(dòng)物組織或胚胎?1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)如何使組織分散為單個(gè)細(xì)胞?這說明細(xì)胞間的物質(zhì)是什么?能不能用胃蛋白酶?制成細(xì)胞懸液的主要目的是什么?培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿應(yīng)具備什么條件?貼滿瓶壁的細(xì)胞要如何處理才能繼續(xù)培養(yǎng)?目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10 代以內(nèi)的,為什么? 10 50 代,50 代以后細(xì)胞有什么變化?【例 1】下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中正確的是()A、動(dòng)物細(xì)胞培

3、育的目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細(xì)胞分散C、細(xì)胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中D、培養(yǎng)至50 代后的傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞株3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件無菌、無毒的環(huán)境采取什么措施保證無菌、無毒的環(huán)境?營養(yǎng)什么是合成培養(yǎng)基?培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)為什么要加入血清、血漿?溫度和 PH適宜的溫度一般為_ ;適宜的PH一般為 _ 。氣體環(huán)境細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要為O2 和 CO2,它們分別有什么作用?4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用生產(chǎn)生物制品:疫苗、干擾素、單克隆抗體等;2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)作為基因工程中的受體細(xì)胞;檢測(cè)有毒物質(zhì)及毒性;科研方面:篩選抗癌藥物、治療和預(yù)防疾病等。5、動(dòng)物細(xì)

4、胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的區(qū)別植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)理論基礎(chǔ) ( 原理 )細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基的物理性固體液體(合成培養(yǎng)基)質(zhì)培養(yǎng)基的成分水、礦質(zhì)元素、蔗糖、葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、氨基酸、瓊脂等維生素、動(dòng)物血清等過程結(jié)果新的植株或組織新的細(xì)胞株或細(xì)胞系 植株快速繁殖脫毒植株的生產(chǎn)蛋白質(zhì)制品如病毒培育疫苗、干擾素、單克隆抗體用途 人工種子生產(chǎn)藥物、 殺蟲劑等;檢測(cè)有毒物質(zhì); 研等究藥理病理;移植治療轉(zhuǎn)基因植物的培育相同點(diǎn)都需人工條件下的無菌操作,需要適宜的溫度、PH、O2 等特別注意以下幾點(diǎn):1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基成分特有的動(dòng)物血清含有蛋白質(zhì)、氨基酸、 葡萄糖、 激素等多種成分。2. 兩技術(shù)手

5、段培養(yǎng)過程中都進(jìn)行有絲分裂,都是無性繁殖,都可稱克隆,都不涉及減數(shù)分裂。3. 植物組織培養(yǎng)最終產(chǎn)生新個(gè)體,體現(xiàn)全能性;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細(xì)胞,不形成新個(gè)體,故不能體現(xiàn)全能性?!纠?2】一般來說,動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件()無毒的環(huán)境無菌的環(huán)境合成培養(yǎng)基需加血漿溫度與動(dòng)物體溫相近需要 O2,不需要 CO2 CO2能調(diào)培養(yǎng)液 pHA. B. C. D. 3動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)【例 3】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于()A. 培養(yǎng)基不同;B. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行;C. 動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng),而植物細(xì)胞不能;D. 動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng),而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株。【隨堂練習(xí)】

6、1、在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常選用的培養(yǎng)材料是()A、衰老退化的動(dòng)物組織細(xì)胞B、成熟動(dòng)物個(gè)體的體細(xì)胞C、動(dòng)物的受精卵細(xì)胞D、動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物個(gè)體的細(xì)胞2、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中,錯(cuò)誤的是()A、用于培養(yǎng)的細(xì)胞大多取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織B、將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞C、在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離,制成懸浮液D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50 代左右,所培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)衰老死亡3、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,使用胰蛋白酶的目的是()A、使動(dòng)物組織分散為單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)B、去掉細(xì)胞壁成為原生質(zhì)體C、去掉細(xì)胞膜暴露出原生質(zhì)體便于細(xì)胞融合D 、促進(jìn)蛋白質(zhì)水解為多肽4、離體的植物組織或細(xì)胞在適當(dāng)培養(yǎng)條件下發(fā)育成完整的植株,離體動(dòng)物

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