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參附注射液對(duì)大鼠腦缺血再灌注后海馬悅粵員區(qū)悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿表達(dá)的影響于臘梅員搖李乃選圓搖王桂華員搖刁匯玲員搖張搖慧員員濱州醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室搖煙臺(tái)市搖圓遠(yuǎn)源園園猿;圓濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院介入醫(yī)學(xué)科【摘要】搖目的搖研究參附注射液對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后海馬悅粵員區(qū)半胱氨酸蛋白酶?猿(悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿)表達(dá)的影響。方法搖成年雄性雜閱大鼠猿園只,隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、參附注射液治療組。采用線栓法制備大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞(皂蚤鑿鑿造藻糟藻則藻遭則葬造葬則賊藻則贈(zèng)燥糟糟造怎澤蚤燥灶,醞悅粵韻)再灌注模型,應(yīng)用勻耘染色檢測(cè)海馬悅粵員區(qū)組織病理學(xué)改變,免疫組織化學(xué)法檢測(cè)海馬悅粵員區(qū)神經(jīng)細(xì)胞悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿的表達(dá)。結(jié)果搖缺血組大鼠海馬悅粵員區(qū)神經(jīng)細(xì)胞悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿的表達(dá)較假手術(shù)組顯著增強(qiáng)(孕約園郾園員),給予參附注射液處理后,悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿的表達(dá)較缺血組減弱(孕約園郾園員),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論搖參附注射液可降低大鼠局灶性腦缺血再灌注后海馬悅粵員區(qū)悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿的表達(dá),可能與其腦保護(hù)作用有關(guān)。【關(guān)鍵詞】搖參附注射液;腦缺血再灌注;半胱氨酸蛋白酶?猿;凋亡【中圖分類號(hào)】搖砸苑源猿援猿搖【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】搖粵搖【文章編號(hào)】搖員園園員鄄怨緣員園(圓園員員)園猿鄄園員苑怨鄄園猿耘棗棗藻糟賊燥棗雜澡藻灶棗怎蚤灶躁藻糟賊蚤燥灶燥灶賊澡藻藻曾責(zé)則藻澤澤蚤燥灶燥棗悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿蚤灶賊澡藻悅粵員葬則藻葬燥棗賊澡藻澡蚤責(zé)責(zé)燥糟葬皂責(zé)怎澤扎燥灶藻燥棗則葬賊澤葬棗賊藻則糟藻則藻遭則葬造蚤澤糟澡藻皂蚤葬?則藻責(zé)藻則棗怎澤蚤燥灶再哉蘊(yùn)葬皂藻蚤員搖蘊(yùn)隕暈葬蚤曾怎葬灶圓搖宰粵暈鄖鄖怎蚤澡怎葬員搖閱隕粵韻勻怎蚤造蚤灶早員搖在勻粵暈鄖勻怎蚤員員閱藻責(zé)葬則賊皂藻灶賊燥棗孕澡贈(zèng)澤蚤燥造燥早贈(zèng),月蚤灶扎澡燥怎醞藻鑿蚤糟葬造哉灶蚤增藻則澤蚤賊贈(zèng),再葬灶賊葬蚤圓遠(yuǎn)源園園猿;圓閱藻責(zé)葬則賊皂藻灶賊燥棗隕灶賊藻則增藻灶賊蚤燥灶葬造醞藻鑿蚤糟蚤灶藻,粵棗棗蚤造蚤葬賊藻鑿勻燥澤責(zé)蚤賊葬造燥棗月蚤灶扎澡燥怎醞藻鑿蚤糟葬造哉灶蚤增藻則澤蚤賊贈(zèng)【粵遭澤賊則葬糟賊】搖韻遭躁藻糟賊蚤增藻搖栽燥澤賊怎鑿贈(zèng)賊澡藻藻棗棗藻糟賊燥棗雜澡藻灶棗怎蚤灶躁藻糟賊蚤燥灶燥灶賊澡藻藻曾責(zé)則藻澤澤蚤燥灶燥棗賊澡藻悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿蚤灶悅粵員澡蚤責(zé)責(zé)燥糟葬皂責(zé)怎澤扎燥灶藻燥棗則葬賊澤葬棗賊藻則糟藻則藻遭則葬造蚤澤糟澡藻皂蚤葬?則藻責(zé)藻則棗怎澤蚤燥灶援醞藻賊澡燥鑿澤搖栽澡藻猿園皂葬造藻雜責(zé)則葬早怎藻?閱葬憎造藻贈(zèng)則葬賊澤憎藻則藻鑿蚤增蚤鑿藻鑿蚤灶賊燥猿早則燥怎責(zé)澤:澤澡葬皂燥責(zé)藻則葬賊蚤燥灶早則燥怎責(zé),糟藻則鄄藻遭則葬造蚤澤糟澡藻皂蚤葬早則燥怎責(zé)葬灶鑿雜澡藻灶棗怎蚤灶躁藻糟賊蚤燥灶蚤灶賊藻則增藻灶賊藻鑿早則燥怎責(zé)援栽澡藻棗燥糟葬造糟藻則藻遭則葬造蚤澤糟澡藻皂蚤葬皂燥鑿藻造澤燥棗則葬賊澤憎藻則藻藻澤賊葬遭造蚤澤澡藻鑿遭贈(zèng)賊澡藻皂蚤鑿鑿造藻糟藻則藻遭則葬造葬則賊藻則贈(zèng)燥糟糟造怎澤蚤燥灶(醞悅粵韻)憎蚤賊澡蘊(yùn)燥灶早葬鴛澤皂藻賊澡燥鑿澤援勻耘澤賊葬蚤灶蚤灶早憎葬澤怎澤藻鑿賊燥鑿藻賊藻糟賊澡蚤澤賊燥責(zé)葬賊澡燥造燥早蚤糟葬造糟澡葬灶早藻澤蚤灶悅粵員葬則藻葬燥棗澡蚤責(zé)責(zé)燥鄄糟葬皂責(zé)怎澤援栽澡藻藻曾責(zé)則藻澤澤蚤燥灶燥棗悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿憎葬澤燥遭澤藻則增藻鑿遭贈(zèng)蚤皂皂怎灶燥澡蚤澤賊燥?糟澡藻皂蚤澤賊則贈(zèng)援砸藻澤怎造賊澤搖悅燥皂責(zé)葬則藻鑿憎蚤賊澡賊澡藻澤澡葬皂燥責(zé)藻則葬賊蚤燥灶早則燥怎責(zé),賊澡藻藻曾責(zé)則藻澤澤蚤燥灶燥棗悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿蚤灶糟則藻葬澤藻鑿燥遭增蚤燥怎澤造贈(zèng)蚤灶糟藻則藻遭則葬造蚤澤糟澡藻皂蚤葬早則燥怎責(zé)(孕約園郾園員)援粵棗賊藻則早蚤增蚤灶早雜澡藻灶棗怎蚤灶躁藻糟賊蚤燥灶,賊澡蚤澤糟澡葬灶早藻澤憎藻則藻憎藻葬噪藻灶(孕約園郾園員)援悅燥灶糟造怎澤蚤燥灶搖雜澡藻灶棗怎蚤灶躁藻糟賊蚤燥灶糟葬灶蚤灶澡蚤遭蚤賊葬責(zé)燥責(zé)賊燥澤蚤澤賊澡則燥怎早澡鑿藻澤糟藻灶鑿蚤灶早賊澡藻藻曾責(zé)則藻澤澤蚤燥灶燥棗悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿蚤灶悅粵員澡蚤責(zé)鄄責(zé)燥糟葬皂責(zé)怎澤扎燥灶藻燥棗則葬賊澤葬棗賊藻則糟藻則藻遭則葬造蚤澤糟澡藻皂蚤葬?則藻責(zé)藻則棗怎澤蚤燥灶援【運(yùn)藻贈(zèng)憎燥則鑿澤】搖雜澡藻灶棗怎蚤灶躁藻糟賊蚤燥灶,糟藻則藻遭則葬造蚤澤糟澡藻皂蚤葬?則藻責(zé)藻則棗怎澤蚤燥灶,悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿,葬責(zé)燥責(zé)賊燥澤蚤澤搖搖在腦缺血再灌注后,缺血中心區(qū)的神經(jīng)元死亡以壞死形式為主,而缺血周圍區(qū)的神經(jīng)元死亡與凋亡有關(guān)。細(xì)胞凋亡的過程受到許多凋亡基因的調(diào)控,半胱氨酸蛋白酶?猿(糟贈(zèng)澤賊藻蚤灶贈(zèng)造葬澤責(zé)蚤則葬賊藻?澤責(zé)藻糟蚤棗蚤糟責(zé)則燥鄄賊藻蚤灶葬澤藻?猿,悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿)就是一種非常重要的凋亡基因,在凋亡過程中發(fā)揮著重要作用。參附注射液(雜澡藻灶棗怎蚤灶躁藻糟賊蚤燥灶,雜云)是由中醫(yī)治療厥脫證(休克)著名古方參附湯加工提煉而成,為紅參和黑附片的提取物,主要成分為人參皂苷和烏頭類生物堿員。近年來,已有文獻(xiàn)報(bào)道參附注射液對(duì)腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)元的凋亡具有保護(hù)作用,其具體作用機(jī)制尚不是很清楚,可能與基因遭葬曾、遭糟造?圓等有關(guān)圓,但其對(duì)悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿表達(dá)的影響至今未見報(bào)導(dǎo)。為此,作者觀察了參附注射液對(duì)腦缺血再灌注損傷后海馬悅粵員區(qū)神經(jīng)細(xì)胞悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿表達(dá)的變化,以闡述其腦保護(hù)作用的具體機(jī)制。員搖材料和方法員援員搖實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及所用試劑搖健康成年雄性雜閱大鼠猿園只,雜孕云級(jí),體質(zhì)量圓園園耀圓緣園早,購(gòu)于山東綠葉制藥有限公司,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào):雜悅載運(yùn)(魯)怨苑員濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)圓園員員年遠(yuǎn)月第猿源卷第猿期搖月醞哉允燥怎則灶葬造,允怎灶援圓園員員,災(zāi)燥造援猿源,暈燥援猿基金資助項(xiàng)目:濱州醫(yī)學(xué)院科技計(jì)劃(月再圓園園怨運(yùn)允圓怨)萬方數(shù)據(jù)圓園園怨園園園怨。參附注射液為雅安三九藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號(hào):園怨員圓園緣。悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿免疫組化試劑盒購(gòu)于武漢博士德公司。員援圓搖動(dòng)物分組及模型制備搖將動(dòng)物隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、雜云治療組,每組員園只。參照蘊(yùn)燥灶早葬猿栓線法復(fù)制大鼠左側(cè)大腦中動(dòng)脈閉塞(皂蚤鑿鑿造藻糟藻則藻遭則葬造葬則賊藻則贈(zèng)燥糟糟造怎澤蚤燥灶,醞悅粵韻)模型。大鼠以員園豫水合氯醛(猿緣園皂早轅噪早)腹腔內(nèi)注射麻醉,仰臥固定,頸部正中切口,分離左側(cè)頸總動(dòng)脈及頸內(nèi)、外動(dòng)脈,結(jié)扎頸總動(dòng)脈及頸外動(dòng)脈根部,由頸總動(dòng)脈近分叉處剪一小口插入尼龍線,插入長(zhǎng)度約員愿耀圓園皂皂時(shí)感到有輕微阻力時(shí)停止,扎緊并固定插線,縫合皮膚,阻斷血流圓澡后,拔線實(shí)現(xiàn)再灌注圓源澡。假手術(shù)組僅分離左側(cè)頸總動(dòng)脈。雜云治療組于術(shù)前員周至術(shù)后每日(共員源鑿)經(jīng)腹腔注射參附注射液,劑量為員園皂造轅噪早。員援猿搖行為學(xué)評(píng)分搖觀察各組大鼠神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的變化。按蘊(yùn)燥灶早葬猿緣分法標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分,園分:無神經(jīng)損傷;員分:不能完全伸展右側(cè)前肢;圓分:向右側(cè)轉(zhuǎn)圈;猿分:向右側(cè)傾倒;源分:不能自發(fā)行走,意識(shí)水平下降。員耀源分為造模成功并繼續(xù)后續(xù)試驗(yàn);死亡者和少于員分者棄去并重新補(bǔ)入成功模型制備動(dòng)物,繼續(xù)后續(xù)試驗(yàn)。員援源搖勻耘染色及免疫組化搖各組大鼠在深麻醉狀態(tài)下打開胸腔,心臟快速相繼灌注溫生理鹽水和源豫多聚甲醛各圓緣園皂造。灌注完畢后快速斷頭取海馬組織,常規(guī)固定、石蠟包埋,在切片機(jī)上連續(xù)切片,片厚源皂,將切片隨機(jī)分為圓組,一組進(jìn)行勻耘染色,另一組應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)海馬悅粵員區(qū)悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿的表達(dá)。勻耘染色:切片常規(guī)脫蠟至水,蘇木精染色員園皂蚤灶,鹽酸酒精分色猿園澤,伊紅復(fù)染緣皂蚤灶,脫水、透明、常規(guī)封片,鏡下觀察。用雜孕法進(jìn)行免疫組化染色,檢測(cè)悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿。嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作,滴加一抗悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿緣園造(員頤員園園稀釋),滴加生物素化二抗緣園造,閱粵月顯色,顯微鏡下控制反應(yīng)時(shí)間,常規(guī)封片,鏡下觀察。員援緣搖統(tǒng)計(jì)學(xué)處理搖所有數(shù)據(jù)均以珋曾依澤表示,用雜孕雜雜員猿援園統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,采用單因素方差分析(粵暈韻災(zāi)粵)和擇檢驗(yàn),孕約園援園緣為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。圓搖結(jié)果圓援員搖神經(jīng)行為癥狀評(píng)分結(jié)果搖模型組大鼠術(shù)后出現(xiàn)明顯的神經(jīng)功能缺陷癥狀,大多數(shù)表現(xiàn)為右側(cè)前肢屈曲,行走時(shí)向右側(cè)偏移,神經(jīng)行為癥狀評(píng)分與假手術(shù)組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(孕約園郾園員);雜云治療組大鼠與腦缺血模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(孕約園郾園緣),結(jié)果見表員。圓援圓搖各組大鼠勻耘染色結(jié)果搖勻耘染色結(jié)果顯示,假手術(shù)組大鼠海馬悅粵員區(qū)神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,有數(shù)層錐體細(xì)胞,排列緊密;模型組大鼠海馬悅粵員區(qū)錐體細(xì)胞層次減少,排列稀疏,神經(jīng)細(xì)胞腫脹;雜云治療組大鼠海馬悅粵員區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)量較模型組增多,細(xì)胞水腫略減輕,但排列較紊亂(見圖員)。圓援猿搖海馬悅粵員區(qū)神經(jīng)細(xì)胞悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿的表達(dá)搖悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿陽性神經(jīng)細(xì)胞染色主要位于胞漿,胞漿呈棕黃色。假手術(shù)組見少量悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿陽性細(xì)胞表達(dá)。模型組海馬悅粵員區(qū)神經(jīng)細(xì)胞悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿陽性細(xì)胞數(shù)增加,尤以梗死周邊區(qū)更為明顯。悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿染色陽性細(xì)胞數(shù)與假手術(shù)組比較有顯著差異(孕約園郾園員)。雜云治療組悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿染色陽性細(xì)胞數(shù)與模型組比較顯著減少(孕約園郾園員)。結(jié)果見表員及圖圓。表員搖各組神經(jīng)功能缺損評(píng)分和悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿表達(dá)的比較(珋曾依澤)組搖別神經(jīng)功能缺損評(píng)分悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿陽性細(xì)胞數(shù)假手術(shù)組園員援遠(yuǎn)園依園援緣緣模型組猿援猿園依園援遠(yuǎn)愿猿猿援圓園依苑援園員雜云治療組圓援源園依園援愿源圓園援圓園依源援怨苑搖搖注:模型組與假手術(shù)組比較孕約園援園員;雜云治療組與模型組比較孕約園援園緣,孕約園援園員。圖1海馬CA1區(qū)HE染色結(jié)果(100)假手術(shù)組模型組SF治療組園愿員濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)圓園員員年遠(yuǎn)月第猿源卷第猿期搖月醞哉允燥怎則灶葬造,允怎灶援圓園員員,災(zāi)燥造援猿源,暈燥援猿萬方數(shù)據(jù)假手術(shù)組模型組SF治療組圖2海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞Caspase3的表達(dá)(免疫組化染色,100)猿搖討論搖搖腦缺血再灌注可誘發(fā)細(xì)胞凋亡,腦缺血再灌注后腦組織中凋亡的細(xì)胞大多為神經(jīng)細(xì)胞源。有實(shí)驗(yàn)表明大鼠全腦缺血再灌注后海馬區(qū)延遲性神經(jīng)元死亡是不同于壞死的一個(gè)過程緣,凋亡是其神經(jīng)元丟失的重要原因。如果迅速恢復(fù)腦缺血周圍區(qū)的血供,可以抑制缺血神經(jīng)元凋亡,改善神經(jīng)元的生存環(huán)境,對(duì)缺血性腦損傷有積極的保護(hù)作用。搖搖細(xì)胞凋亡是受基因調(diào)控的級(jí)聯(lián)反應(yīng)過程。近年來研究發(fā)現(xiàn),悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿蛋白參與了腦缺血后神經(jīng)元損傷的病理過程,在腦缺血再灌注損傷中起重要的作用遠(yuǎn)。悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿是腦缺血后介導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵蛋白酶苑,是參與凋亡的悅葬澤責(zé)葬澤藻級(jí)聯(lián)反應(yīng)的最終效應(yīng)子,它主要通過消化、破壞細(xì)胞內(nèi)多種蛋白酶復(fù)合體,激活核內(nèi)核酸酶,造成閱暈粵裂解,破壞細(xì)胞鈣泵功能等機(jī)制來進(jìn)一步切割不同底物,執(zhí)行最終的細(xì)胞凋亡愿耀員園。在凋亡的執(zhí)行階段,悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿能有效水解細(xì)胞的結(jié)構(gòu)蛋白和功能蛋白,從而殺死細(xì)胞,造成不可逆性的損害員員。有研究發(fā)現(xiàn),使用悅葬澤責(zé)葬澤藻的抑制劑可阻止局灶性腦缺血鼠發(fā)生遲發(fā)性神經(jīng)元死亡,有效地抑制凋亡,縮小腦梗死體積,改善預(yù)后員圓。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示大鼠腦缺血再灌注后悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿表達(dá)增加,與假手術(shù)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,證實(shí)了細(xì)胞悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿陽性表達(dá)與細(xì)胞凋亡的一致。搖搖參附注射液主要成分為人參皂苷和烏頭堿,分別為紅參和黑附片的提取物。參附注射液對(duì)腦、心、肝、腎缺血再灌注損傷、休克等具有一定的保護(hù)作用員猿。而參附注射液對(duì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響目前國(guó)內(nèi)報(bào)道較少,對(duì)神經(jīng)細(xì)胞悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿表達(dá)的影響更是未見報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)參附注射液治療組大鼠海馬悅粵員區(qū)神經(jīng)細(xì)胞悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿的表達(dá)與模型組比較降低,并且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示參附注射液對(duì)腦缺血再灌注后悅粵員區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用可能是通過影響凋亡基因悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿的表達(dá),從而在一定程度上抑制了神經(jīng)細(xì)胞凋亡,發(fā)揮其保護(hù)腦組織的作用。參搖考搖文搖獻(xiàn)員吳紅金,余少平,謝芳援參附注射液的臨床應(yīng)用與機(jī)制研究允援中國(guó)自然醫(yī)學(xué)雜志,圓園園源,遠(yuǎn)(圓):?jiǎn)T圓園?員圓猿援圓王慶九援參附注射液對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的干預(yù)作用允援中國(guó)婦幼保健,圓園園怨,圓源(圓猿):猿猿園源?猿猿園遠(yuǎn)援猿蘊(yùn)燥灶早葬耘在,宰藻蚤灶澤賊藻蚤灶孕砸,悅葬則造澤燥灶雜,藻賊葬造援砸藻增藻則澤蚤遭造藻皂蚤鑿鑿造藻糟藻則藻鄄遭則葬造葬則賊藻則贈(zèng)燥糟糟造怎澤蚤燥灶憎蚤賊澡燥怎賊糟則葬灶蚤藻糟賊燥皂贈(zèng)蚤灶則葬賊澤允援雜賊則燥噪藻,員怨愿怨,圓園(員):愿源?怨員援源孕藻灶早允,醞葬燥載韻,雜賊藻增藻灶澤燥灶云云,藻賊葬造援栽澡藻澡藻則遭蚤糟蚤鑿藻責(zé)葬則葬擇怎葬賊蚤灶鑿怎糟藻澤鑿燥責(zé)葬皂蚤灶藻則早蚤糟灶蚤早則葬造葬責(zé)燥責(zé)賊燥澤蚤澤賊澡則燥怎早澡澤怎澤賊葬蚤灶藻鑿葬糟賊蚤增葬賊蚤燥灶燥棗賊澡藻允暈運(yùn)責(zé)葬賊澡憎葬贈(zèng)允援允月蚤燥造悅澡藻皂,圓園園源,圓苑怨(猿員):猿圓遠(yuǎn)圓緣?猿圓遠(yuǎn)猿圓援緣運(yùn)怎賊怎噪韻,孕燥造蚤鄖,月葬澤葬早葬勻援砸藻澤增藻則葬賊則燥造責(zé)則燥賊藻糟賊澤葬早葬蚤灶澤賊澡贈(zèng)鑿則燥曾贈(zèng)灶燥灶藻鄄灶葬蚤灶鑿怎糟藻鑿葬責(zé)燥責(zé)賊燥澤蚤澤遭贈(zèng)遭造燥糟噪蚤灶早允暈運(yùn)葬灶鑿糟?允哉暈孕粵孕圓員澤蚤早灶葬造蚤灶早允援栽燥曾蚤糟燥造雜糟蚤,圓園園遠(yuǎn),怨園(員):?jiǎn)T圓園?員猿圓援遠(yuǎn)雜燥造葬則燥早怎隕,栽澤怎遭燥噪葬憎葬栽,悅葬澡蚤造造允,藻賊葬造援粵灶賊蚤?葬責(zé)燥責(zé)賊燥賊蚤糟藻棗棗藻糟賊燥棗早則葬灶鄄怎造燥糟贈(zèng)賊藻糟燥造燥灶贈(zèng)澤賊蚤皂怎造葬賊蚤灶早棗葬糟賊燥則葬棗賊藻則棗燥糟葬造糟藻則藻遭則葬造蚤澤糟澡藻皂蚤葬蚤灶賊澡藻則葬賊允援暈藻怎則燥澤糟蚤藻灶糟藻,圓園園遠(yuǎn),員源猿(源):怨遠(yuǎn)緣?怨苑源援苑雜澡蚤皂蚤扎怎勻,韻澡早燥澡醞,隕噪藻鑿葬醞,藻賊葬造援悅葬澤責(zé)葬澤藻?猿?造蚤噪藻責(zé)則燥賊藻葬澤藻葬糟賊蚤增蚤賊贈(zèng)?蚤灶鑿藻責(zé)藻灶鑿藻灶賊葬責(zé)燥責(zé)賊燥澤蚤澤葬賊賊澡藻燥灶澤藻賊燥棗灶藻怎則燥灶葬造糟藻造造鑿藻葬賊澡蚤灶賊澡藻早藻則鄄遭蚤造澡蚤責(zé)責(zé)燥糟葬皂責(zé)怎澤葬棗賊藻則早造燥遭葬造蚤澤糟澡藻皂蚤葬允援月
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