1、實驗一 原生動物：變形蟲、草履蟲、眼蟲 的采集、培養(yǎng)與觀察第1頁，共43頁。引言原生動物在形態(tài)上是單細胞，但生理上具有維持生命和延續(xù)后代所需的一切功能，如運動、營養(yǎng)、呼吸、排泄和生殖等，這些功能由細胞內(nèi)特化的細胞器來完成的。因此，原生動物是一個復雜的、高度集中的生命單位，是一個獨立完整的有機體。第2頁，共43頁。一、實驗目的(一) 以變形蟲、草履蟲和眼蟲為代表，了解肉足綱、纖毛蟲綱和鞭毛綱的一般形態(tài)特征及生活情況。(二) 通過對常見種的識別，了解原生動物在形態(tài)上的多樣性。第3頁，共43頁。二、實驗用具顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子。0.5氯化鈉。核染色劑：碘液或1醋酸或中性紅或1%乙酸甲基

2、綠溶液。刺絲泡刺激劑：藍墨水。第4頁，共43頁。三、實驗材料(一) 實驗材料：培養(yǎng)的變形蟲、草履蟲、眼蟲和玻片標本。(二) 示范材料：草履蟲的生殖、棘尾蟲、喇叭蟲、鐘形蟲的制片或活體標本。第5頁，共43頁。四、實驗步驟與觀察 第6頁，共43頁。（一）變形蟲、草履蟲、眼蟲的 采集與培養(yǎng)第7頁，共43頁。1 變形蟲的采集與培養(yǎng)1.1 采集變形蟲常常生活在較為潔凈、緩流的小河或池塘的靜水中，通常集中在水底泥渣爛葉中或水生植物水下部分的莖葉上，主要取食硅藻等藻類，也取食腐敗的水生植物葉片等。采集時可撈取水底物質(zhì)如呈黃褐色的碎屑（硅藻較多），或剪下水生植物水下部分帶有粘稠物的莖葉帶回實驗室。還可在水邊或

3、潮濕處挖取帶根的禾本科植物（不要去除根上的土）帶回實驗室。 第8頁，共43頁。1.2 培養(yǎng)選用池塘水過濾、煮沸，放入數(shù)粒小麥粒，室溫放置12天，使細菌繁殖起來。接種變形蟲時，將含有變形蟲的池塘水滴加在載玻片上，并滴加涼水1滴，放置12min，使變形蟲貼附于玻片上。傾斜玻片使水流掉，并用涼水緩緩沖洗玻片，盡量去除其他微小動物。將該玻片放人培養(yǎng)液，約兩周后，可有大量的變形蟲出現(xiàn)。亦可將根上帶土的禾本科植物直接浸入培養(yǎng)液中培養(yǎng)。第9頁，共43頁。2 草履蟲的采集與培養(yǎng)幾乎在各處的淡水中都能找到草履蟲，通常在污水溝中較容易找到它。第10頁，共43頁。2.1 采集草履蟲多生活在湖沼、池塘、水田以及城市生

4、活用水的下水溝中，以細菌、藻類和其他腐敗的有機物為食。在水底沉渣表面浮有灰白色絮狀物、有機物質(zhì)豐富的水中，有大量草履蟲生活。采集方法是將廣口瓶系上繩，沉人水底連同沉渣一塊撈起。第11頁，共43頁。2.2 培養(yǎng)取新鮮稻草，選擇近根部的幾節(jié)剪成46厘米長，浸在玻璃器皿的水中，蓋上玻璃，放在溫暖、明亮的地方，約十來天，肉眼可以看到有許多小白點在迅速移動著，這就是草履蟲?？稍谂囵B(yǎng)液中加少量玉米粉等促進草履蟲的繁殖。 第12頁，共43頁。3 綠眼蟲的采集與培養(yǎng)3.1 采集眼蟲生活在池沼或和緩的流水中。在不流動的、腐殖質(zhì)較多或排有生活污水的小河溝、池塘或臨時積有污水的水坑中，尤其是帶有臭味、發(fā)綠色的水中常

5、可采到眼蟲。眼蟲在春夏大量繁殖，而使它們所棲息的水呈綠色。采集時把綠色池水用玻璃瓶帶回，從中可以找到眼蟲。 第13頁，共43頁。3.2 培養(yǎng)將富含腐殖質(zhì)的泥土少許置于三角瓶中，加水至瓶容積的2/3處，以棉花輕輕塞住瓶口，煮沸5min，室溫放置24h。由于多數(shù)情況下采到的水樣混雜有其他動物，因此接種時應在解剖鏡下用微吸管將眼蟲吸出，反復多次。再將眼蟲接種到三角瓶中，置于向光處（避免陽光直射）純培養(yǎng)，一周后眼蟲大量繁殖。 第14頁，共43頁。（二）變形蟲、草履蟲、眼蟲的觀察第15頁，共43頁。A 變形蟲(Amoeba)吸一滴變形蟲培養(yǎng)液，置于載玻片上，加蓋玻片，先在低倍鏡下尋找，此時，可將光線調(diào)暗

6、些，如發(fā)現(xiàn)天藍色的透明體，而體形又緩緩改變的，即確定為變形蟲。第16頁，共43頁。1質(zhì)膜 (P1asma membrane)：為蟲體外表極薄的一層膜，由細胞質(zhì)形成。2細胞質(zhì)(cytoplasm)：可分為兩層(1)外質(zhì)(ectoplasma)：質(zhì)膜周圍的一層，薄而透明，較致密。(2)內(nèi)質(zhì)(endoplasma)：位于外質(zhì)的里面，色較暗，含有許多顆粒。第17頁，共43頁。3偽足( pseudopodium)：為細胞質(zhì)突起部分，可以向任何一個方向伸出，數(shù)目不定，在運動時，可清楚見到細胞質(zhì)流動，偽足形狀視種而異，有指狀、針狀、絲狀等，如能見到攝食，則可觀察它是如何捕捉食物的。4食物泡(food vac

7、uoles)：為內(nèi)質(zhì)里大小不等的圓形泡，泡內(nèi)含有各種食物顆粒，可注意觀察其位置是否固定。第18頁，共43頁。5伸縮泡(contractile vacuole)：為一透明的圓形液泡，生活時不斷伸縮。6細胞核(nucleus)：較透明，位于內(nèi)質(zhì)中央，略呈橢圓形，如分辨不清，可以在蓋玻片邊緣加一滴碘液或1醋酸或中性紅均能明顯可見。第19頁，共43頁。B 大草履蟲(Paramecium caudatum)1運動情況的觀察吸草履蟲培養(yǎng)液一小滴于載玻片上，加蓋玻片后，移至顯微鏡下。用低倍鏡觀察蟲體正常運動和遇到障礙物以后的運動情況，如蟲體運動太快，可用吸水紙從蓋玻片邊緣吸去一些水(注意不要吸干)，即可稍減

8、弱蟲體的運動。第20頁，共43頁。2外部形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)的觀察：滴一滴稀糊狀的甲基纖維素(將粉狀的甲基纖維素少許置于50ml的廣口瓶中，加水，用玻棒調(diào)成稀糊狀)于載玻片上，再加上一小滴草履蟲培養(yǎng)液于稀糊狀的甲基纖維素上，蓋上蓋玻片，此時，蟲體就不甚活動。先在低倍鏡下觀察外形，再換至中倍鏡或高倍鏡，依次觀察下列各部。第21頁，共43頁。草履蟲外型第22頁，共43頁。(1) 表膜(pellicle)：為蟲體最外一層堅韌而略具彈性的保護薄膜。(2) 纖毛(cilium)：將光圈縮小后，可見蟲體周圍有許多不斷擺動的纖毛，注意纖毛是否等長。(3) 細胞質(zhì)(cytoplasm)：分內(nèi)質(zhì)和外質(zhì)，外質(zhì)靠近表膜、

9、透明而粘稠，外質(zhì)里面，呈較稀顆粒狀的即是內(nèi)質(zhì)。(4) 口溝(oral groove)：在蟲體前側(cè)面，斜伸向后，凹入體內(nèi)的縱溝。(5) 胞口(cytostome)：為口溝底部一個橢圓形的小孔。第23頁，共43頁。第24頁，共43頁。蟲體失水后顯示的表膜結(jié)構(gòu)隨著蟲體的失水，表膜和細胞質(zhì)分離，可看清纖毛從表膜小孔伸出。第25頁，共43頁。(6) 胞咽(cytopharynx)：連接在胞口的后端，略呈彎曲的管狀，背側(cè)有許多縱列而密集的纖毛，不停的劃動而呈波動膜。第26頁，共43頁。(7) 食物泡(food vacuole)：為充滿體內(nèi)大小不等的圓形泡，自蓋玻片邊緣加一滴中國墨汁或中性紅等喂草履蟲，可觀

10、察到黑色或紅色食物泡在蟲體內(nèi)形成過程和食物泡隨原生質(zhì)流動的情況及消化過程。第27頁，共43頁。(8) 伸縮泡(contractile vacuole)：二個，位置靠近兩端，呈透明的圓形泡，每個伸縮泡周圍有611個放射管，可注意觀察前后二個伸縮泡之間的關(guān)系，以及伸縮泡和放射管之間的關(guān)系。第28頁，共43頁。(9) 胞肛(cyoproct)：位于口溝一側(cè)的下端，只有在蟲體排泄廢物時，才能見到。(10) 細胞核(nucleus)：大核(macronucleus)一個，位于蟲體的中部，呈腎形；小核(micronucleus)一個，位于大核的凹陷處。(11) 刺絲泡(trichocyst)：位于表膜周圍

11、的外質(zhì)內(nèi)，呈透明的棒狀體，自蓋玻片邊緣加黑墨水或1醋酸一滴，可以很快看到許多刺絲的放射狀，如亂發(fā)。第29頁，共43頁。草履蟲受藍墨水刺激后釋放出刺絲第30頁，共43頁。3 草履蟲的趨性在載玻片上分別滴二滴培養(yǎng)液，其間用解剖針劃一橋溝通，將其中一滴加入少量氯化鈉(約0.5)，觀察草履蟲趨向何方。第31頁，共43頁。C 綠眼蟲取一滴綠眼蟲培養(yǎng)液于載玻片上，蓋上蓋玻片，顯微鏡觀察其形態(tài)(光線不要太強)。第32頁，共43頁。(1) 體形：綠色，呈紡錘形， 一般前端鈍圓，后端較尖。體外表為表膜。(2) 眼點(stigma)： 體前端的紅色小點。眼點有何功能？第33頁，共43頁。(3) 儲蓄泡(reser

12、voir)、胞口和伸縮泡 儲蓄泡為眼點旁無色透明的泡狀物；對外開口為胞口；伸縮泡是位于儲蓄泡周圍的小泡，二者相通。第34頁，共43頁。(4) 鞭毛(flagellum)：身體前端的一根絲狀物。觀察運動緩慢的眼蟲，注意它的擺動。(5) 細胞核： 圓形，位于體中部或后端。用核染色劑染色后成淡綠色。(6) 色素體(chromatoplast)和副淀粉粒(paramylum granule)： 色素體為卵圓形綠色小體。淀粉粒為散布在體內(nèi)的閃光小點，如用碘液可染成藍黑色。第35頁，共43頁。Fig. Typical Mastigophoran Euglena gracilis第36頁，共43頁。(三) 示范1 草履蟲的生殖無性生殖：觀察草履蟲橫分裂的裝片，注意觀察大小核的分裂情況。有性生殖：觀察草履蟲接合生殖的裝片，注意觀察二蟲在何處接合。第37頁，共43頁。2. 棘尾蟲(Stylonychia)生活于淡水或咸水中、體橢圓形，腹面平，背面凸，有許多邊緣棘毛，三根尾棘毛。生活時可用棘毛在底層爬行。第38頁，共43頁。3喇叭蟲(Stentor)生活于淡水池沼中，體形較大，能伸縮，伸展時蟲體呈喇叭形，口緣小膜帶的纖毛發(fā)達，伸縮泡在前端的左側(cè)。第39頁，共43頁。4鐘形蟲(Vorticella)生活于淡水或咸水中，體形似鐘，纖毛只限于口緣