蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 1 前言 隨著人們生活水平的 提高，人們對生命質(zhì)量和長壽的渴望日趨強烈， 而單純依靠化學(xué)藥品是難以滿足人們的這些追求的。 中藥是中國醫(yī)藥學(xué)寶庫中的一顆明珠，為中華民族的健康和繁衍做出了巨大貢獻。為了保證中藥的安全性和有效性，數(shù)千年以來，中藥一直處于不斷標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化的進程中。 建立對中藥的質(zhì)量控制體系必須立足于中藥的特色 ， 中藥的質(zhì)量控制方法 必須能對起效的全成分（有機成分、無機成分和絡(luò)合物成分）進行控制 ， 只有這樣，所建立的質(zhì)量控制體系才能真正達到控制中藥質(zhì)量、保證中藥用藥安全有效的目的。 色譜指紋圖譜分析是一種 可行的質(zhì)量 控制模式，它可為中藥材和中成藥提供綜合的、宏觀的和可量化的質(zhì)量評價。 目前在國際上，美國食品藥品管理局、英國草藥典、印度草藥典、德國藥用植物學(xué)會、加拿大藥用植物學(xué)會均接受指紋圖譜的質(zhì)量控制方法，這表明指紋圖譜己成為國際公認(rèn)的控制中成藥、天然藥物質(zhì)量的最有效的方 法 。 1 指紋圖譜雖是目前能夠為國內(nèi)外廣泛接受的一種中藥質(zhì)量評價模式，但單純的化學(xué)成分指紋圖譜還不能很準(zhǔn)確地評價中藥的成分與其藥效之間存在的相關(guān)信息。所以，進 一步深入研究在此基礎(chǔ)上探討的新領(lǐng)域 “譜效關(guān)系學(xué)”成為必然。 2 前胡是一味已有 1500多年 藥用歷史的常用中藥 , 少毛北前胡 為前胡的地方習(xí)用品種 。 主要分布于天水 (北道、清水、甘谷 )、 隴南 (徽縣、兩當(dāng)、康縣 )、定西 (岷縣、漳縣 )、臨夏 (康樂 )、甘南 (卓尼 )、平?jīng)?(平?jīng)?、華亭、莊浪、靈臺 )及慶陽 ， 其中隴東、 隴南及天水有大量收購。該品種質(zhì)地堅硬，柴性大，商品習(xí)稱硬桿前胡 ， 甘谷 、漳縣等地又稱石防風(fēng) ， 莊浪、康縣等地尚稱前胡。少毛北前胡 在甘肅 作前胡使用，分布廣泛，資源豐富，使用歷史悠久 ， 事實上已成為 甘肅 省 前胡 商品 藥材 的主流。在前期的研究中， 從化學(xué)成分 、 藥物代謝動力學(xué)的角度 來看， 將其作為中藥 “ 前胡 ”的代用品是可 能的。 本論文將通過少毛北前胡指紋圖譜與藥效關(guān)聯(lián)性研究來確定發(fā)揮藥效的特征色譜峰， 為將來 少毛北前胡的活性部位 或活性成分 開發(fā)為新藥 提供 技術(shù)和理論支持，從而為其 作為中藥 “ 前胡 ” 的代用品可 行性提供 支持。蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 2 第一章 綜述 藥指紋圖譜 中藥指紋圖譜是借用 藥材或中成藥經(jīng)過適當(dāng)處 理后，利用現(xiàn)代信息采集技術(shù)和質(zhì)量分析手段得到的能夠顯現(xiàn)中藥材或中成藥性質(zhì)的圖像、圖形、光譜的圖譜及其數(shù)據(jù)，即為中藥指紋圖譜 。 它是一種綜合的、可量化的鑒別手段，用于鑒別中藥材的真?zhèn)巍?3中藥指紋圖譜可用于中藥研 究、生產(chǎn)的各個階段，因而根據(jù)應(yīng)用的對象可分為中藥材指紋圖譜、中藥原料藥 (包括飲片、配伍顆粒 )指紋圖譜和中藥制劑指紋圖譜，細分還可包括中藥生產(chǎn)過程中間產(chǎn)物的指紋圖譜。 4 藥指紋圖譜的特點 1 1 1 1 專屬性、唯一性： 指紋圖譜必須反映出該藥材 (或成藥 )有別于其他任何物質(zhì)。對于中 藥材，指紋特征能反映出產(chǎn)地和采收期不同而造成的差異；對于中成藥， 則能反映出同產(chǎn)品不同批次問的質(zhì)量差異。 1 1 種的唯一性和個體的相似性：利用色譜技術(shù)進行指 紋圖譜分析的中藥材因 生長年限、生長環(huán)境的變化而可 能產(chǎn)生個體間較為明顯的差異但個體必然有群體共有的相似性 ， 應(yīng)該既具有判斷該藥材真?zhèn)蔚摹肮残浴?，?可能反映不同的產(chǎn)地、不同采收期、不同處理加工工藝的“特性”特征。 1 1 體性和模糊性 ：整體性是指中藥化學(xué)成分的整體組成及特性，即圖譜應(yīng)能相對全面、系統(tǒng)地體現(xiàn)中藥成分的整體面貌；模糊性是指個體樣品本身就存在著未知因 素，難以對 所有 化學(xué)成分進行精確的定性 定量分析，故在解決實際問題時應(yīng)采用模糊數(shù)學(xué)等手段 。 5 藥指紋圖譜研究方法 目前關(guān)于中藥指紋圖譜的研究方法有色譜法、光譜法、核磁共振譜、聯(lián) 用技術(shù) 。色譜法包括薄層色譜 (、高效液相包譜 (，氣相色譜 (和 毛細管電泳 (等 。 具有很高的分離度，可把復(fù)雜的化學(xué)成分進行分離而形成高低不同的峰組成一張色譜圖，這些色譜峰的高度和峰面積分別代表了各種不同化學(xué)成分和其含量 ,整個色譜圖表征了該樣品所含化學(xué)成分的多少和量的大小 ； 提供信息量有限，很適于非揮發(fā)性成分； 蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 3 別是生物大分子 肽和蛋白的分離，但其重現(xiàn)性有待提高 ；光譜法包括紅外光譜和 紫外光譜； 聯(lián)用技術(shù)是最有效的建立指紋圖譜的方法，如 合解決中藥復(fù)雜體系的要求，但儀器價格昂貴，不易推廣使用。 6 藥譜效關(guān)系 中藥譜效關(guān)系是指建立在中藥指紋圖譜的研究基礎(chǔ)上，最大限度地獲取有用的化學(xué)信息，將標(biāo)示物質(zhì)群特征峰的指紋圖譜與藥效結(jié)果聯(lián)系起來，為確立中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、制定反映產(chǎn)品內(nèi)在質(zhì)量的控制標(biāo)準(zhǔn)而進行的研究 。 2 如何將指紋圖譜的“譜”和中藥的藥“效”關(guān)聯(lián)起來是譜效關(guān)系研究必須解決的關(guān)鍵問題之一。一般的譜效關(guān)系研究過程包括采用適合的 分析方法構(gòu)建中藥指紋圖譜，并對圖譜標(biāo)示的成分進行分析；建立適合的藥效評價模型，獲取藥理學(xué)數(shù)據(jù)；采用數(shù)據(jù) 處理技術(shù)將指紋圖譜數(shù)據(jù)和藥理學(xué)數(shù)據(jù)進行關(guān)聯(lián)，結(jié)合中醫(yī)藥專業(yè)知識，建立有意義的譜 12 比較常用的處理指紋圖譜數(shù)據(jù)與藥理數(shù)據(jù)的方法有：回歸分析、相關(guān)分析、灰關(guān)聯(lián)度分析、聚類分析、主成分分析、典型相關(guān)分析等多種分析方法，采用這些方法將其指紋圖譜數(shù)據(jù)與藥效活性 數(shù)據(jù)相結(jié)合建立數(shù)學(xué)模型，以此研究二者的相關(guān)性，即得到譜效關(guān)系。 2 盡管中藥譜效學(xué)在中藥質(zhì)量控制上的指導(dǎo)理論及思路是科學(xué)的，并且有現(xiàn)代科技的支 持，但依然面臨多方面的技術(shù)難關(guān)。首先，成分生物活性的測定與中藥的“功能主治”只能部分相關(guān)而不能完全一致，而且，現(xiàn)有的生物活性測定方法只能對中藥的某種或某些主要功效進行驗證研究，或在現(xiàn)有相對成熟的藥效學(xué)實驗中選取一種或幾種方法和指標(biāo)進行，難以完全真實地反映藥物所有的功效。其次，生物測定方法存在因生物個體差異而引起的誤差，重復(fù)性和精密度較差，因而對實驗方法、觀察指標(biāo)、限值劑量的設(shè)計要求較高，這是最重要也是最難克服的一點。另外，對于檢驗部門來說，中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及方法力求準(zhǔn)確、簡便，而譜效法相對來說比較復(fù)雜，在一 般的實驗條件下難以進行，因此，中藥譜效學(xué)的研究方法及思路還有待于深入探討。 13 胡 中藥前胡 ( 為傘形科植物白花前胡 ( 干燥根 , 主要分布于浙江、江西、安徽、江蘇等省 , 是一味已有 1500蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 4 多年藥用歷史的常用中藥 。 14 胡化學(xué)成分研究 多種類型的香豆素類化合物是前胡的主要成分和生理活性成分 , 此外尚含有揮發(fā)油、色原酮、黃酮、聚炔、木脂素、簡單苯丙素衍生物等。 17孔令義 18對白花前胡根的石油醚提取物進行了系統(tǒng)的分離純化 , 共得到并鑒定香豆素類化合物 42個 , 其他類化合物 4個 , 其中新化合物 10個。 張 村等 19對河南產(chǎn)白花前胡的水溶性部位進行了化學(xué)成分研究，采用色譜法分離化學(xué)成分，利用質(zhì)譜、核磁共振等波譜技術(shù)鑒定結(jié)構(gòu)，分離鑒定了 7個化合物，其中 5個化合物為首次從該植物中分離得到， 2個化合物為首次從傘形科植物中分離得到。 陳二林等 20采用硅膠柱色譜法及制備薄層色譜法對少毛北前胡甲醇提取物進行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)和波譜分析 鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)， 結(jié)果從少毛北前胡中分離鑒定了 9個化合物， 均為首次從該植物中分離得到。 胡藥理活性研究 前胡可降氣化痰 ,宣風(fēng)散熱，是治療呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)疾病和心胸痛的良藥?，F(xiàn)代藥理研究證明，前胡對支氣管炎、高血壓、冠心病等有一定的療效 ,同時 ,前胡及其有效成分在治療心血管疾病方面有廣闊的應(yīng)用前景 。 21白花前胡在 改善心衰進程，提高患者生活質(zhì)量方面有較好效果，具有較高的實用價值及開發(fā)前景，涂乾等 22用腹主動脈縮窄法建立慢性超負(fù)荷大鼠心衰模型， 比較白花前胡提取液對心衰大鼠心臟系數(shù) 、血壓、心肌細胞凋亡率及凋亡相關(guān)基因的影響，并與依拉普利比 較，結(jié)果 白花前胡提取液可抑制心肌重 塑， 對心衰發(fā)揮生物學(xué)治療作用 。 現(xiàn)代研究表明，白花前胡有效成分主要為香豆素類，具有擴血管、降血脂等多種藥理活性 . 王德才等 23采用大鼠酵母致熱法、小鼠扭體法和熱板法、小鼠耳廓腫脹法和大鼠蛋清足跖腫脹法觀察白花前胡總香豆素組分 (解熱鎮(zhèn)痛抗炎作用，結(jié)果 吳 皓等 24分別用氨水及組胺與乙酰膽堿吸人造成小鼠咳嗽與哮喘的模型，給予前胡咳痰湯及陽性對照藥進行治療，利用 酚量腹腔注射觀察其祛痰作用， 以流感病毒滴鼻法造成模型，觀察了 前胡咳痰湯 的 抗病毒作用，結(jié)果 前胡咳痰湯有明顯的止咳、化痰、 平喘及抗病毒作用 。 胡 含量測定研究 香豆素類成分是前胡的主要有效成分， 白花前胡中指標(biāo)性成分為角型二氫吡喃香豆素，而紫花前胡中的指標(biāo)性成分為線型二氫吡喃香豆素，潘文灝等 25采用高效液相色譜法測定白花前胡干燥根中白花前胡丙素的含量，同時，對紫花前胡干燥根也進行了分析，結(jié)果紫花前胡不含白花前胡丙素 實驗不僅為前胡不同品種的鑒別提供實驗依據(jù)，而且為控制白花前胡的內(nèi)在質(zhì)量提供可靠的方法。 2000年以前 ， 紫花蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 5 前胡和白花前胡 （ 均作為前胡被收入 中國藥典 ，但研究表明， 這兩類成分的藥理作用有明顯區(qū)別， 2010年白花前胡和紫花前胡被分列為前胡和紫花前胡兩個品種載入藥典 。 周嬋等 26首次建立了兩相系統(tǒng) 該方法準(zhǔn)確 ， 可靠 ， 對紫花前胡藥材及其制劑的質(zhì)量控制有較重要意義 ， 已被 2010 版 中國藥典 采納 。 少毛北前胡(aT 商品習(xí)稱硬桿前胡，主產(chǎn)于甘肅省的隴南、天水、隴東等地區(qū) 。 陳二林等 27用 種香豆素 含量的分析方法， 建立的該方法簡便、快速、準(zhǔn)確。蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 6 第 二章 少毛北前胡 指紋圖譜的構(gòu)建 驗材 料 儀器 ： 美國 效液相色譜儀， 元泵， 2996 二極管陣列檢測器 ；717自動進樣器； 色譜柱（ 天津琛行 ： 5m ， 50 ； 山市超聲儀器有限公司）； 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（ 十萬分之一電子分析天平（ 電熱恒溫干燥箱（ 海精宏實驗設(shè)備有限公司）。 試藥 ： 對照品 ： 蟬翼素 、 花椒毒素 、 異紫花前胡苷元 、 補骨脂素 、 由實驗室自制 ， 以 積歸一化法分析 ， 純度均 98 %； 氯仿 （ 天津市 星月化工 有限公司，分析純 ） 乙酸乙酯（ 天津市 凱通化學(xué)試劑 有限公司，分析純 ） 95%乙醇 （ 杭州高晶精細化工有限公司 ， 分析純 ） 甲醇（山東禹王化學(xué)試劑開發(fā)中心 ， 色譜純） 乙腈 （德國默克， 色譜純） 水為超純水； 藥材 ： 本研究所用藥材來源見“表 2，藥材 經(jīng)蘭州大學(xué)藥學(xué)院生藥研究所周印鎖教授鑒定 。 表 2 實驗用樣品來源 樣品號 樣品名稱 樣品來源 白花前胡 浙江省 1 少毛北前胡 甘肅省 天水市 甘谷縣 2 少毛北前胡 甘肅省 天水市 甘谷縣 3 少毛北前胡 甘肅省天水市 清水縣 4 少毛北前胡 甘肅省天水市 清水縣 蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 7 5 少毛北前胡 甘肅省隴南市 文縣 6 少毛北前胡 甘肅省隴南市 文縣 7 少毛北前胡 甘肅省平?jīng)鍪?華亭縣 8 少毛北前胡 甘肅省平?jīng)鍪?華亭縣 9 少毛北前胡 甘肅省隴南市 徽縣 10 少毛北前胡 甘肅省隴南市 徽縣 數(shù)據(jù)處理軟件 ： 中藥色譜指紋圖譜計算機輔助相似性評價系統(tǒng)軟件（版本 南大學(xué)提供） ； 分別精密稱取異紫花前胡苷元、補骨脂素、花椒毒素、 翼素、甲醇溶解定容至 分浸膏的制備 分別取 十 批干燥的 少毛北前胡藥材 ， 粉碎后過 60目篩，然后稱取過篩粉末 400g，（按以下流程圖） 用 10倍、 8倍、 8倍量 溶劑 超聲提取 30濾后合并濾液 ， 棄去殘渣。將四部分的濾液回收溶劑后進行干燥 。 將分別得到氯仿部浸膏、乙酸乙酯部浸膏、 95%乙醇部浸膏、水部浸膏。 粉碎 過篩 藥材 粉末 氯仿超聲提取 殘渣 濾液 乙酸乙酯超聲提取 濾液 殘渣 乙醇超聲提取 濾液 殘渣 水超聲提取 濾液 殘渣 蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 8 藥材提取 流程圖 仿 部分指紋圖譜的 建立 試液的制備 精密稱取 氯仿 部分浸膏 甲醇溶解，定容至 5聲 10 孔濾膜過濾，備用。 紋圖譜 的建立 腈 表 1）；溫度 25；進樣量 20l ；檢測波長 320 表 1 氯仿 部分指紋圖譜 流動相 時間 速 mL/腈 （ A） 水 （ B） 0 0 60 30 0 60 35 0 50 55 0 40 70 5 35 80 5 25 85 0 20 定 按上述色譜條件測定 10批少毛北前胡的指紋圖譜 ，對各個峰紫外光譜圖進行對比分析，找到 20個共有峰。 采用夾角余弦法的原理，以共有峰的峰面積計算相似度，10個樣品的相似度結(jié)果見表 2. 在 320 表 1的流動相測定參照物 異紫花前胡苷元、補骨脂素、花椒毒素、 翼素、 其保留時間分別 ,與樣品指紋圖譜中相應(yīng)色譜峰進行比較，發(fā)現(xiàn)少毛北前胡樣品指紋圖譜中的 1 號 、 3 號、 4 號、 10 號、 13 號、 16 號峰的保留時間及紫外光譜圖分別與 異紫花前胡苷元、補骨脂素、花椒毒素、 翼素、 故少毛北前胡樣品指紋圖譜中 1號、 3號、 4號、 10號、 13號、16 號特征峰鑒定為 異紫花前胡苷元、 補骨脂素、花椒毒素、 翼素、見圖 1。 2。 蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 9 圖 1 十 批 少毛北前胡氯仿 部分的 320 圖 2 少毛北前胡氯仿 部分 紋圖譜共有模式 表 2 十批少毛北前胡 氯仿部分 有峰的保留時間（ 相似度 共有峰 樣 1 樣 2 樣 3 樣 4 樣 5 樣 6 樣 7 樣 8 樣 9 樣 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 10 13 49,979 14 15 16 17 18 19 20 相似度 相似度的精密度與重現(xiàn)性 取 1 號 少毛北前胡 供試液，進樣 5 次，每次進樣量為 20 L， 測定指紋圖譜相似度的日內(nèi)精密度， 計算得圖譜的 相似度 . 65)，說明 少毛北前胡氯仿 部分的 祛 痰 作用是其內(nèi) “ 化學(xué)成分群 ” 共同作用的結(jié)果 ，其中 12號、13號、 16號、 18號峰所代表的化學(xué)成分與化痰 作用具有高度關(guān)聯(lián)（關(guān)聯(lián)度 0. 80）。依據(jù)關(guān)聯(lián)度的大小，確定各成分對 “ 祛 痰 作用 ” 貢獻的大小順序為： 中 1號、 3號、 4號、 10號、 13號、 16號峰分別為 異紫花前胡苷元、補骨脂素、 0 i 1N k 1N L 0 i(k )蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 27 花椒毒素、 翼素、 表 5批少毛北前胡氯仿 部分指紋圖譜共有峰面積及 共有峰 樣 1 樣 2 樣 3 樣 4 樣 5 樣 6 樣 7 樣 8 樣 9 樣 10 1 483443 50673 174667 23203 44784 59083 150081 180927 150684 266717 2 380508 39045 140728 37329 28470 22915 59034 115890 86125 219719 3 773069 12431 221437 67066 74863 395 136502 94245 199048 465226 4 402661 67890 308693 48495 22352 678473 305050 360817 86011 274743 5 1222127 35608 912301 2459 226318 44248 989402 777410 475240 766070 6 626943 142359 385824 128392 101248 282 265554 278569 220935 293837 7 2388454 85009 1998064 6601 979179 254132 929310 924914 688750 1072959 8 4995019 1428502 1639641 553251 1047098 446616 2032703 1296799 3369017 5143092 9 334401 472304 50722 150731 270345 251776 73974 22503 47666 30040 10 1916458 2015782 1678246 1420490 1232001 2188324 2531690 1133213 1082004 1824015 11 2794823 641559 1191017 428211 381164 883989 863118 958251 1457113 2193324 12 1669410 844541 1498420 521593 517272 898746 898399 1303425 865771 1330770 13 58805478 65598565 64690400 42260647 40563875 68331512 59917501 51806377 65586390 94200969 14 2796845 1909432 4749455 989159 1092125 1734236 3186276 4018668 843049 2291826 15 16756081 20765103 20101763 5366721 12382951 21892168 18643642 16123533 10697527 5165188 16 6038783 5497603 8860106 3756267 3337936 4903369 6305562 5052209 3233741 4751800 17 16534091 8992509 528259 5552075 5275177 7611553 11314863 7095000 8085663 13846854 18 13063858 16127129 14849196 11227867 9759394 16878931 13712876 12072165 8329271 11288597 19 6186338 6696503 5388659 4527776 4230999 7332528 5155232 4338561 3579868 5126862 20 1611622 1778345 1451073 1217326 1065219 1778709 1334077 693829 918022 1364178 5 少毛北前胡氯仿 部分指紋圖譜共有峰面積 及 祛 痰效果 共有峰 樣 1 樣 2 樣 3 樣 4 樣 5 樣 6 樣 7 樣 8 樣 9 樣 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 28 17 18 19 20 A 值 表 5 批 少毛北前胡氯仿 部分指紋圖譜共有峰 與其 祛 痰效果 之間 的關(guān)聯(lián)系數(shù)和關(guān)聯(lián)度值 共共有峰 樣 1 樣 2 樣 3 樣 4 樣 5 樣 6 樣 7 樣 8 樣 9 樣 10 關(guān)聯(lián)度 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 少毛北前胡水 部分與 鎮(zhèn)咳 藥效學(xué)指標(biāo)的灰關(guān)聯(lián)度分析 選擇相應(yīng)序列 表 5 批 少毛北前胡水 部分指紋圖譜共有峰面積及其 咳嗽潛伏期 與空白組 咳嗽潛伏期 的差值 R。 原始數(shù)據(jù)處理 子序列和母序列存在測度不統(tǒng)一的問題，因此需對原始數(shù)據(jù)進行規(guī)格化處理 ：中， 表 5 少毛北前胡水 部分指紋圖譜共有峰面積 及 鎮(zhèn)咳 效果 計算關(guān)聯(lián)系數(shù)和關(guān)聯(lián)度 按照方法介紹中的步驟 2和 3計算，結(jié)果見表 5 蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 29 排關(guān)聯(lián)序 各個峰所 代表的化學(xué)成分與 鎮(zhèn)咳 作用具有一定關(guān)聯(lián) (關(guān)聯(lián)度 均 0. 70 )，說明 少毛北前胡水 部分的 鎮(zhèn)咳 作用是其內(nèi) “ 化學(xué)成分群 ” 共同作用的結(jié)果 ，其中 10號峰所代表的化學(xué)成分與抗鎮(zhèn)咳 作用具有高度關(guān)聯(lián)（關(guān)聯(lián)度 0. 80）。 依據(jù)關(guān)聯(lián)度的大小，確定各成分對 “ 鎮(zhèn)咳 作用 ” 貢獻的大小順序為： 表 5分指紋圖譜共有峰面積及 共共有峰 樣 1 樣 2 樣 3 樣 4 樣 5 樣 6 樣 7 樣 8 樣 9 樣 10 1 52602 52359 97156 23981 751641 135448 339688 182629 224553 40182 2 238375 8264 96519 500 46737 1496 1056 38390 233471 180025 3 43394 444 1584 791 2482 1459 486 415 19739 14870 4 6841 694 12336 334 2778 216 993 793 14260 1870 5 898 451 586 267 534 252 373 239 5074 508 6 15371 300 375 428 3003 1109 693 482 19609 14920 7 4629 311 236 438 495 341 438 312 519 1010 8 401 295 343 220 574 501 302 169 4024 209 9 5121 236 15544 685 694 727 622 939 3222 6732 10 416 233 582 427 259 445 271 350 261 360 R 值 5 少毛北前胡水 部分指紋圖譜共有峰面積 及 鎮(zhèn)咳 效果 共共有峰 樣 1 樣 2 樣 3 樣 4 樣 5 樣 6 樣 7 樣 8 樣 9 樣 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 R 值 表 5 批 少毛北前胡 水 部分指紋圖譜共有峰 與其 鎮(zhèn)咳 效果之間 的關(guān)聯(lián)系數(shù)和關(guān)聯(lián)度值 共共有峰 樣 1 樣 2 樣 3 樣 4 樣 5 樣 6 樣 7 樣 8 樣 9 樣 10 關(guān)聯(lián)度 1 2 3 4 5 6 蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 少毛北前胡指紋圖譜及譜效關(guān)系研究 30 7 8 9 10 討論 本文在獲得少毛北前胡氯仿部分和水部分指紋圖譜與藥效學(xué)量化數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上，采用灰關(guān)聯(lián)度分析技術(shù)，尋找指紋圖譜特征所代表的化學(xué)成分對藥效貢獻的大小。 結(jié)果表明：少毛北前胡氯仿部分的化痰作用是其內(nèi)“化學(xué)成分群”共同作用的結(jié)果。依據(jù)關(guān)聯(lián)度的大小，確定各成分對“ 祛 痰作用”貢獻的大小順序為： 12 中 1號、 3號、 4號、