左卡尼汀口服液對2型糖尿病腎病的治療作用及體內代謝的研究捅要目的研究左卡尼汀口服液對型糖尿病腎病患者的治療作用及機體血漿卡尼汀群濃度經時變化與療效的關系。方法應用高效液相色譜法檢測型糖尿病腎病患者血漿卡尼汀群即左卡尼汀、乙?？嵬?、丙?？嵬〉臐舛群Y選例型糖尿病腎病患者屬早期糖尿病腎病期或臨床型糖尿病腎病早期組期早期組,隨機分為對照組與治療組各例。兩組均繼續(xù)原糖尿病常規(guī)治療,并停服降脂藥物,治療組加用左卡尼汀口服液治療,療程為周。觀察治療前、后組患者血糖、血脂包括、腎功包括、尿蛋白、體重的變化以及血漿卡尼汀群濃度的經時變化和代謝情況對治療前后所有數據應用統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。結果對照組治療前后比較,治療組治療前與對照組比較血糖、血脂、腎功、尿蛋白、體重、血漿卡尼汀群濃度各指標差別無統(tǒng)計學意義治療組給藥周、周后與治療前比較,、體重均明顯降低,明顯升高和對照組比較,治療組給藥周后明顯降低,明顯降低,明顯升高治療組給藥周后血與給藥前比較明顯下降治療組尿給藥周、周較治療前、較對照組同期均明顯改善治療組、血漿濃度給藥周、周與給藥前及與對照組同期比較均明顯升高,血漿濃度給藥周比給藥周明顯升高。結論左卡尼汀口服液對型糖尿病腎病有積極的治療作用,能明顯提高患者血漿卡尼汀群的血藥濃度,顯著改善、體重、尿等臨床指標。碩士研究生孫振龍藥理學指導教師王春波教授曹玉副主任藥師關鍵詞糖尿病腎病左卡尼汀高效液相色譜法血漿藥物濃度,。呂,廿,目錄弓言第一章試驗材料研究對象一艾暑導藥品和試劑第二章試驗方法試驗分組與知情同意治療方法檢測指標血樣品采集方法血脂、血糖、腎功、尿蛋白的測定建立檢測血漿、的方法統(tǒng)計學處理第三章結果兩組患者治療前后血脂、血糖、體重的比較兩組患者治療前后腎功能及尿蛋白的比較兩組患者治療前后血漿左卡尼汀濃度的比較第四章討論結論參考文獻”綜杰苤綜述的參考文獻攻讀學位期間的研究成果”附錄“致謝”學位論文獨創(chuàng)性聲明、學位論文知識產權權屬聲明引言引言糖尿病,是世界范圍內的常見病、多發(fā)病,據年報告,患者在全球己超過億,在我國患病率達,遠高于全球平均水平【】,而糖尿病腎病,作為嚴重的慢性并發(fā)癥之一,在型患者中其發(fā)病率達【】,且隨著患病時間延長發(fā)病率升高,據報道年我國住院患者中發(fā)病率達【,已是大多數國家終末期腎病,的首要病斟”】,其死亡率高、致殘率高,導致患者生活質量差,家庭和社會負擔加重。一旦進展至尿毒癥期需行透析和移植治療、治療效果差,因此的早期治療極其重要,目前對的治療主要包括嚴格控制血糖和血脂、控制血壓、低蛋白飲食、抗氧化應激、降低尿蛋白、中醫(yī)藥治療及防治并發(fā)癥等【引,對早期防治方法的探究一直是相關醫(yī)務工作者的熱點話題?；颊咴缙谀I小球基底膜增厚而呈高濾過狀態(tài),導致白蛋白濾出增加,隨之腎小球濾過率逐步下降,而腎功能破壞亦會導致腎小管問質損害【】,導致腎小管的重吸收功能下降,腎臟濾過和重吸收功能下降導致白蛋白等物質排出增加,故臨床上患者以蛋白尿為主要表現。左卡尼汀,是一種天然營養(yǎng)素,在機體能量代謝中必不可少,可促進脂類、葡萄糖以及氨基酸的代謝而改善機體能量供應【】,其中以促進脂肪的氧化代謝作用最為突出,研究證明給患者補充可提高胰島素敏感性逆轉胰島素抵抗【。剮改善糖耐量進一步有助于患者血糖的控制。還是一種優(yōu)良的抗氧化劑,可增加自由基清除酶活性而對抗氧化應激和炎癥反應,保護細胞膜功能,從而對許多臟器和組織起到保護性作用【。鑒于對維持機體各方面正常生理功能必不可少,臨床上已被廣泛應用于心血管疾病、腎臟疾病、肝臟疾病、神經系統(tǒng)疾病、減肥等的治療】。國外有報道患者體內濃度可比正常人低,而伴有慢性并發(fā)癥者比不伴并發(fā)癥者缺乏更明顯,補充應能對及其并發(fā)癥有治療作用。美國食品藥物管理局認為“公認安全無毒的,并批準其應用于體內明顯缺乏的的治療和預防?，F已作為透析治療患者的常規(guī)用藥,但因患者腎功能損害嚴重,雖有治療作用,已不能逆轉疾病發(fā)展。是的慢性并發(fā)癥之一,又是的最主要原因之一,若能早期給予治療應有較好療效。目前對早期臨床上應用治療的研究較少,僅國內陳婷報道了明顯改善早期血脂代謝,降低血粘度,近年來孫曄萍】和丁美玲等報道了注射液還可明顯改善早期患者血糖,并顯著減少尿蛋白排出,能有效保護患者腎功能。相關報道均為靜脈給藥治療未見口服液治療報道,給藥劑量天或天,治療周或周即有明顯療效,針對左卡尼汀口服液和注青島大學碩士學位論文射液的療效對照研究方面丁峰報赳】了對血液透析患者口服和靜脈給藥治療周療效相當,且口服液更為方便、經濟,而對早期體內的缺乏程度及治療后血漿濃度與療效的關系對比未見相關報道。因此本研究篩選患者均屬早期或臨床早期組,隨機分為治療組和對照組,對治療組予以應用口服液治療,劑量天,治療周期延長至周,觀察患者的血脂、血糖、腎功、尿蛋白等臨床指標的變化,并且在給藥前后應用本課題組前期建立的法【?！繖z測患者血漿卡尼汀群包括及其酯?；镆阴Ｗ罂嵬?與丙酰左卡尼汀,的濃度,并探究其濃度經時變化與療效的關系,為今后的臨床治療提供依據。第一章試驗材料研究對象病例選擇篩選年月至年月曾在本院治療已確診為型且符合下列標準的患者例,其中男性例,女性例年齡歲病程年。入選標準符合年國際糖尿病聯盟的診斷標準,確診為型參考的期診斷標準并結合臨床實際,屬于早期期及期,尿微量白蛋白在或臨床型早期組即期早期組,尿微量白蛋白。常規(guī)治療,如飲食控制、適當運動、應用降糖藥物皮下注射胰島素,空腹血糖控制在左右無高血壓病或有高血壓病血壓控制在/以下查血腎功能各項指標、均正常無煙酒不良嗜好。排除標準患有心臟、肝臟或除外的其他腎臟疾病對本品過敏或其他嚴重的不良反應第一章試驗材料試驗前有應用肝腎毒性藥物者長期服用降脂藥物,病情不允許停用者試驗期間不配合試驗要求隨意中斷治療者試驗期間原有病情加重或患新病,需要立即終止實驗者。儀器全自動尿液分析儀煙臺寶威生物技術有限公司全自動生化分析儀美國雷杜公司美國沃特世公司液相色譜儀系列德國羅氏公司全自動生化分析儀血液透析儀瑞典金寶公司雙通道紫外可見光檢測器系列美國沃特世公司恒溫箱北京福意電器有限公司美國沃特世公司熒光檢測器微量加樣器濰坊三水檢驗設備有限公司上海市精密科學儀器廠可見分光光度計美國西特公司精密電子天平離心機德國雅培公司美國公司渦旋振蕩器離心機上海手術器械廠湖恒邁自動化儀表有限公司三頻超聲波振蕩器大湖機械中國有限公司酸度計高純水發(fā)生器北京中慧天誠科技有限公司藥品與試劑左卡尼汀口服液東北制藥總廠,批號寶威尿液分析試紙煙臺寶威生物技術有限公司批號北京九強生物技術有限公司批號尿素氮檢測試劑盒肌酐檢測試劑盒北京九強生物技術有限公司批號批號尿酸檢測試劑盒北京九強生物技術有限公司北京九強生物技術有限公司批號總膽固醇試劑盒甘油三酯試劑盒北京九強生物技術有限公司批號批號高密度脂蛋白膽固醇試劑盒北京九強生物技術有限公司北京九強生物技術有限公司批號低密度脂蛋白膽固醇試劑盒批號葡萄糖試劑盒北京九強生物技術有限公司青島大學碩士學位論文標準品東北制藥總廠批號標準品美國西格瑪公司批號標準品美國西格瑪公司批號左卡尼汀衍生化試卜氨基葸美國西格瑪公司卜乙基一二甲基氨基丙基碳酰二亞胺鹽酸鹽美國西格瑪公司甲醇色譜純美國霍尼韋爾公司批號乙腈色譜純美國霍尼韋爾公司批號無水乙醇分析純濟南天宇化工有限公司批號乙醚分析純萊陽精細化工廠批號氯仿分析純青島海濱化學試劑總廠批號鹽酸分析純萊陽精細化工廠批號冰醋酸分析純美國天地公司批號磷酸二氫鈉分析純汕頭金砂化工廠批號氫氧化鈉分析純青島海濱化學試劑總廠批號磷酸氫二鈉分析純上?；瘜W試劑有限公司批號超純水青島大學醫(yī)學院附屬醫(yī)院腹膜透析液美國百特公司正常人血漿由萊陽市中心血站提供第二章試驗方法試驗分組與知情同意將入選的患者共例隨機分為組,治療組、對照組各例,兩組年齡、性別、病程、病情等經統(tǒng)計學檢驗,具有可比性。試驗前向組患者詳細說明本次研究的背景目的、方法要求、藥品對疾病的作用及不良反應,本著研究自愿、信息保密的原則,均取得組患者同意并知情簽字,知情同意書如下。受試者知情同意書尊敬的受試者我們特邀您參加由青島大學醫(yī)學院的碩士研究生課題左卡尼汀口服液對型糖尿病腎病的治療作用及體內代謝研究。該研究將在山東省萊陽衛(wèi)校醫(yī)院開展,受試者將被隨機分為兩組,治療組給予左卡尼汀口服液服用,而對照組則不予左卡尼汀口服液服用。請您仔細閱讀如下信息,并決定是否自愿參加本項研究。研究背景與目的左卡尼汀口服液主要成份左卡尼汀又名左旋肉堿,它是人體內的必需營養(yǎng)第二章試驗方法素,其功能與機體的器官、組織代謝密切相關,主要是促進脂肪酸代謝,此外還有調節(jié)糖代謝、增加胰島素敏感性、穩(wěn)定蛋白質和細胞膜、抗氧化應激等作用,近年來日益受到重視,已被廣泛應用于心血管疾病如冠心病、心力衰竭、腎臟疾病如腎功能衰竭、肝臟疾病如肝硬化、慢性肝炎、脂肪肝、糖尿病及其并發(fā)癥、男性不育、肌肉萎縮、減肥等疾病的治療與保健。我們本次研究主要針對型糖尿病腎病的早期和臨床型患者,研究左卡尼汀口服液的治療效果及其體內代謝與療效的關系。服藥要求在本研究中我們將對治療組患者分次發(fā)放左卡尼汀口服液東北制藥集團,批號藥品,次,天次口服,持續(xù)用藥周對照組不發(fā)放藥品。治療組和對照組在本研究期間均繼續(xù)飲食控制、適當運動和藥物降血糖皮下注射胰島素,如諾和靈等糖尿病常規(guī)治療方案,有高血壓者繼續(xù)服用降壓藥物使血壓控制在/以下,停服其他降血脂藥物。研究內容在本研究期間,我們將對您統(tǒng)一進行抽血化驗腎功、血脂、血糖、血漿左卡尼汀濃度和留尿化驗尿常規(guī)檢查,為您檢測體重和血壓,時間安排為給藥前、給藥周和給藥周各次,您需空腹狀態(tài)下清晨采血和留尿,并在復診時告訴我們您在服藥期間病情的任何變化?？煞裢瑫r參與其他臨床研究為避免影響該研究結果,您在參加本研究期間不可參與其他藥物或器械相關的臨床研究。藥品不良反應目前,左卡尼汀口服液已在臨床應用多年,早已被美國食品藥物管理局認為是“公認安全無毒”的,臨床應用極少有不良反應發(fā)生,偶見口干、胃腸道輕度不適等,停藥后即自行消失。因其能改善葡萄糖的利用,在服用本品時,可能會引發(fā)低魚蕉,為安全起見,您在接受治療過程中應注意監(jiān)測血糖水平,確保其在相對安全的范圍內臨床上血糖為低血糖,如果您在研究期間出現任何不良反應,請隨時聯系我科醫(yī)生,電話。對疾病影響與展望臨床上左卡尼汀已廣泛應用于腎臟疾病的治療,尤其是慢性腎功能衰竭需行血液透析患者,可補充其因透析而加重的體內左卡尼汀缺乏,改善機體糖脂類的代謝,對腎臟有保護性療效,但臨床以應用注射液為主且多在腎衰竭期用藥,而應用左卡尼汀口服液治療早期腎病卻比較少。通過本次研究的療效觀察等信息將有助于今后治療方案的制定。酬勞補償與權益維護青島大學碩十學位論文為了補償對您因參加本研究而可能產生的諸多不便,我們?yōu)閷φ战M受試者提供的研究藥品全部免費,而且在本項研究期間您的相關各項檢查費用均由我們支付。左卡尼汀口服液臨床應用廣泛,已有豐富的臨床科研資料。如果本研究中您的健康確因服用左卡尼汀口服液而發(fā)生與之相關的損害,請務必立即通知您的研究醫(yī)生,他們將為您采取良好恰當的治療措施。但如果因違背本研究的程序方案或因醫(yī)療事故而產生的損傷,我們則不予補償。您的所有合法權利不會因為簽署該知情同意書而受任何影響。信息保密我們將嚴格保密您的個人信息和相關醫(yī)療信息,您的相關臨床資料結果將僅被用于本臨床研究。,研究自愿本研究本著完全自愿參加的原則,您可以拒絕參加,也可研究過程中隨時提出退出研究,但您需要及時通知我們。受試者知情同意聲明以上有關本研究的資料介紹,我已充分了解,對參加本研究可能出現的治療作用與風險表示理解。我自愿參加本文介紹的臨床研究,簽字如下受試者簽名研究者簽名一日日期期年月日年月日治療方法治療組和對照組均保持原糖尿病基礎治療方案不變,即所有患者均給予糖尿病教育、飲食控制、適當運動和藥物降血糖皮下注射胰島素,如諾和靈等,使空腹血糖控制在左右,無高血壓或有高血壓而服用降壓藥物血壓控制在/以下,停服其他降血脂藥物,治療組予加服左卡尼汀口服液,次,天次,連續(xù)服用周。檢測指標分別檢測給藥前、給藥周、給藥周兩組受檢者的血糖、血脂、血腎功、尿蛋白、體重、血漿卡尼汀群的濃度等指標。其中血脂檢查包括甘油三酯、低密度脂蛋白、膽固醇和高密度脂蛋白腎功能檢查包括血尿素氮、血尿酸和血肌酐尿蛋白為定性定性檢查第二章試驗方法血漿卡尼汀群包括左卡尼汀和其酯?；镏饕獮?、。樣品檢采集方法受檢者空腹狀態(tài)下次日清晨采血,無溶血,將血樣入普通試管,予離心后取血清測定腎功、血脂、血糖取血樣入肝素鋰抗凝管,予。離心后取血漿,分別編號標記放入冰箱中冷凍備測血漿卡尼汀群濃度。受檢者取晨尿中段尿約立即送檢尿常規(guī)測尿蛋白。血脂、血糖、腎功、尿蛋白的測定由我院檢驗科同事用全自動生化分析儀測定血脂、血糖、腎功,用全自動尿液分析儀尿蛋白定性檢測。血脂檢測甘油三酯測定試驗原理酶比色法測定血清中的含量。血清中加入緩沖液/氯酚/酶經下述反應后產生醌亞胺。而醌亞胺為紅色化合物,在波長處吸光度與血清中的含量成正比。甘油甘油三酯一甘油甘油磷酸甘油磷酸二氫丙酮磷酸過氧化物酶氨基安替比林一對氯苯酚醌亞胺試驗方法使用全自動生化分析儀,設置檢測條件為溫度,反應時間為,波長?？偰懝檀紲y定測定原理酶比色法測定血清中的含量,經過下列反應醌亞胺紅色化合物。醌亞胺在波長吸光度與血清的含量成正比。青島大學碩士學位論文膽固醇酯酶膽固醇酯脂肪酸膽固醇膽固醇氧化酶九一口過氧化物酶一氨基安替比林苯酚醌亞胺,試驗方法使用全自動生化分析儀,設置檢測條件為溫度,反應時間波長。高密度脂蛋白膽固醇測定試驗原理膽固醇酯酶與膽固醇氧化酶經化學修飾后,與硫化環(huán)狀糊精復合物、葡萄糖硫酸鈉并用,使對、乳糜微粒等的酶反應性降低,只選擇性與發(fā)生作用。在第一步反應中使、乳糜微粒與硫化環(huán)狀糊精復合物、葡萄糖硫酸鈉結合,在第二步反應中利用化學修飾的、,可直接測定?；瘜W修飾膽固醇游離脂肪酸化學修飾膽固醇膽甾烯酮過氧化氫酶氨基安替比林苯醌色素試驗方法使用全自動生化分析儀設置檢測條件為溫度,反應時間,波長。低密度值蛋白膽固醇測定試驗原理膽固醇酯酶與膽固醇氧化酶經化學修飾后,將特異的表面活性劑加入,使選擇性的溶解,以測定膽固醇。其他脂蛋白因受到糖化合物和表面活性劑的阻礙而不反應,以脂蛋白形式在反應液中殘存。因此可直接測定。第二章試驗方法化學修飾膽固醇游離脂肪酸化學修飾膽固醇膽甾烯酮過氧化氫酶氨基安替比林苯醌色素試驗方法使用全自動生化分析儀,設置檢測條件為溫度,反應時間為,波長。血糖檢測測定原理用葡糖糖過氧化物酶法,反應式如下葡糖糖氧化酶葡萄糖一葡萄糖酸過氧化物酶氨基安替比林苯酚紅色醌類化合物在波長處比較樣本和經同樣處理的標準液的紅色醌類化合物的吸光度,可計算得出樣本中的葡萄糖含量。實驗方法使用全自動生化分析儀,設置檢測條件為溫度,反應時間為。,波長腎功檢測尿素氮測定測定原理第一反應,將血清中內源性氨去除。在第二反應中,在尿素酶的作用下,將尿素分解為氨,可依據谷氨酸脫氫酶的減少量測得氨的含量。酮戊二酸谷氨酸青島大學碩士學位論文尿素酶尿素酮戊二酸谷氨酸試驗方法使用全自動生化分析儀,設置檢測條件為溫度,反應波長在處,反應時間。肌酐測定測定原理在堿性環(huán)境中肌酐與苦味酸鹽反應生成黃橙色復合物。肌酐苦味酸復合物的橙色程度與血清中的的濃度成下比。吸光度在波長與標本中的的濃度成正比。肌酐苦味酸肌酐苦味酸復合物試驗方法使用全自動生化分析儀,設置檢測條件為溫度,反應時間為/。,波長尿酸測定測定原理酶比色法測定血清中的含量。囀品中的尿酸經下述反應,產生紅色醌亞胺。醌亞胺顏色的強度與血清中的濃度成正比。尿酸酶尿酸斗尿囊素過氧化物酶氨基安替比林醌亞胺實驗方法使用全自動生化分析儀,設置檢測條件為溫度,反應時間為。,波長尿蛋白檢測測定原理試紙區(qū)待測物可發(fā)生特異顯色反應,通過尿液分析儀自動識別試紙區(qū)顏色的變化,可給出測試結果,顏色越深,濃度越高。其中依據指示劑蛋白誤差第二章試驗方法法原理檢測尿蛋白,蛋白質與染料結合形成能產生色變的復合物,尤其是對白蛋白的反應最為敏感。試驗方法使用尿液分析儀,尿試紙浸透尿液后放吸水紙上吸去多余尿液,將其放在自動分析儀傳送帶上,按開始鍵自動檢測。建立檢測血漿、的方法【】色譜條件色譜柱,“,流動相乙酸銨乙腈流速以進樣量山檢測波長,貯備液和標準血樣的制備空白血漿取健康成人血漿,裝入血液透析儀中,在腹膜透析液,以的速率持續(xù)進行透析無,將條件下,用血漿中的,與去除。持續(xù)透析結束后,將空白血漿按每份分裝,于冷凍貯存。,配得衍生化試劑的配制精密稱取,用丙酮溶解并定容至,加入。的貯備液用前配制溶液取。磷酸二氫鈉溶解混勻后定容至標準貯備液、混合標準液的配制分別精密稱取標準品呂和,得濃度分別為,用水分別溶解并定容至并混勻,的標準貯備溶液,然后依次量取、貯備液,用水定容即配得血漿混合標準液,其中的濃度為一,的濃度為岬,的濃度為一,冷藏保存。標準血樣向空白血漿中加入各自精密量取血漿混合標準液,配置標準血樣的濃度系列依次為,的濃度系列依次為,的濃度系列依次為,冷藏保存。質控血樣配制方法同標準血樣,分別配制、濃度依次為,低濃度,中濃度,高濃度三種質控血樣。青島大學碩十學位論文血漿樣品的處理量取混勻后再用血漿樣品,加入乙腈,渦旋離心磷酸緩沖液,再加入,取山上清液,先加入山鹽酸,渦旋混勻,加入從溶液,渦旋混勻,之后在渦旋同時緩緩加入溶液,混勻后放置在室溫并且避光條件下反應。待衍生化反應完成后,加入乙醚每次渦旋洗滌次,緩慢吸除乙醚相,向水相中加入磷酸緩沖液,再次渦旋混勻,并用三氯甲烷每次分別洗滌次,緩慢取出水相,加入山磷酸緩沖液,渦旋混勻,取“準備進樣分析。、和衍生化過程的結構/的結構衍生化過程。/忙仁一或,第二章試驗方法技飛或,氨基葸衍生物衍生化副產物統(tǒng)計學處理應用統(tǒng)計軟件進級資料采用秩和檢驗,以青島大學碩十學位論文第三章結果本臨床試驗中治療組和對照組各有例患者因未按試驗要求服藥或糖尿病常規(guī)治療不嚴格,已按篩選標準予以剔除,最終完成試驗人數對照組和治療組各人。兩組患者治療前后血糖、血脂、體重的比較兩組患者治療前后血糖的比較對照組治療前后各時間比較血差別無統(tǒng)計學意義治療組給藥周與給藥前比較、給藥周與給藥周比較、給藥周與給藥前比較,血均明顯降低治療組與對照組比較,給藥前、給藥周血差別均無統(tǒng)計學意義,給藥周治療組血糖明顯降低,詳見表。表口服液對組患者血糖的影響結果,注與同組給藥前比較,注與同組給藥周比較,注與對照組同期比較,。兩組患者治療前后血甘油三酯的比較對照組治療前后各時間比較血差別均無統(tǒng)計學意義治療組給藥周與給藥前比較、給藥周與給藥周比較、給藥周與給藥前比較,血均較前明顯降低治療組與對照組比較,給藥前、給藥周、給藥周比較,血差別無統(tǒng)計學意義。詳見表。表服液對組患者血甘油三酯的影響結果孑,注與同組給藥前比較,注與同組給藥周比較,第三章結果兩組患者治療前后血膽固醇的比較對照組治療前后各時間比較血膽固醇差別均無統(tǒng)計學意義治療組給藥周與給藥前比較、給藥周與給藥周比較、給藥周與給藥前比較,血均較前明顯降低治療組與對照組比較,給藥前、給藥周、給藥周血差別均無統(tǒng)計學意義,詳見表。表服液對組患者血膽固醇的影響結果。注與同組給藥前比較,注與同組給藥周比較,兩組患者治療前后血低密度脂蛋白膽固醇的比較對照組治療前后各時間比較血低密度脂蛋白膽固醇差別均無統(tǒng)計學意義治療組給藥周與給藥前比較、給藥周與給藥周、給藥周與給藥前比較比較,血均較前明顯降低治療組與對照組比較,給藥前、給藥周血差別均無統(tǒng)計學意義,給藥周治療組明顯降低,詳見表。表口服液對組患者血低密度脂蛋白膽固醇,的影響結果,注與同組給藥前比較,注與同組給藥周比較,注與對照組同期比較,兩組患者治療前后血高密度脂蛋白膽固醇的比較對照組治療前后各時間比較血高密度脂蛋白膽固醇差別均無統(tǒng)計學意義治療組給藥周與給藥前比較、給藥周與給藥周比較,血均較前明顯升高,給藥周與給藥前比較,血均較前明顯升高治療組與對照組比較,給藥前、給藥周血差別均無統(tǒng)計學意義,給藥周治療組明顯升高,詳見表。青島大學碩學位論文表口服液對組患者血高密度脂蛋白膽固醇的影響結果,注與同組給藥前比較,注與同組給藥前比較,注與同組給藥周比較,注與對照組同期比較,兩組患者治療前后體重的比較對照組治療前后各時間之間比較體重差別均無統(tǒng)計學意義治療組體重給藥周與給藥前、給藥周與給藥前、給藥周與給藥周比較明顯下降治療組與對照組比較給藥前、給藥周、給藥周各期差別均無統(tǒng)計學意義,詳見表。表服液對組患者體重的影響結果,注與同組給藥前比較,注與同組給藥周比較,兩組患者治療前后腎功能及尿蛋白的比較兩組患者治療前后血尿素氮的比較對照組治療前后各時間之間比較血差別均無統(tǒng)計學意義治療組血給藥周與給藥前、給藥周與給藥周比較差別均無統(tǒng)計學意義,給藥周與給藥前比較明顯下降治療組與對照組比較給藥前、給藥周、給藥周各時間之間比較血差別均無統(tǒng)計學意義,詳見表。第三章結果表服液對組患者血尿素氮的影響結果,注與同組給藥前比較,兩組患者治療前后血肌酐的比較對照組血治療前后各時間之間比較差別均無統(tǒng)計學意義治療組給藥前、給藥周、給藥周各時間之間比較差別均無統(tǒng)計學意義治療組與對照組給藥前、給藥周、給藥周各時間之間比較血差別均無統(tǒng)計學意義,詳見表。表服液對組患者血肌酐的影響結果,注同組不同期比較及同期不同組間比較均無顯著性差異兩組患者治療前后血尿酸的比較對照組血治療前后各時間之間比較差別均無統(tǒng)計學意義治療組血給藥前、給藥周、給藥周各時間之間比較差別均無統(tǒng)計學意義治療組與對照組給藥前、給藥周、給藥周各時間之間比較血差別均無統(tǒng)計學意義,詳見表。表服液對組患者血尿酸的影響結果,注同組不同期比較及同期不同組間比較均無顯著性差異兩組患者治療前后尿蛋白的比較青島大學碩士學位論文對照組尿治療前后各時間之間比較差別均無統(tǒng)計學意義治療組尿陰轉率給藥周和給藥周與給藥前比較、給藥周與給藥周比較均明顯陰轉治療組比對照組比較尿結果比較,治療前無顯著性差異,給藥周明顯陰轉,給藥周顯著陰轉。結果見表。表口服液對組患者尿蛋白的影響結果注與同組給藥前比較,注與對照組同期比較,注與對照組同期比較,混合組分專屬性試驗分別取空白血漿、標準儲備液、標準儲備液、標準儲備液和混合標準液,按“”項下方法進行處理,得空白血漿、標準液、標準液、標準液和混合標準液,分別進樣分析進行測定,結果證實混合標準液測得的色譜峰與空白血漿、標準液測得的色譜峰均對應一致,測得混合標準液中、和的色譜峰按時間順序分別在、依次出現,各自色譜圖見圖。,“。一一分鐘圖空白血漿的圖譜第三章結果圖左卡尼汀皿的標準圖譜青島大學碩士學位論文/、一一分鐘圖混合標準樣的圖譜線性關系的考察用空白血漿稀釋不同濃度的混合標準溶液,按”方法進行處理,分別測定后,橫坐標為樣品濃度,縱坐標為樣品峰面積】,計算得出血漿樣品濃度的線性回歸方程,證實樣品濃度與樣品峰面積之間線性關系良好,詳見表及圖。表、和血漿濃度回歸方程與線性范圍圖標準曲線圖標準曲線青島大學碩學位論文圖標準曲線選擇性試驗將高、中、低三種濃度的質控樣品分別取樣進行測定后,把峰面積比代入、血漿樣品標準曲線回歸方程,計算、的測得濃度,并與加入濃度比較,得出患者血漿、的濃度?；旌蠘藴蕵雍突颊哐獫{色譜圖見圖、圖。刀一一分圖混合標準樣色譜圖舶瑚分棒圖患者血漿色譜圖兩組患者治療前后血漿左卡尼汀群濃度的比較兩組患者治療前后血漿血藥濃度的比較對照組血漿濃度治療前后各時間之間比較,差別均無統(tǒng)計學意義治療組血漿濃度給藥周與給藥前、給藥周與給藥前、給藥周與給藥周比較,均明顯升高與對照組相比,治療組給藥前血漿濃度無顯著性差異,治療組給藥周與給藥周血漿濃度與對照組同期相比均明顯升高。結果見表。表服液對組患者血漿左卡尼汀濃度的影響結果,注與同組給藥前比較,注與對照組同期比較,注與同組給藥周比較,兩組患者治療前后血漿血藥濃度的比較對照組血漿濃度治療前后各時間之間比較,差別均無統(tǒng)計學意義治療組血漿濃度給藥周與給藥前、給藥周與給藥前比較,均明顯升高,給藥周與給藥周比較差別無統(tǒng)計學意義與對照組相比,青島大學碩士學位論文治療組給藥前血漿濃度無顯著性差異,治療組給藥周與給藥周血漿濃度與對照組同期相比均明顯升高。結果見表。表服液對組患者血漿乙酰左卡尼汀濃度的影響結果元,注與同組給藥前比較,注與對照組同期比較,兩組患者治療前后血漿血藥濃度的比較對照組血漿濃度給藥前、給藥周、給藥周之間比較,差別均無統(tǒng)計學意義治療組血漿濃度給藥周與給藥前、給藥周與給藥前比較,均明顯升高,給藥周與給藥周比較,差別無統(tǒng)計學意義與對照組相比,治療組給藥前血漿濃度無顯著性差異,治療組給藥周與給藥周血漿濃度比對照組同期明顯升高。結果見表表服液對組患者血漿丙酰左卡尼汀濃度的影響結果孑,注與同組給藥前比較,注與對照組同期比較,第四章討論第四章討論臨床上引發(fā)的型患者遠比型患者多見,在型患者中發(fā)病率達,且呈逐年增長的趨勢,據報道年至年美國患病率從增長至,其中歲及以上的老年人最多見,已是大多數國家的最常見的病因,約半數以上的型最終死于尿毒癥,在型中是僅次于心腦血管并發(fā)癥的第二大死亡原因,對人類健康危害極大,因此目前對的防治工作異常嚴峻。發(fā)病機制復雜尚未完全明確,考慮其致病因素主要包括高血糖、高血脂、高蛋白飲食、高血壓、胰島素抵抗、氧化應激、腎素血管緊張素系統(tǒng)亢進、細胞因子、吸煙、遺傳因素等多方耐。不僅表現為慢性高血糖狀態(tài),還常同時伴有脂肪與蛋白質的代謝紊亂【,其中持續(xù)高血糖、高血脂各自作為獨立危險因素,二者伴發(fā)存在則能進一步加重腎臟損傷,以糖脂異常為主要表現的代謝紊亂癥候群是各發(fā)病機制的主要基礎之一。目前針對的治療也是依據其相關發(fā)病因素制定的,期待通過逆轉相關危險因素而達到保護腎功能、防治并發(fā)癥的目的,但所有治療方法都強調對早期或輕癥的治療,旦進展至尿毒癥期則需行透析和移植治療,療效差,預后不良,因此強調輕癥的及早治療重要性不言而喻。本臨床研究均選擇病情較輕的型患者,入選者符合年國際糖尿病聯盟糖尿病診斷標準,確診為型糖尿病的診斷標準參照期分期標斛州,并結合臨床實際制定,其中期又稱早期,期又尿白蛋白排泄率燼。即尿微量白蛋白總量稱臨床或顯性,尿白蛋白排泄率即尿微量白蛋白總量。本試驗選擇的病例均為早期期,尿微量白蛋白在。,同和臨床早期組期早期組,尿微量白蛋白一時應排除其他疾病如心臟、肝臟等疾病及除以外的其他腎臟疾病。入選的患者均經常規(guī)糖尿病治療,如飲食控制、適當運動、應用降糖藥物皮下注射胰島素,定期血糖監(jiān)測空腹血糖控制在。左右。本研究臨床采血檢驗后發(fā)現大部分患者存在血脂異常,為觀察對患者的降脂作用,所有患者均停用其他降脂藥物。是體內參與能量代謝的基本物質之一,能促進脂類、葡萄糖以及氨基酸的代謝改善機體能量供應,依靠線粒體膜外側的卡尼汀脂酰轉移酶以及內側的卡尼汀脂酰轉移酶,游離的能將脂肪酸導入線粒體進行氧化,又可與氧化的產物乙?；Y合形成導出線粒體,減少線粒體中乙酰產生,增高與乙酰的比值,進一步加速脂肪酸氧化,同時與乙酰的比例增高可使丙酮酸脫氫酶的活性增強,進而促進葡萄糖的氧化分解】,還可促進支鏈氨基酸氧化代謝參與維持機體蛋白質平衡的青島大學碩士學位論文功能川。還是一種優(yōu)良的抗氧化劑,可增加自由基清除酶活性而對抗氧化應激和炎癥反應,對許多臟器和組織起到保護性作用【。目前臨床上得到廣泛應用,主要應用于缺乏疾病的防治。是一種氨基酸衍生物,其體內來源既可由肝臟、腎臟、大腦內源性合成,又可通過攝取外源性動物性食物或藥物吸收補充。飲食中的主要存在于肉類食物內,報道稱【】食物中的可在腸道上皮細胞膜主動和被動吸收入血,生物利用度較高,而口服給藥時僅以被動吸收為主,加之部分被大腸的微生物將其降解,生物利用度較低。血液中的的清除與重吸收主要是由腎臟來完成的,血液中的經腎小球濾過后絕大部分被近曲腎小管重吸收入血,腎臟在維持血漿濃度的穩(wěn)定方面起著非常重要的作用【釣。文獻報道患者體內含量可較健康人低,伴有視網膜病變、周圍神經病變、高脂血癥并發(fā)癥的患者體內缺乏更為明顯,給予補充應對并發(fā)癥有治療作用。作為慢性并發(fā)癥之一其體內缺乏程度雖未在文獻中同時報道,考慮其比其他并發(fā)癥缺乏還要顯著,因為健康人血液中的經腎小球濾過后絕大部分被近曲腎小管重吸收入血,而患者腎臟功能下降伴有腎小管功能受損,使的重吸收減少而排出增多,而且腎臟自身合成減少,均可加重體內缺乏。尤其是當并發(fā)需行血液透析治療時,由于水溶性好,不易與大分子物質結合,極易透過透析半透膜而流失,使患者體內嚴重缺乏,因此目前已常規(guī)應用于的治療。發(fā)展至時病情重給予補充已不能逆轉病情,而對輕癥患者補充治療應有較好療效,本研究對早期及臨床早期組患者應用治療后取得較好療效,現針對療效及其機制分別討論如下。高血糖被認為是發(fā)病的基礎啟動因素,高血糖引發(fā)腎臟損害考慮主要與蛋白質非酶糖基化終末產物,的形成、多元醇代謝途徑的激活、蛋白激酶的激活三種因素有關。首先,持續(xù)高血糖狀態(tài)可引發(fā)體內蛋白質、脂肪酸、核酸等物質非酶糖基化形成,而沉積在腎小球基底膜使其增厚,可使導致腎小球濾過膜孔徑增大,導致腎小球濾過功能下降和白蛋白尿的產生,且與其自身受體結合后,可進一步激活細胞信號傳導通路,釋放多量的炎性介質、細胞因子和粘附分子,促進的腎臟損掣。其次,高糖、可激活內皮細胞內醛糖還原酶,是多元醇代謝途徑的限速酶,被激活可導致過多的山梨醇和果糖生成并積聚在腎小球毛細血管細胞內,細胞內呈高滲狀態(tài),大量細胞外水分進入細胞導致結構和功能發(fā)生異常,引發(fā)腎小球損傷【。此外,持續(xù)高血糖狀態(tài)還導致腎小球內皮細胞與系膜細胞二酯酰甘油增多而激活,作為細胞內信號轉導通路關鍵酶的,可使腎小球基底膜結構改變而通透性增高,并能刺激內皮細胞和系膜細胞分泌細胞外基質增多,增加細胞粘附因子和轉化生長因子第四章討論的表達,參與免疫調節(jié)并促使腎小管間質纖維化的發(fā)生,多方面損傷腎臟功能加速的發(fā)展【嘰。因此對患者嚴格控制血糖能明顯延緩的發(fā)生和發(fā)展,若血糖控制不佳則可加速發(fā)生發(fā)展。本研究結果發(fā)現治療組給藥周、周后患者空腹血糖較前明顯下降,治療組給藥周比對照組同期明顯下降,因此可以有效的輔助降低患者的血糖,其機制考慮有在促進脂肪酸氧化同時可將線粒體內乙酰基轉出,減少線粒體中乙酰產生,增高與乙酰的比率,使丙酮酸脫氫酶復合體的活性增強,促進糖氧化,同時因其促進脂肪酸氧化,使機體獲得足夠的能量,可減少肝臟糖原向葡糖糖的轉化,有利于降低患者的血糖濃度再者,有增強胰島素敏感性逆轉胰島素抵抗的作用【舢】,臨床上以肥胖的的型患者胰島素抵抗較明顯,通過胰島素增敏劑治療可以改善其糖類和脂肪代謝、增強腎臟的抗炎能力【】,文獻報道證實伴有胰島素抵抗型患者,其機體缺乏的風險性增加,且給予治療補充后可提高胰島素敏感性并有效降低血脂血糖【丐】此外,本課題組在高熱量飲食/鏈脲霉素誘導小鼠動物模型實驗前期研究上發(fā)現予小鼠口服周后,對血糖。組的小鼠有降糖作用【引,且檢測其血液胰島素水平較前升高,提示除有增強胰島素敏感性逆轉胰島素抵抗外,在存在一定胰島功能的前提下,可能還有促進胰島素分泌的功能。臨床上有老年患者服用口服液致低血糖發(fā)生的個例報道【】,考慮與老年人藥物代謝緩慢蓄積過多及食物攝入較少有關,故為安全起見本試驗篩選患者空腹血糖均在亂。左右,且均讓患者定期檢測血糖,本試驗中未見低血糖發(fā)生。高血脂癥是代謝紊亂癥候群的突出表現之一,自世紀中葉和首先提出與高脂血癥有關以來,各國實驗室和臨床研究均證實了高血脂為的重要致病因素,動物研究證明持續(xù)高膽固醇飲食可使小鼠、腎小球基底膜增厚和系膜基質擴張,導致小鼠腎臟損傷,而低膽固醇含量的飲食方式可以改善糖尿病小鼠腎功能【,臨床也證實脂代謝紊亂與的發(fā)生發(fā)展密切相關,予降脂治療后尿蛋白排出減少,腎功能好轉【。高血脂癥可使尿白蛋白的排泄率增加,加重腎臟功能損傷,考慮與血脂中的有關,是微血管并發(fā)癥獨立危險因素,極易沉積在動脈壁和腎臟的基底膜上,能刺激細胞外基質增生,且非常容易被修飾并被吞噬細胞攝取,脂蛋白被修飾后,可導致系膜細胞增生與系膜基質增厚,使腎小球基底膜的通透性增加,損傷內皮細胞功能而引發(fā)炎癥反應,以及激活腎素一血管緊張素醛固酮系統(tǒng)等多方面的引發(fā)腎臟損害】,此外,高脂血癥還可通過增加的表達【】刺激腎小球系膜細胞細胞外基質合成而介導腎臟損害。本研究試驗結果發(fā)現,治療組給予口服液治療后其血脂中、及比給藥前明顯降低,而比給藥前明顯升高,其中是心腦血管的重要保護因子,其升高對人體健青島大學碩士學位論文康有益,而、及升高則對機體有害,證實有良好的調脂功能,應用后可明顯改善患者的脂質代謝紊亂,和陳婷與孫曄萍等的報道一致【】。的首要功能即是促進脂肪酸氧化,依靠線粒體膜兩側的和,游離的能將脂肪酸導入線粒體進行氧化,并可結合氧化產物乙?；纬刹С鼍€粒體,減少線粒體中乙酰產生,與乙酰的比值增高,可進一步加速脂肪酸一氧化,從而改善脂肪代謝紊亂。本研究治療組給予治療后患者的尿蛋白排出減少提示腎功能好轉,說明可通過調整脂肪代謝降低高脂肪對腎臟的脂毒性而保護患者腎臟的功能,這些結果與此前文獻報道副也是一致的。臨床上型患者肥胖、高脂血癥非常常見,且常伴有高血壓,也是的重要危險因素,三者常伴發(fā)存在,因此對患者常需要同時降脂、降糖、降壓治療,據報道對中心性肥胖患者,常伴有胰島素抵抗,在降脂、降糖、降壓的治療同時必須將降脂治療控制體重放于首位【叭,控制體重后可減緩胰島素抵抗亦對促進糖脂代謝有利。近年來已成為眾所周知的減肥良藥,能有效降低肥胖型型患者的血脂與體重,而且能逆轉的胰島素抵抗提高葡萄糖利用率【,本研究結果也證實口服液能明顯改善機體脂肪代謝,且治療組給藥周比給藥前體重明顯下降有良好減肥效果,故口服液對肥胖的患者尤為適用?；颊叩难惓Ｄ苤卵扯仍黾訉е卵鲃恿W異常,進而增加腎小球灌注壓和及腎小球血管的損害,而有降低血脂降低血黏度的作用【,可改善腎臟血液循環(huán)而保護腎功能。臨床上型并發(fā)高血壓的比例高達,而進展至臨床時則更耐】,眾所周知,高血壓和腎臟損害互為因果,高血壓可以引發(fā)腎臟靶器官病變,腎臟病變又可繼發(fā)血壓升高,高血壓能使腎臟中小動脈壁細胞結構改變發(fā)生硬化,逐漸發(fā)生腎臟小動脈玻璃樣變性,使腎臟缺血、缺氧,間質纖維化、腎單位硬化壞死,最終出現腎功能不全,從對腎臟的損害程度來看長期高血壓要比高血糖等其他因素嚴重的夢】。高血壓腎病和均為的主要病因,因此強調對伴血壓升高者必須在糾正糖脂代謝紊亂的同時積極控制高血壓才能延緩其腎功能損害【引。對初診的型患者即應對其特別強調高血壓對腎臟的損害作用,盡早干預治療,能否有效控制高血壓直接關系著包括在內的微血管并發(fā)癥的防治,嚴格控制血壓的受益可同有效控制血糖的好處相媲美【。臨床研究已證實將患者血壓控制在/以下,可顯著降低患者的發(fā)病率和減少尿蛋白的排出型】,故我們本研究篩選的患者血壓均控制在/以下。目前許多研究已證明氧化應激參與了代謝紊亂的發(fā)生,并在的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用,氧化應激已是起病的重要機制之一?；颊哂捎谧陨砬宄钚匝趸鶊F的能力下降,葡萄糖