1、第九章第九章 糖類、脂類及核酸類藥物的分析糖類、脂類及核酸類藥物的分析 糖類物質(zhì)：糖類物質(zhì)：是多羥基（是多羥基（2 2個或以上）的醛類或酮類化合物，在個或以上）的醛類或酮類化合物，在水解后能變成以上兩者之一的有機(jī)化合物。在化學(xué)上，由于其由水解后能變成以上兩者之一的有機(jī)化合物。在化學(xué)上，由于其由碳、氫、氧元素構(gòu)成，在化學(xué)式的表現(xiàn)上類似于碳、氫、氧元素構(gòu)成，在化學(xué)式的表現(xiàn)上類似于“碳碳”與與“水水”聚合，故又稱之為聚合，故又稱之為碳水化合物碳水化合物。生物學(xué)功能：生物學(xué)功能：1.1.提供能量。植物的淀粉和動物的糖原都是能量的儲存形式。提供能量。植物的淀粉和動物的糖原都是能量的儲存形式。 2.2.細(xì)

2、胞的骨架。纖維素、半纖維素、木質(zhì)素是植物細(xì)胞壁的主要成細(xì)胞的骨架。纖維素、半纖維素、木質(zhì)素是植物細(xì)胞壁的主要成分，肽聚糖是原核生物細(xì)胞壁的主要成分。分，肽聚糖是原核生物細(xì)胞壁的主要成分。 3.3.細(xì)胞間識別和生物分子間的識別。細(xì)胞膜表面糖蛋白的寡糖鏈細(xì)胞間識別和生物分子間的識別。細(xì)胞膜表面糖蛋白的寡糖鏈參與細(xì)胞間的識別。紅細(xì)胞表面參與細(xì)胞間的識別。紅細(xì)胞表面ABOABO血型決定簇就含有巖藻糖。血型決定簇就含有巖藻糖。第一節(jié)第一節(jié) 糖類藥物的分析糖類藥物的分析葡萄糖葡萄糖 單糖單糖 蔗糖蔗糖乳糖乳糖 賦形劑和矯味劑賦形劑和矯味劑一、藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)雙糖雙糖淀粉淀粉多糖多糖醫(yī)學(xué)上的

3、糖類：醫(yī)學(xué)上的糖類：葡萄糖葡萄糖屬單糖，是人體能量的主要來源之一。屬單糖，是人體能量的主要來源之一。乳糖、蔗糖，淀粉常被用作藥物制劑的賦形劑或矯味劑。乳糖、蔗糖，淀粉常被用作藥物制劑的賦形劑或矯味劑。臨床上常用多糖藥物：葡萄糖、右旋糖酐、肝素、硫酸軟臨床上常用多糖藥物：葡萄糖、右旋糖酐、肝素、硫酸軟骨素等。骨素等。 二、鑒別試驗(yàn)二、鑒別試驗(yàn)（一）比旋度測定（一）比旋度測定旋光度旋光度：直線偏振光通過光學(xué)活性化合物液體或溶液時，：直線偏振光通過光學(xué)活性化合物液體或溶液時，能引起旋光現(xiàn)象，使偏振光平面向左或右旋轉(zhuǎn)，旋轉(zhuǎn)的度數(shù)能引起旋光現(xiàn)象，使偏振光平面向左或右旋轉(zhuǎn)，旋轉(zhuǎn)的度數(shù)稱旋光度。稱旋光度。有

4、機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)中含有手性碳原子，具有旋光現(xiàn)象。利有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)中含有手性碳原子，具有旋光現(xiàn)象。利用測定藥物的旋光度進(jìn)行用測定藥物的旋光度進(jìn)行定性、雜質(zhì)檢查和定量的分析方法定性、雜質(zhì)檢查和定量的分析方法，稱為旋光度測定法。稱為旋光度測定法。手性碳原子手性碳原子，是指和四個不同的原子或基團(tuán)連接的碳原子。，是指和四個不同的原子或基團(tuán)連接的碳原子。在一定條件下測得的旋光度稱為在一定條件下測得的旋光度稱為比旋度比旋度，以，以表示。表示。比旋度可以反映其純度，故藥典對葡萄糖原料不作專項(xiàng)含比旋度可以反映其純度，故藥典對葡萄糖原料不作專項(xiàng)含量測定，只規(guī)定比旋度范圍量測定，只規(guī)定比旋度范圍(二二) 與斐林（與

5、斐林（Fehling）試液反應(yīng)）試液反應(yīng)葡萄糖醛基的還原性葡萄糖醛基的還原性堿堿性性酒酒石石酸酸銅銅葡葡萄萄糖糖水、水、Cu2O Fehling試液試液 (四四) 高效液相色譜法高效液相色譜法 供試品溶液的保留時間應(yīng)與對照溶液主峰的保留時間一致。供試品溶液的保留時間應(yīng)與對照溶液主峰的保留時間一致。 (三三) 紅外分光光度法紅外分光光度法中國藥典規(guī)定本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜一致。中國藥典規(guī)定本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜一致。 來源：來源：系蔗糖經(jīng)腸膜狀明串珠菌發(fā)酵后生成的一種高分子葡萄系蔗糖經(jīng)腸膜狀明串珠菌發(fā)酵后生成的一種高分子葡萄糖聚合物，經(jīng)處理精制而得。由于聚合的葡萄糖分子數(shù)

6、目不同，糖聚合物，經(jīng)處理精制而得。由于聚合的葡萄糖分子數(shù)目不同，而產(chǎn)生不同分子量的產(chǎn)品。有高分子而產(chǎn)生不同分子量的產(chǎn)品。有高分子( (平均分子量平均分子量10-2010-20萬）、萬）、中分子（中分子（6-86-8萬）、低分子（萬）、低分子（2-42-4萬）、小分子（萬）、小分子（1-21-2）。）。性狀：性狀：為白色或類白色無定形粉末，無臭，無味。易溶于熱水，為白色或類白色無定形粉末，無臭，無味。易溶于熱水，不溶于乙醇。其水溶液為無色或微帶乳光的澄明液體。不溶于乙醇。其水溶液為無色或微帶乳光的澄明液體。用途：用途：是目前最佳的是目前最佳的血漿代用品血漿代用品之一。臨床上常用的有中分子之一。臨

7、床上常用的有中分子右旋糖酐，用于出血性、創(chuàng)傷性及燒傷性休克等。低、小分子右旋糖酐，用于出血性、創(chuàng)傷性及燒傷性休克等。低、小分子右旋糖酐，能改善微循環(huán)，亦有擴(kuò)充血容量作用。右旋糖酐，能改善微循環(huán)，亦有擴(kuò)充血容量作用。注注:右旋糖酐右旋糖酐70（中分子）；右旋糖酐（中分子）；右旋糖酐40（低分子）；右旋糖酐（低分子）；右旋糖酐10（小分子）（小分子）四、檢查四、檢查 1 1、分子與分子量分布：、分子與分子量分布：右旋糖酐右旋糖酐20202 2、總氮量：肝素鈉、總氮量：肝素鈉3 3、殘留溶劑：殘留溶劑、殘留溶劑：殘留溶劑四、含量測定四、含量測定1、旋光光度法、旋光光度法右旋糖苷右旋糖苷20氯化鈉注射

8、液的含量測定。氯化鈉注射液的含量測定。本品為復(fù)方制劑，右旋糖苷本品為復(fù)方制劑，右旋糖苷20有旋光性，而氯化鈉無旋光有旋光性，而氯化鈉無旋光性，不干擾測定，用性，不干擾測定，用旋光度法旋光度法測定右旋糖苷測定右旋糖苷20的含量。的含量。C為每為每100mL注射液中含右旋糖酐注射液中含右旋糖酐20的質(zhì)量，的質(zhì)量，g; 為測得的為測得的旋光度旋光度稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù) lcD20100%11951005128.0 滴定法：滴定法：甘露醇的含量測定甘露醇的含量測定 高效液相色譜法：高效液相色譜法：硫酸軟骨素的效價(jià)測定硫酸軟骨素的效價(jià)測定 生物法：生物法：肝素的效價(jià)測定肝素的效價(jià)測定1869年核酸最早分離自

9、外科繃帶膿細(xì)胞的年核酸最早分離自外科繃帶膿細(xì)胞的細(xì)胞核細(xì)胞核，當(dāng)時發(fā)現(xiàn)這種物質(zhì)含磷量之高超過當(dāng)時發(fā)現(xiàn)的任何當(dāng)時發(fā)現(xiàn)這種物質(zhì)含磷量之高超過當(dāng)時發(fā)現(xiàn)的任何一種有機(jī)物，并且一種有機(jī)物，并且含有很強(qiáng)的酸性含有很強(qiáng)的酸性，故得名核酸。，故得名核酸。19091909年其組成被研究清楚，年其組成被研究清楚，19441944年生物功能初步澄年生物功能初步澄清，在清，在X X射線衍射技術(shù)支持下射線衍射技術(shù)支持下19531953年結(jié)構(gòu)澄清。年結(jié)構(gòu)澄清。核酸是脫氧核糖核酸（核酸是脫氧核糖核酸（DNADNA）與核糖核酸（）與核糖核酸（RNARNA）的）的通稱。通稱。第三節(jié)第三節(jié) 核酸類藥物的分析核酸類藥物的分析核酸核

10、酸核苷酸核苷酸磷酸磷酸核苷核苷戊糖戊糖堿基堿基水水解解一、結(jié)構(gòu)和分類一、結(jié)構(gòu)和分類二、理化性質(zhì)二、理化性質(zhì)（一）兩性性質(zhì)：（一）兩性性質(zhì)：磷酸基；堿基（通常：酸性）磷酸基；堿基（通常：酸性） pHpH影響堿基間氫鍵穩(wěn)定：影響堿基間氫鍵穩(wěn)定：DNA pH4.0-11.0DNA pH4.0-11.0（二）水解性：（二）水解性：微溶于水，不溶于一般的有機(jī)溶劑微溶于水，不溶于一般的有機(jī)溶劑（三）（三）UVUV：max=260nm max=260nm 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)280nm280nm A A260260/A/A280 280 純純DNADNA1.81.8 純純RNARNA應(yīng)達(dá)到應(yīng)達(dá)到2.02.0 混有雜

11、蛋白混有雜蛋白 比值降低比值降低(一一) 肌苷的質(zhì)量分析肌苷的質(zhì)量分析1.結(jié)構(gòu)：結(jié)構(gòu)：C10H12N4O5 268.23本品為本品為9-D-9-D-核糖次黃嘌呤。按干燥品計(jì)算，含核糖次黃嘌呤。按干燥品計(jì)算，含C C1010H1H12 2N N4 4O O5 5應(yīng)為應(yīng)為98.098.0102.0102.0。2.性狀：性狀：本品為白色結(jié)晶性粉末；無臭，味微苦。本品為白色結(jié)晶性粉末；無臭，味微苦。本品在水中略溶，在氯仿或乙醇中不溶，在稀鹽本品在水中略溶，在氯仿或乙醇中不溶，在稀鹽酸和氫氧化鈉溶液中易溶。酸和氫氧化鈉溶液中易溶。3.鑒別鑒別取取0.010.01供試品溶液適量供試品溶液適量, ,加等體積

12、的加等體積的3,5-3,5-二二羥基甲苯溶液羥基甲苯溶液( (取取3 3，5-5-二羥基甲苯與三氯化鐵二羥基甲苯與三氯化鐵各各0.1g0.1g，加鹽酸使成，加鹽酸使成100ml)100ml)，混勻，在水浴中，混勻，在水浴中加熱約加熱約1010分鐘，即顯分鐘，即顯綠色。綠色。-苔黑酚反應(yīng)苔黑酚反應(yīng)取本品取本品1 1水溶液，加氨制硝酸銀試液數(shù)滴，水溶液，加氨制硝酸銀試液數(shù)滴，即產(chǎn)生即產(chǎn)生白色膠狀白色膠狀沉淀。沉淀。-嘌呤堿基嘌呤堿基 取含量測定項(xiàng)下的溶液取含量測定項(xiàng)下的溶液, ,照分光光度法測定，照分光光度法測定，在在248nm248nm的波長處有最大吸收，在的波長處有最大吸收，在222nm222

13、nm的波長的波長處有最小吸收。處有最小吸收。色譜圖色譜圖紅外光譜（紅外光譜（IRIR）4.4.檢查檢查溶液的澄清度與顏色（溶液的透光率）溶液的澄清度與顏色（溶液的透光率）取本品取本品0.5g0.5g，加水，加水50ml50ml使溶解，照分光光度法在使溶解，照分光光度法在430nm430nm的波長處測定透光率，不的波長處測定透光率，不得低于得低于98.098.0( (供注射用供注射用) )。干燥失重干燥失重取本品，在取本品，在105105干燥至恒重，減失重量不得過干燥至恒重，減失重量不得過1.01.0熾灼殘?jiān)鼰胱茪堅(jiān)坏眠^不得過0.10.1( (供注射用供注射用),),或不得過或不得過0.20.

14、2( (供口服用供口服用重金屬重金屬取本品取本品1.0g1.0g，依法檢查含重金屬不得過百萬分之十。，依法檢查含重金屬不得過百萬分之十。 次黃嘌呤次黃嘌呤精密稱取本品精密稱取本品0.5g0.5g，置，置50ml50ml量瓶中量瓶中, , 加水溶解并加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，照紙色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶稀釋至刻度，搖勻，照紙色譜法試驗(yàn)，吸取上述溶10l10l，點(diǎn)，點(diǎn)于于3 325cm25cm色譜濾紙上，照上行法，以水為展開劑，展開約色譜濾紙上，照上行法，以水為展開劑，展開約20cm20cm處，取出晾干，置紫外光燈處，取出晾干，置紫外光燈(254nm)(254nm)下檢視，不得出現(xiàn)雜下檢視，不得出

15、現(xiàn)雜質(zhì)斑點(diǎn)。質(zhì)斑點(diǎn)。 HPLC5.5.含量測定含量測定1 1）UVUV法：法：取本品，精密稱定，加水制成每取本品，精密稱定，加水制成每1ml1ml中約含中約含10g10g的溶液，照分光光度法在的溶液，照分光光度法在248nm248nm的波長處測定吸收度，按的波長處測定吸收度，按C C1010H H1212N N4 4O O5 5的的吸收系數(shù)（吸收系數(shù)（E E1 11cm1cm）為）為460460計(jì)算。計(jì)算。2）HPLC6.6.作用與用途作用與用途輔酶類藥。有改善機(jī)體代謝作輔酶類藥。有改善機(jī)體代謝作用。用于各種類型肝臟疾患、心臟疾患、白用。用于各種類型肝臟疾患、心臟疾患、白細(xì)胞減少癥、血小板減少

16、癥、中心視網(wǎng)膜炎、細(xì)胞減少癥、血小板減少癥、中心視網(wǎng)膜炎、視神經(jīng)萎縮等。視神經(jīng)萎縮等。7.7.用法與用量用法與用量口服，一次口服，一次0.20.20.6g0.6g一日一日0.60.61.8g1.8g8.8.貯藏貯藏遮光，密閉保存。遮光，密閉保存。9.9.制劑制劑(1)(1)肌苷口服溶液肌苷口服溶液(2)(2)肌苷片肌苷片(3)(3)肌肌苷注射液苷注射液 (4)(4)肌苷膠囊肌苷膠囊(5)(5)肌苷顆粒劑肌苷顆粒劑（二）三磷酸腺苷二鈉（二）三磷酸腺苷二鈉（ATP）的質(zhì)量分析）的質(zhì)量分析 拼音名：拼音名：SanlinsuanxianganSanlinsuanxianganerna erna 英文名

17、：英文名：Adenosine Disodium TriphosphateAdenosine Disodium Triphosphate C C1010H H1414N N5 5NaNa2 2O O1313P P3 3 551.15 551.151.1.結(jié)構(gòu)：結(jié)構(gòu)：本品為腺嘌呤核苷本品為腺嘌呤核苷-5-5- -三磷酸酯二鈉鹽三磷酸酯二鈉鹽三水化合物。按干燥品計(jì)算，含三水化合物。按干燥品計(jì)算，含C C1010H H1414N N5 5NaNa2 2O O1313P P3 3不得少于不得少于90.090.0。2.2.性狀：性狀：本品為白色或類白色粉末或結(jié)晶塊狀物；本品為白色或類白色粉末或結(jié)晶塊狀物；

18、無臭，味咸；有引濕性。本品在水中易溶，在無臭，味咸；有引濕性。本品在水中易溶，在乙醇、氯仿或乙醚中幾乎不溶。乙醇、氯仿或乙醚中幾乎不溶。 3.3.鑒別鑒別（1 1）取本品）取本品20mg,20mg,加稀硝酸加稀硝酸2ml2ml溶解后，加鉬酸銨試液溶解后，加鉬酸銨試液1ml1ml，加熱，放冷，即析出黃色沉淀。，加熱，放冷，即析出黃色沉淀。-磷酸鹽磷酸鹽（2 2）取本品約）取本品約10mg10mg，加鹽酸溶液，加鹽酸溶液(12)5ml(12)5ml溶解后，溶解后，加加間苯三酚間苯三酚10mg10mg，混勻，置水浴中加熱約，混勻，置水浴中加熱約1 1分鐘，即分鐘，即顯玫瑰紅色。顯玫瑰紅色。-戊糖戊糖（3 3）苔黑酚反應(yīng)）苔黑酚反應(yīng)戊糖戊糖 （3 3）UVUV（4 4）IRIR（5 5）本品的水溶液顯鈉鹽的鑒別反應(yīng)）本品的水溶液顯鈉鹽的鑒別反應(yīng)4.4.檢查檢查酸度酸度溶液的澄清度與顏色溶液的澄清度與顏色蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)取本品取本品20mg20mg，加水，加水2ml2ml溶解后，滴加溶解后，滴加3030磺基磺基水楊酸水楊酸溶液溶液0.5ml0.5ml，不得發(fā)生渾濁。，不得發(fā)生渾濁。有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)水分水分氯化物氯化物鐵鹽鐵鹽重金屬重金屬熱原熱原5.5.含量測定含量測定（1 1）總核苷酸：）總核苷酸：UVUV（2 2）三磷酸腺苷二鈉的重量比：）三磷酸