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文檔簡介

1、n高效液相色譜法高效液相色譜法 HPLC （High Performance Liquid ChromatographyHigh Performance Liquid Chromatography）3-13-1 高效液相色譜法的特點高效液相色譜法的特點1貯液罐（濾棒，可濾 去顆粒狀物質(zhì)）2高壓泵（輸液泵）3進樣裝置4色譜柱分離5檢測器分析6廢液出口或組分收集器 7記錄裝置高效液相色譜儀高效液相色譜儀4檢測系統(tǒng) 1）紫外-可見吸收檢測器UV-Vis： 適用于吸收紫外或可見光的物質(zhì) 靈敏度較高，應(yīng)用范圍較廣 (光電二極管陣列檢測器DAD) 2）熒光檢測器FLD： 只能分析具有熒光活性的物質(zhì) 靈敏度

2、高，但適用范圍有限 3）示差折光檢測器RID： 利用折光率的差別來檢測，為通用型 檢測器，但靈敏度低，溫度要求嚴格 4）電化學(xué)檢測器： 常用的有電導(dǎo)檢測器和安培檢測器電導(dǎo)檢測器是測量物質(zhì)在流動相中電離后所引起的電導(dǎo)率的變化，組分濃度越高，電離產(chǎn)生的離子濃度越高，電導(dǎo)率變化就越大，多用于離子色譜。安培檢測器適用于測定所有在工作電極的電壓范圍內(nèi)發(fā)生氧化或還原反應(yīng)的物質(zhì)，在生化樣品分析中應(yīng)用廣泛，是迄今最靈敏的HPLC檢測器。5）其他檢測器 化學(xué)發(fā)光檢測器、質(zhì)譜檢測器等5附屬系統(tǒng) 梯度淋洗(洗脫)裝置洗脫方式有：1）等度洗脫（恒組成溶劑洗脫） 以固定配比的溶劑系統(tǒng)洗脫組分（一元泵） 類似GC的等溫度

3、洗脫2）梯度洗脫： 梯度淋洗指在分離過程中使流動相的組成隨時間改變而改變。即不斷改變?nèi)軇O性（二元泵） 適于分析極性差別較大的復(fù)雜組分 類似GC的程序升溫（沸程較長樣品）各類高效液相色譜法簡介各類高效液相色譜法簡介一、液固吸附色譜法（一、液固吸附色譜法（LSC）流動相為液體，固定相為固體吸附劑流動相為液體，固定相為固體吸附劑分為極性和非極性兩類極性固定相： 硅膠、氧化鋁和氧化鎂、硅酸鎂分子篩等，其 中極性硅膠應(yīng)用最普遍。非極性固定相： 多孔微?；钚蕴肌⒍嗫资亢?，以及高分 子多孔微球等。1）硅膠： 無定型硅膠 最早使用，傳質(zhì)慢、柱效低 薄殼型硅膠 直徑為3040m的玻璃珠表面涂布一層12m 厚的硅膠微粒，孔徑均一、滲透性好、傳質(zhì) 快，但柱容量有限。 全多孔球型硅膠 粒度一般為510m，顆粒和孔徑的均一性都比 前兩種好，柱容量大，為當今液固色譜固定相 的主體，也是鍵合固定相的主要基質(zhì)。原理-吸附 特點-峰易拖尾 適用-分離極性化合物2）高分子多

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