1、基礎(chǔ)知識(shí)梳理一、菊花的組織培養(yǎng)一、菊花的組織培養(yǎng)1理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞的理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞的 。2基本過(guò)程：基本過(guò)程：全能性全能性再分化再分化脫分化脫分化基礎(chǔ)知識(shí)梳理3影響因素影響因素(1)材料：材料： 、年齡、保存時(shí)間長(zhǎng)短、年齡、保存時(shí)間長(zhǎng)短等等(2)營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)a大量元素。大量元素。b 。有機(jī)營(yíng)養(yǎng)：有機(jī)營(yíng)養(yǎng)： 、甘氨酸、甘氨酸、 、肌醇以及蔗糖等。肌醇以及蔗糖等。種類種類微量元素微量元素維生素維生素?zé)熕釤熕峄A(chǔ)知識(shí)梳理(3)激素：激素： 和細(xì)胞分裂素。和細(xì)胞分裂素。(4)pH： 左右。左右。(5)溫度：溫度：1822 。(6)光照：每日光照光照：每日光照12 h。4實(shí)驗(yàn)操作步驟：

2、實(shí)驗(yàn)操作步驟：制備制備MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基外植體消毒外植體消毒 培養(yǎng)培養(yǎng) 栽培栽培生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素5.8接種接種移栽移栽基礎(chǔ)知識(shí)梳理二、月季的花藥培養(yǎng)二、月季的花藥培養(yǎng)1理論基礎(chǔ)：花粉具有理論基礎(chǔ)：花粉具有 。2花粉發(fā)育過(guò)程：花粉發(fā)育過(guò)程： 、單核、單核期、期、 等階段。等階段。3產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑：產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑：全能性全能性四分體時(shí)期四分體時(shí)期雙核期雙核期基礎(chǔ)知識(shí)梳理 4操作關(guān)鍵操作關(guān)鍵 (1)選材選材 要選擇要選擇 、 的花的花蕾。蕾。 花粉最好處于花粉最好處于 ，花藥培養(yǎng)的成，花藥培養(yǎng)的成功率最高。功率最高。 確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用的方法確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用的方法是是 和和 ，可

3、以，可以將細(xì)胞核分別染成紅色和將細(xì)胞核分別染成紅色和藍(lán)黑藍(lán)黑色。色。初花期初花期完全未開(kāi)放完全未開(kāi)放單核期細(xì)胞核由中單核期細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期醋酸洋紅法醋酸洋紅法焙花青焙花青鉻礬法鉻礬法基礎(chǔ)知識(shí)梳理 (2)接種接種 剝離花藥盡量不損傷花藥，否則剝離花藥盡量不損傷花藥，否則接種后容易接種后容易 。 要要 ，因?yàn)榕c花絲相，因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或連的花藥不利于愈傷組織或 的形的形成。成。 (3)培養(yǎng)：花藥培養(yǎng)一段時(shí)間后開(kāi)裂，培養(yǎng)：花藥培養(yǎng)一段時(shí)間后開(kāi)裂， 或釋放出胚狀體。要將前者及時(shí)轉(zhuǎn)移到或釋放出胚狀體。要將前者及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，如釋放出胚狀體，要盡

4、分化培養(yǎng)基上，如釋放出胚狀體，要盡快在花藥開(kāi)裂后，將快在花藥開(kāi)裂后，將 ，分別移植到新的培養(yǎng)基，分別移植到新的培養(yǎng)基上。上。從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織徹底去除花絲徹底去除花絲胚狀體胚狀體長(zhǎng)出愈傷組織長(zhǎng)出愈傷組織幼小植株分開(kāi)幼小植株分開(kāi)核心要點(diǎn)突破一、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程及影響因素一、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程及影響因素1培養(yǎng)過(guò)程培養(yǎng)過(guò)程(1)菊花組織培養(yǎng)過(guò)程菊花組織培養(yǎng)過(guò)程核心要點(diǎn)突破(2)月季的花藥培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)核心要點(diǎn)突破2影響植物組織培養(yǎng)的因素影響植物組織培養(yǎng)的因素(1)內(nèi)因：植物的種類，同一植物材料的年內(nèi)因：植物的種類，同一植物材料的年齡、保存時(shí)間的長(zhǎng)短等。齡、保存

5、時(shí)間的長(zhǎng)短等。(2)外因外因營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)a礦質(zhì)元素。礦質(zhì)元素。b有機(jī)物。有機(jī)物。調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)劑(生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素)a使用順序不同使用順序不同結(jié)果不同。結(jié)果不同。b兩者用量比例不同兩者用量比例不同發(fā)育方向不同。發(fā)育方向不同。環(huán)境條件：溫度、環(huán)境條件：溫度、pH、光照等。、光照等。核心要點(diǎn)突破【易誤警示易誤警示】一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)物被污染，一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)物被污染，特別是真菌性污染，一定不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶。特別是真菌性污染，一定不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶。應(yīng)先將被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽鍋應(yīng)先將被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽鍋內(nèi)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，然后再打開(kāi)培養(yǎng)瓶進(jìn)內(nèi)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，然后再打開(kāi)培養(yǎng)瓶進(jìn)行清

6、理。行清理。核心要點(diǎn)突破3實(shí)驗(yàn)操作中應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題實(shí)驗(yàn)操作中應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題(1)材料的選?。壕栈ǖ慕M織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料的選?。壕栈ǖ慕M織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)中，應(yīng)選擇未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝；月季花藥的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇花粉發(fā)枝；月季花藥的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇花粉發(fā)育過(guò)程中的單核靠邊期的花粉進(jìn)行培養(yǎng)。育過(guò)程中的單核靠邊期的花粉進(jìn)行培養(yǎng)。(2)外植體消毒：所用消毒劑為體積分外植體消毒：所用消毒劑為體積分?jǐn)?shù)為數(shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化的氯化汞溶液，所使用的清洗液是無(wú)菌水。汞溶液，所使用的清洗液是無(wú)菌水。(3)培養(yǎng)過(guò)程：在初期，菊花的組

7、織培培養(yǎng)過(guò)程：在初期，菊花的組織培養(yǎng)需光照，月季花藥的培養(yǎng)不需光照；而在養(yǎng)需光照，月季花藥的培養(yǎng)不需光照；而在后期均需光照。后期均需光照。核心要點(diǎn)突破即時(shí)應(yīng)用1下列有關(guān)花藥離體培養(yǎng)，說(shuō)法錯(cuò)下列有關(guān)花藥離體培養(yǎng)，說(shuō)法錯(cuò)誤的是誤的是()A對(duì)材料的選擇最常用的方法是焙對(duì)材料的選擇最常用的方法是焙花青花青鉻礬法，這種方法能將花粉細(xì)胞鉻礬法，這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色核染成藍(lán)黑色B材料消毒時(shí)需先用酒精浸泡，然材料消毒時(shí)需先用酒精浸泡，然后用氯化汞或次氯酸鈣溶液浸泡，最后用后用氯化汞或次氯酸鈣溶液浸泡，最后用無(wú)菌水沖洗無(wú)菌水沖洗核心要點(diǎn)突破C接種花藥后一段時(shí)間內(nèi)不需要光照，接種花藥后一段時(shí)間內(nèi)不需要

8、光照，但幼小植株形成后需要光照但幼小植株形成后需要光照D若接種的花藥長(zhǎng)出愈傷組織或形成若接種的花藥長(zhǎng)出愈傷組織或形成胚狀體后，要適時(shí)轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基，以便進(jìn)一步胚狀體后，要適時(shí)轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基，以便進(jìn)一步分化成再生植株分化成再生植株解析解析：選選A。確定花粉發(fā)育的時(shí)期最常確定花粉發(fā)育的時(shí)期最常用的方法是醋酸洋紅法，有些植物細(xì)胞核不用的方法是醋酸洋紅法，有些植物細(xì)胞核不易著色時(shí)，需采用焙花青易著色時(shí)，需采用焙花青鉻礬法。鉻礬法。核心要點(diǎn)突破二、植物激素在組織培養(yǎng)過(guò)程中的重要二、植物激素在組織培養(yǎng)過(guò)程中的重要作用作用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素

9、，其作用及特脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，其作用及特點(diǎn)為：點(diǎn)為：核心要點(diǎn)突破激素使用激素使用實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果使用順序使用順序先生長(zhǎng)素后細(xì)胞分裂素先生長(zhǎng)素后細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化但細(xì)胞不分化先細(xì)胞分裂素后生長(zhǎng)素先細(xì)胞分裂素后生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化細(xì)胞既分裂也分化生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素同時(shí)生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素同時(shí)使用使用分化頻率提高分化頻率提高生長(zhǎng)素用量生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂與細(xì)胞分裂素用量的比素用量的比例例該比值高時(shí)該比值高時(shí)利于根的分化，抑利于根的分化，抑制芽的形成制芽的形成該比值低時(shí)該比值低時(shí)利于芽的分化，抑利于芽的分化，抑制根的形成制根的形成該比值適中時(shí)該比值適中時(shí)促

10、進(jìn)愈傷組織的生促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)長(zhǎng)核心要點(diǎn)突破即時(shí)應(yīng)用2利用植物組織培養(yǎng)的方法可快速、利用植物組織培養(yǎng)的方法可快速、大量地繁殖植物。在培養(yǎng)過(guò)程中，取該植大量地繁殖植物。在培養(yǎng)過(guò)程中，取該植物的花芽并將其分別培養(yǎng)在含有不同比例物的花芽并將其分別培養(yǎng)在含有不同比例的吲哚乙酸和細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基中，花的吲哚乙酸和細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基中，花芽的生長(zhǎng)狀況如下表所示：芽的生長(zhǎng)狀況如下表所示：核心要點(diǎn)突破A組組花芽花芽B組花芽組花芽C組花芽組花芽D組花芽組花芽 E組花芽組花芽吲哚吲哚乙酸乙酸03 ppm3 ppm0.03 ppm0細(xì)胞細(xì)胞分裂分裂素素00.2 ppm 0.002 ppm1.0 ppm0.2 p

11、pm花芽花芽生長(zhǎng)生長(zhǎng)情況情況組織組織切塊切塊形成愈形成愈傷組織傷組織愈傷組織愈傷組織分化出根分化出根愈傷組織愈傷組織分化出嫩分化出嫩枝枝稍生長(zhǎng)稍生長(zhǎng)核心要點(diǎn)突破 請(qǐng)據(jù)表回答下列問(wèn)題：請(qǐng)據(jù)表回答下列問(wèn)題： (1)在此過(guò)程中能實(shí)現(xiàn)脫分化的花芽是在此過(guò)程中能實(shí)現(xiàn)脫分化的花芽是_組。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，能誘導(dǎo)組。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，能誘導(dǎo)新芽形成的條件是新芽形成的條件是_。核心要點(diǎn)突破 (2)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在植物組織培上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，誘導(dǎo)芽和根形成的關(guān)鍵是養(yǎng)過(guò)程中，誘導(dǎo)芽和根形成的關(guān)鍵是_。在生產(chǎn)實(shí)踐中，欲快速、大量獲得此植物的在生產(chǎn)實(shí)踐中，欲快速、大量獲得此植物的花芽，可

12、選用花芽，可選用_組的培養(yǎng)基進(jìn)行大量組的培養(yǎng)基進(jìn)行大量生產(chǎn)。生產(chǎn)。核心要點(diǎn)突破答案答案：(1)BCD細(xì)胞分裂素濃度大于細(xì)胞分裂素濃度大于生長(zhǎng)素濃度生長(zhǎng)素濃度(2)培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素含量培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素含量與生長(zhǎng)素含量之間的比例與生長(zhǎng)素含量之間的比例(或培養(yǎng)基中細(xì)胞或培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的濃度比分裂素與生長(zhǎng)素的濃度比)D(2009年高考山東卷年高考山東卷)人參是一種名貴中人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。利用細(xì)藥材，其有效成分主要是人參皂苷。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下：胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下：高頻考點(diǎn)例析高頻考點(diǎn)例析考點(diǎn)一考點(diǎn)一 植物組織的培養(yǎng)

13、過(guò)程及應(yīng)用植物組織的培養(yǎng)過(guò)程及應(yīng)用例例1高頻考點(diǎn)例析高頻考點(diǎn)例析請(qǐng)回答：請(qǐng)回答：(1)配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進(jìn)行后要進(jìn)行。接種前，要對(duì)人參根進(jìn)行。接種前，要對(duì)人參根進(jìn)行。(2)用于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做用于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于色的絨毛狀菌落，屬于污染；若是有污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于光澤的黏液狀菌落，屬于污染。污染。高頻考點(diǎn)例析(3)用少量用少量酶處理愈傷組織，酶處理愈傷組織，獲取單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)獲取單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)

14、，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂苷合成量。行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂苷合成量。(4)人參皂苷易溶于水溶性人參皂苷易溶于水溶性(親水性親水性)有機(jī)有機(jī)溶劑，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用溶劑，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用方法，操作時(shí)應(yīng)采用方法，操作時(shí)應(yīng)采用加熱。加熱。高頻考點(diǎn)例析【解析解析】(1)滅菌是指用強(qiáng)烈的物理滅菌是指用強(qiáng)烈的物理或化學(xué)的方法，殺死物體內(nèi)外的一切微生物，或化學(xué)的方法，殺死物體內(nèi)外的一切微生物，包括芽孢和孢子。消毒指使用較為溫和的物包括芽孢和孢子。消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害

15、的微生物。在組織培養(yǎng)過(guò)程中要對(duì)人體有害的微生物。在組織培養(yǎng)過(guò)程中要防止雜菌的污染，需要對(duì)固體培養(yǎng)基進(jìn)行滅防止雜菌的污染，需要對(duì)固體培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，對(duì)人參根進(jìn)行消毒。菌，對(duì)人參根進(jìn)行消毒。高頻考點(diǎn)例析(2)用于離體培養(yǎng)的離體的植物組織或用于離體培養(yǎng)的離體的植物組織或器官器官(根切塊根切塊)稱為外植體。單個(gè)或少數(shù)微生稱為外植體。單個(gè)或少數(shù)微生物細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖后，會(huì)形成以母細(xì)胞為中心物細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖后，會(huì)形成以母細(xì)胞為中心的一堆肉眼可見(jiàn)、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞的一堆肉眼可見(jiàn)、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞集團(tuán)，這就是菌落。我們可以根據(jù)菌落的特集團(tuán)，這就是菌落。我們可以根據(jù)菌落的特征判斷微生物的種類。霉菌的菌落較

16、大，肉征判斷微生物的種類。霉菌的菌落較大，肉眼可見(jiàn)許多毛狀物，呈棕色、青色等，細(xì)菌眼可見(jiàn)許多毛狀物，呈棕色、青色等，細(xì)菌菌落常表現(xiàn)為濕潤(rùn)、黏稠，有光澤。菌落常表現(xiàn)為濕潤(rùn)、黏稠，有光澤。高頻考點(diǎn)例析(3)果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物的果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物的細(xì)胞壁和胞間層，使愈傷組織分離。細(xì)胞壁和胞間層，使愈傷組織分離。(4)人參皂苷溶于水溶性有機(jī)溶劑，可人參皂苷溶于水溶性有機(jī)溶劑，可以用萃取法從培養(yǎng)物干粉中提取。萃取時(shí)要以用萃取法從培養(yǎng)物干粉中提取。萃取時(shí)要采用水浴加熱，這是因?yàn)橛袡C(jī)溶劑都是易燃采用水浴加熱，這是因?yàn)橛袡C(jī)溶劑都是易燃物，用明火加熱容易引起燃燒、爆炸。物，用明火加熱容易引起

17、燃燒、爆炸。【答案答案】(1)滅菌消毒滅菌消毒(2)外植體外植體真菌真菌(霉菌霉菌)細(xì)菌細(xì)菌(3)果膠果膠(4)萃取萃取(浸取浸取)水浴水浴高頻考點(diǎn)例析考點(diǎn)二考點(diǎn)二 植物激素在組織培養(yǎng)過(guò)程中的作用植物激素在組織培養(yǎng)過(guò)程中的作用例例2(2009年高考上海卷年高考上海卷)回答下列有關(guān)植物回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的問(wèn)題。組織培養(yǎng)的問(wèn)題。(1)用于植物組織培養(yǎng)的植物材料稱為用于植物組織培養(yǎng)的植物材料稱為_(kāi)。(2)組織培養(yǎng)中的細(xì)胞，從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)組織培養(yǎng)中的細(xì)胞，從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過(guò)程稱為變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過(guò)程稱為_(kāi)。高頻考點(diǎn)例析(3)在再分化階段所用培養(yǎng)基中，含有在再分化階段所用培養(yǎng)基中，含有植

18、物激素植物激素X和植物激素和植物激素Y。逐漸改變培養(yǎng)基。逐漸改變培養(yǎng)基中這兩種植物激素的濃度比，未分化細(xì)胞群中這兩種植物激素的濃度比，未分化細(xì)胞群的變化情況如下圖所示。據(jù)圖指出兩種激素的變化情況如下圖所示。據(jù)圖指出兩種激素的不同濃度比與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)的不同濃度比與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系：系：高頻考點(diǎn)例析高頻考點(diǎn)例析 當(dāng)植物激素當(dāng)植物激素X與植物激素與植物激素Y的濃度比的濃度比等于等于1時(shí)，時(shí)，_； _； _。高頻考點(diǎn)例析(4)若植物激素若植物激素Y是生長(zhǎng)素，在植物組織是生長(zhǎng)素，在植物組織培養(yǎng)中其主要作用是培養(yǎng)中其主要作用是；則植物激素則植物激素X的名稱是的名稱是。(5)生產(chǎn)上用試管苗保留植物的優(yōu)良性生產(chǎn)上用試管苗保留植物的優(yōu)良性狀，其原因是狀，其原因是。高頻考點(diǎn)例析【解析解析】(1)植物組織培養(yǎng)時(shí)所取材料稱植物組織培養(yǎng)時(shí)所取材料稱為外植體。為外植體。(2)讓已經(jīng)分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后，失去讓已經(jīng)分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過(guò)其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過(guò)程，稱為脫分化。程，稱為脫分化。(3)據(jù)圖可