1、 33ICS 67.120.30CCS B 50浙 江 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB33/T 24122021漁業(yè)環(huán)境中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多組分殘留量測定氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法Determination of pyrethrin pesticide residues in fishery environment bygas chromatography tandem mass spectrometry2021-12-24發(fā)布2022-01-24實施 DB33/T 24122021目次前言. II1 范圍. 12 規(guī)范性引用文件 . 13 術(shù)語和定義 . 14 原理. 15 試劑和材料 . 16 儀器設(shè)備

2、 . 27 樣品. 28 試驗步驟 . 29 試驗數(shù)據(jù)處理 . 310 方法的定量限、準(zhǔn)確度和精密度 . 4附錄A（資料性） 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的中文與英文名稱、定量定性離子對、保留時間和定量限. 5附錄B（資料性） 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的總離子流色譜圖. 6附錄C（資料性） 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）二級譜圖. 7I DB33/T 24122021前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.12020標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定起草。II DB33/T 24122021漁業(yè)環(huán)境中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多組分殘留量測定 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了漁業(yè)環(huán)境水體和底

3、泥中10種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定的原理、試劑材料、儀器設(shè)備、樣品、試驗步驟、試驗數(shù)據(jù)處理、方法的定量限、準(zhǔn)確度和精密度等要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于漁業(yè)環(huán)境水體及底泥中聯(lián)苯菊酯、胺菊酯、丙烯菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯和氟胺氰菊酯等10種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多組分殘留量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本標(biāo)準(zhǔn)必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T66822008 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB17378.3 海洋

4、監(jiān)測規(guī)范 第3部分：樣品采集、貯存與運輸GB17378.5 海洋監(jiān)測規(guī)范 第5部分：沉積物分析HJ493 水質(zhì)采樣 樣品的保存和管理技術(shù)規(guī)定SC/T9102.3 漁業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測規(guī)范 第3部分：淡水34術(shù)語和定義本標(biāo)準(zhǔn)沒有需要界定的術(shù)語和定義。原理水體中的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留經(jīng)正己烷和二氯甲烷提取，PSA-佛羅里土復(fù)合固相萃取柱凈化；底泥中的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留經(jīng)正己烷-乙酸乙酯-丙酮混合溶劑超聲提取，銅粉除去硫化物，PSA-佛羅里土復(fù)合固相萃取柱凈化。氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定，外標(biāo)法定量。5試劑和材料5.1 試驗用水：符合GB/T 66822008一級水要求。5.2 二氯甲烷：色譜純。5.3

5、正己烷：色譜純。5.4 乙酸乙酯：色譜純。5.5 丙酮：色譜純。5.6 正己烷-乙酸乙酯-丙酮（8+1+1）：量取8體積正己烷、1體積乙酸乙酯和1體積丙酮，混勻。5.7 鹽酸溶液（1+1）：取1體積鹽酸緩慢加入1體積水中，冷卻。5.8 無水硫酸鈉：650灼燒4h，取出放入干燥器中冷卻后置于密閉容器中備用。5.9 銅粉：200目，純度99.7%，鹽酸溶液浸泡30min，傾去鹽酸溶液，去離子水洗至中性，再用丙酮洗滌數(shù)次，氮氣吹干，充氮氣保存于具塞玻璃瓶中。5.10 無水硫酸鈉柱：砂芯玻璃層析柱（內(nèi)徑1.0cm）中裝無水硫酸鈉10g，邊倒邊輕輕敲打。5.11 乙二胺-N-丙基甲硅烷（PSA）填料：4

6、0m63m。1 DB33/T 241220215.12 佛羅里土固相萃取柱：1000mg，6mL，或相當(dāng)者。5.13 PSA-佛羅里土復(fù)合固相萃取柱：稱取0.5gPSA，填充于佛羅里土固相萃取小柱中，敲打柱身使其緊實，再加1g無水硫酸鈉。5.14 微孔濾膜：纖維素濾膜，0.45m，直徑6cm。5.15 有機相濾膜：尼龍66，0.45m。5.16 擬除蟲菊酯類標(biāo)準(zhǔn)溶液：聯(lián)苯菊酯、胺菊酯、丙烯菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯和氟胺氰菊酯均為有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度分別為100g/mL，溶劑正己烷。5.17 擬除蟲菊酯類混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：分別準(zhǔn)確量取適量的每種擬除蟲菊酯標(biāo)準(zhǔn)

7、溶液，用正己烷配制成濃度為1.00g/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。置于-18冰箱中避光保存，有效期3個月。6儀器設(shè)備6.1 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，配有電子轟擊離子（EI）源。6.2 電子天平：最小分度值分別為0.01g 和0.0001g。6.3 離心機：轉(zhuǎn)速可達(dá)5000r/min。6.4 旋渦混合器。6.5 固相萃取裝置。6.6 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。6.7 超聲波儀：40kHz。7樣品7.1 樣品采集、貯存和運輸按照GB 17378.3、HJ 493、SC/T 9102.3執(zhí)行。7.2 水體樣品采集以1L棕色磨口玻璃瓶封裝后4冷藏保存，24h內(nèi)完成樣品萃??；在采集與保存過程中，應(yīng)防止樣品受到污染或發(fā)生殘留

8、物含量的變化。提取液在5d內(nèi)完成分析測定。7.3 底泥樣品采集后剔除礫石和雜物，混合均勻，于1L棕色磨口玻璃瓶中4冷藏保存，保存時間7d；在采集與保存過程中，應(yīng)防止樣品受到污染或發(fā)生殘留物含量的變化。提取液在5d內(nèi)完成分析測定。底泥樣品含水率測定按照GB 17378.5執(zhí)行。8試驗步驟8.1水樣前處理8.1.1提取若樣品混濁，預(yù)先抽濾過微孔濾膜。搖勻并準(zhǔn)確量取500mL試樣于1000mL分液漏斗中，加入20mL二氯甲烷，振蕩搖勻2min，靜置，下層有機相過無水硫酸鈉柱，收集于旋蒸瓶中；用20mL正己烷重復(fù)提取樣品一次，靜置分層后收集正己烷相過無水硫酸鈉柱，與二氯甲烷相合并，在萃取過程中出現(xiàn)乳化

9、現(xiàn)象時，采用玻璃棉過濾方法破乳。用10mL正己烷淋洗無水硫酸鈉柱，收集淋洗液于旋蒸瓶。淋洗液于40水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入2mL正己烷復(fù)溶，待凈化。8.1.2凈化將PSA-佛羅里土復(fù)合固相萃取柱用5mL正已烷預(yù)淋洗，棄去淋洗液；待正己烷液面與萃取柱填料相平時，將復(fù)溶液全部轉(zhuǎn)移至萃取柱上，并用正已烷分3次洗滌旋蒸瓶，每次1mL，洗滌液并入萃取柱中；將濃縮的提取液轉(zhuǎn)移到柱子中，加入10mL正己烷-乙酸乙酯-丙酮（8+1+1）進(jìn)行洗脫。收集上述洗脫液至離心管中，氮吹至近干，用正己烷溶解并定容至1.00mL，充分渦旋后過有機相濾膜轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣小瓶中，供氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析。8.2底泥前處理8.2.1

10、提取2 DB33/T 24122021在裝有5g（精確到0.01g）濕泥樣的離心管中加入10mL水，再加入20mL正己烷-乙酸乙酯-丙酮（8+1+1），渦旋混合，浸泡30min，超聲萃取30min；5000r/min離心5min，上層有機相過無水硫酸鈉柱收集于旋蒸瓶中；下層加入20mL正己烷-乙酸乙酯-丙酮（8+1+1），重復(fù)提取一次，合并有機相。8.2.2凈化在8.2.1的提取液中加入3g5g銅粉，至銅粉不再發(fā)黑，充分渦旋混合脫硫，靜置1h2h，期間多次充分渦旋。提取液于40水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入2mL正己烷復(fù)溶。按照本標(biāo)準(zhǔn)8.1.2的步驟，使用PSA-佛羅里土復(fù)合固相萃取柱后續(xù)凈化。8

11、.3測定8.3.1 色譜柱：DB-5MS毛細(xì)管柱，30m0.25mm0.25m；或性能相當(dāng)者。8.3.2 進(jìn)樣口溫度：260。8.3.3 載氣：高純氦氣（純度99.999%），流速1.0mL/min。8.3.4 升溫程序：初始溫度70，保持1min；以20/min升至200，保持4min；再以15/min升至250，保持1min；然后以10/min升至280，保持2min。8.3.5 進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣。8.3.6 進(jìn)樣量：1L。8.3.7 離子源：EI源，電離能量為70eV。8.3.8 離子源溫度：2508.3.9 傳輸線溫度：280。8.3.10 檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測模式（MRM）。8.

12、3.11 溶劑延遲時間：5min。8.3.12 駐留時間：100ms。8.4標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制準(zhǔn)確吸取適量的擬除蟲菊酯類混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，用空白樣品提取液稀釋，配制各擬除蟲菊酯組分濃度均為10g/L、50g/L、100g/L、250g/L、500g/L、1000g/L系列基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用；按8.3設(shè)定儀器條件，取基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液，以峰面積為縱坐標(biāo)，以對應(yīng)濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，外標(biāo)法定量?；|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液中各待測組分的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測的線性范圍之內(nèi)。8.5空白試驗除不加試樣外，均按8.18.3試驗步驟進(jìn)行。平行試驗8.6按8.18.3試驗步驟，對同一試樣進(jìn)行平行試驗測定。9試驗數(shù)

13、據(jù)處理9.1定性分析按照8.3的測定條件，試樣液和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液待測物質(zhì)量色譜峰的保留時間相比較，偏差在5%以內(nèi)，并且檢測到的定性離子的相對豐度與濃度相近的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液中相應(yīng)的定性離子（附錄A）的相對豐度一致，其偏差不超過表1規(guī)定的范圍，則可判斷試樣中存在對應(yīng)的待測物。10種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的色譜峰保留時間、監(jiān)測離子對參見附錄A。標(biāo)準(zhǔn)品的總離子流色譜圖參見附錄B。表1定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度% 50最大允許偏差%101520502050（不含20）1020（不含10） 103 DB33/T 241220219.2定量分析9.2.1水樣結(jié)果計算水體中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的含

14、量按公式（1）計算，計算結(jié)果需扣除空白值。= (C -C 0) V n. (1)CsVS式中：CS 樣品中擬除蟲菊酯各組分含量，g/L；C 從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得對應(yīng)的擬除蟲菊酯各組分濃度，g/L；C0 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的空白試樣提取液中待測組分的含量，g/L；V 樣品定容體積，mL；VS 樣品取樣體積，mL；n 稀釋倍數(shù)。9.2.2底泥結(jié)果計算底泥中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的含量按公式（2）計算，計算結(jié)果扣除空白值。Cs = (C - C ) V n0. (2)m (1 -W )式中：CS 底泥中擬除蟲菊酯各組分含量，g/kg干重；C 從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得對應(yīng)的擬除蟲菊酯各組分濃度，g/L；C0 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)

15、工作曲線得到的空白試樣提取液中待測組分的含量，g/L；V 試樣定容體積，mL；m 樣品稱樣量，g；W 含水率，%；n稀釋倍數(shù)。10方法的定量限、準(zhǔn)確度和精密度10.1定量限水體取樣量為500mL，定容體積為1.00mL時，10種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥各組分的定量限參見附錄A；底泥取樣量為5g，定容體積為1.00mL時，10種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥各組分的定量限參見附錄A。10.2準(zhǔn)確度水體中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥添加濃度為0.1g/L1.0g/L時，回收率為70%120%；底泥中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥添加濃度為10g/kg100g/kg時，回收率為70%120%。10.3精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果絕對

16、差值不得超過算術(shù)平均值的15%。4 DB33/T 24122021AA附錄 A（資料性）擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的中文與英文名稱、定量定性離子對、保留時間和定量限表A.1給出了擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的中文與英文名稱、定量定性離子對、保留時間和定量限。表A.1 10種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的定量離子對、定性離子對、碰撞能量和保留時間國際化學(xué)物質(zhì)登錄號/CAS保留時間/min定量限序號中文名稱英文名稱定量離子對/（m/z） 碰撞能量/eV定性離子對/（m/z） 碰撞能量/eV水樣/(g/L)底泥/(g/kg)1012丙烯菊酯胺菊酯AllethrinTetramethrinTetramethrin584-79-291/

17、65164/77.1164/77.1181.1/165.2181.1/152.1197/14115252525251010101015155123/8110101010522.53429.12729.12729.33729.550.10164/107.1164/107.1181.2/166.2207.9/181208/1817696-12-00.055.03胺菊酯4聯(lián)苯菊酯BifenthrinFenpropathrinCyhalothrinPermethrin Permethrin CypermethrinCypermethrinCypermethrinFenvalerateFenvalera

18、teFluvalinateFluvalinate82657-04-339515-41-891465-08-60.020.020.031.05.05.05甲氰菊酯6氯氟氰菊酯氯菊酯530.89931.93232.14233.47183.1/168.1182.9/168.1163/91183.1/165.1182.9/155.1163/1271010552645-53-152315-07-851630-58-10.020.100.105.08氯菊酯9氯氰菊酯氯氰菊酯氯氰菊酯氰戊菊酯氰戊菊酯氟胺氰菊酯-氟胺氰菊酯10111213141516163.1/91163.1/91167/125.1167/125.1250/55163.1/127.1163.