1、關(guān)于細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本的采集運(yùn)送與處理第一張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月內(nèi)容簡介細(xì)菌培養(yǎng)基本原則常見臨床標(biāo)本的采集、運(yùn)送與處理第二張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)菌檢驗(yàn)從正確取材開始正確的采集、運(yùn)送與處理細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本是臨床細(xì)菌檢驗(yàn)成功的關(guān)鍵。沒有好質(zhì)量的標(biāo)本，實(shí)驗(yàn)室采取任何先進(jìn)的分離、鑒定和藥敏技術(shù)都是無濟(jì)于事的,并有可能誤導(dǎo)臨床醫(yī)生。微生物學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化首先應(yīng)從標(biāo)本采取,運(yùn)送和處理的規(guī)范化開始。細(xì)菌室工作人員、臨床醫(yī)生和護(hù)士必須明白保證標(biāo)本質(zhì)量的重要性。第三張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本采集的普遍原則避免自身菌群的污染，只要可能的話，應(yīng)該確定一個代表感染過程

2、的標(biāo)本。選擇正確的解剖部位，采用適當(dāng)?shù)募夹g(shù)和設(shè)備采集標(biāo)本。選擇合適的部位采集用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本。收集標(biāo)本量要足夠，量少可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。每份標(biāo)本上注明姓名，標(biāo)本來源，采集部位，時(shí)間和日期。將標(biāo)本放在設(shè)計(jì)用于提高可能病原體的生存、無漏、無菌、無潛在安全性問題的容器內(nèi)。第四張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)的原則所有標(biāo)本必須立即送交實(shí)驗(yàn)室，最好不要超過2小時(shí)，如標(biāo)本處理不得不延遲，應(yīng)在合適的條件下儲存，但不超過24小時(shí)。對環(huán)境敏感的微生物包括志賀氏菌（應(yīng)立即處理）、淋球菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌（對低溫敏感）。腦脊液、生殖器、眼或內(nèi)耳標(biāo)本不要冷凍。第五張，PPT共四十九頁，

3、創(chuàng)作于2022年6月哪些情況需要使用運(yùn)送培養(yǎng)基?在病人家里采集的標(biāo)本外檢標(biāo)本標(biāo)本從醫(yī)院送實(shí)驗(yàn)室過程第六張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月運(yùn)送培養(yǎng)基原則運(yùn)送所有細(xì)菌 需氧菌、厭氧菌、苛氧菌細(xì)菌不生長 非營養(yǎng)培養(yǎng)基保持細(xì)菌存活: 標(biāo)本采集后超過24 h不應(yīng)增加或減少活菌數(shù)量第七張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本的拒絕接收原則未貼或錯貼標(biāo)簽送檢延遲不正確的轉(zhuǎn)運(yùn)溫度和轉(zhuǎn)運(yùn)工具不合適或泄漏的容器有明顯污染的標(biāo)本干涸的拭子標(biāo)本標(biāo)本量不足同一天內(nèi)同一個檢測條件的重復(fù)標(biāo)本（血培養(yǎng)除外）第八張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月問題標(biāo)本的處理與送檢醫(yī)生或護(hù)士聯(lián)系。對非損傷方法取得的標(biāo)本，

4、再送新標(biāo)本。對經(jīng)損傷程序取得的標(biāo)本，和臨床聯(lián)系后可以處理，但要在申請單上注明問題。特殊情況下，即使標(biāo)本質(zhì)量有損害，也必須處理。疑難病癥罕見病例傳染性疾病的會診第九張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月血液細(xì)菌培養(yǎng)臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血流感染的患者，需做血液細(xì)菌培養(yǎng)以明確病原。及時(shí)、準(zhǔn)確地從患者血液中分離出病原菌，才能正確實(shí)施有效地抗菌治療，從而有助于提高治愈率和降低醫(yī)療費(fèi)用。第十張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月采血時(shí)機(jī)在出現(xiàn)臨床癥狀后應(yīng)盡快抽血作培養(yǎng)，最好在發(fā)熱初期和高峰或寒戰(zhàn)時(shí)。原則上應(yīng)選擇在抗菌藥物應(yīng)用之前，對已應(yīng)用藥物而病情不允許停藥的患者也應(yīng)在下一次用藥前采血

5、。第十一張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月采血部位通常采血部位為肘靜脈。疑似細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí)，以肘動脈或股動脈采血為宜。多次采血時(shí), 應(yīng)在不同部位進(jìn)行。不要從血管插管內(nèi)采血。切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取 血標(biāo)本。第十二張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月采血次數(shù)與間隔急性感染患者： 從兩臂分別采2份血樣。感染性心內(nèi)膜炎患者: 24h內(nèi)采血3次, 每次間隔不少于30分鐘。發(fā)熱原因不明患者: 24-48h后可再采血2次,間隔不少于60分鐘。第十三張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月采血方法采血部位的局部皮膚應(yīng)嚴(yán)格消毒。將采集的血液注入血培養(yǎng)瓶前，應(yīng)更換針頭或過火消毒針頭。血培

6、養(yǎng)瓶口也要消毒，并待酒精揮發(fā)后（建議用酒精燈燒灼瓶口）再注入血樣, 。第十四張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月采血量每次采血量成人510ml，嬰幼兒12ml，培養(yǎng)基與血液之比以10：1為宜，以稀釋血液中的抗生素。每增加1ml血量平均提高陽性率3.2%。第十五張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月抗凝劑0.025-0.05%聚茴香腦磺酸鈉(sodium polyanethol sulfonate, SPS) 。SPS具有抗凝抗吞噬抗補(bǔ)體及拮抗某些抗生素的作用。第十六張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)條件視患者的感染、用藥情況選用不同的培養(yǎng)瓶。真菌培養(yǎng)可和普通培養(yǎng)共用一需氧

7、瓶。不需要每個血培養(yǎng)都作厭氧培養(yǎng)。若同一次抽血既做需氧也做厭氧，應(yīng)先厭氧再需氧。黃色小兒瓶藍(lán)色未用抗生素需氧綠色已用抗生素需氧（）紫色未用抗生素厭氧橙色已用抗生素厭氧（）第十七張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月胸腹水及腦脊液標(biāo)本采集: 以無菌操作穿刺抽取，直接注入培養(yǎng)瓶內(nèi)。量少注入小兒瓶，量多的注入成人瓶。運(yùn)送: 若床邊沒有接種，用帶蓋的無菌容器送檢。第十八張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月血液和無菌體液的處理血液或無菌體液抽取后應(yīng)立即放入血培養(yǎng)瓶,立即送檢或室溫保存,不能放冰箱!實(shí)驗(yàn)室接到標(biāo)本應(yīng)立即放入血培養(yǎng)儀。中夜班收到標(biāo)本放置室溫,不用放置35溫箱 。對急診室送來或室溫久

8、置的標(biāo)本，應(yīng)先檢查瓶底有無變化，如變黃，應(yīng)先涂片并盲傳，以防漏檢。第十九張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月尿液標(biāo)本標(biāo)本采集時(shí)間:應(yīng)在用藥前或停藥5天后留取標(biāo)本以晨起第一次尿?yàn)橐耸鼓蛞涸诎螂變?nèi)停留6-8h以上(給細(xì)菌足夠的繁殖時(shí)間)。第二十張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月尿液標(biāo)本采集方法中段尿：女性采樣前應(yīng)先用肥皂水或0.1%高錳酸鉀溶液沖洗外陰部及尿道口。男性須翻轉(zhuǎn)包皮沖洗，用0.1%新潔爾滅消毒尿道口，滅菌紗布擦干。棄前段尿，無菌杯收集中段尿。 導(dǎo)尿管導(dǎo)尿無菌操作進(jìn)行導(dǎo)尿可減少尿道污染。對留置導(dǎo)尿者，可用碘酒消毒尿道口處的導(dǎo)尿管壁，用聯(lián)空針筒的細(xì)針斜穿管壁抽吸尿液；或拔去閉

9、式引流的集尿袋，棄去導(dǎo)尿管前段尿液，留無污染的膀胱內(nèi)尿液數(shù)毫升送檢。不可從集尿袋的下端管口留取標(biāo)本。長期留置導(dǎo)尿管者，應(yīng)在更換新導(dǎo)尿管后留取尿標(biāo)本 。第二十一張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月尿液標(biāo)本采集方法膀胱穿刺法: 是收集尿液的最好方法, 尤其對厭氧菌檢查,但由于是侵入損傷性操作,臨床常少用,收集的標(biāo)本可直接注入血培養(yǎng)瓶中。腎盂尿采集法: 應(yīng)請泌尿科醫(yī)生采取, 左右側(cè)的標(biāo)本要標(biāo)明,收集的標(biāo)本可直接注入血培養(yǎng)瓶中。第二十二張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月尿液標(biāo)本運(yùn)送和保存無菌杯立即送檢室溫下尿標(biāo)本擔(dān)擱稍久可導(dǎo)致尿內(nèi)細(xì)菌數(shù)量明顯增加而影響病原菌與污染菌的區(qū)分和細(xì)菌定量。不能

10、立即送檢者，可暫存4冰箱。第二十三張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月尿液標(biāo)本處理2小時(shí)內(nèi)處理完畢培養(yǎng)基：血瓊脂和麥康凱瓊脂。接種方法：10ul接種環(huán)垂直插入充分混勻的樣品中取一環(huán)尿液，劃線方法為從上到下劃一條直線，再畫一條垂直線，反復(fù)劃線呈棋盤狀。35培養(yǎng)18-24h，觀察結(jié)果。 第二十四張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十五張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月呼吸道標(biāo)本標(biāo)本留取質(zhì)量的好壞直接影響到對下呼吸道病原學(xué)的診斷。標(biāo)本留取不當(dāng)會導(dǎo)致抗菌治療失敗,以及造成耐藥菌的出現(xiàn)。第二十六張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本采集時(shí)間痰液：以晨痰為好。多數(shù)患者晨痰較

11、多，即使對痰量少的患者，也以清晨采集最為容易。對支氣管擴(kuò)張癥或與支氣管相通的肺空洞患者，清晨起床后進(jìn)行體位引流，可采集大量痰液。最好在應(yīng)用抗菌藥物之前或停藥1天后采集標(biāo)本。鼻咽拭子 ： 應(yīng)于抗菌藥物治療前采集為好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集為宜。 第二十七張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月痰標(biāo)本采集方法自然咳痰：清水反復(fù)漱口后用力咳痰，從呼吸道深部咳出新鮮痰液于無菌容器送檢。痰量極少者可用4510%氯化鈉溶液霧化吸入導(dǎo)痰。氣管穿刺法: 適用于昏迷和咳嗽乏力患者。纖維支氣管鏡抽取法: 適用于纖維支氣管鏡檢查或治療的患者。用纖維支氣管鏡可直接在病灶部位采集高濃度的感染病原

12、菌，但不能完全避免咽喉部正常菌群感染。小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒因壓舌刺激咳嗽時(shí)，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，從而獲得標(biāo)本。雙側(cè)肺部感染伴人工氣道如氣管切開或氣管插管患者，可用吸痰管經(jīng)人工氣道估插至葉支氣管水平吸引痰液。第二十八張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月痰標(biāo)本運(yùn)送和保存從病人留痰后應(yīng)在1h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室不能及時(shí)送檢者，可暫存4冰箱。室溫下?lián)鷶R數(shù)小時(shí)定植于口咽部的非致病菌呈過度生長而肺炎鏈球菌、葡萄球菌和流感嗜血桿菌檢出率明顯降低未用運(yùn)送培養(yǎng)基的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后應(yīng)在30分鐘內(nèi)接種到相應(yīng)培養(yǎng)基第二十九張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月痰標(biāo)本的

13、處理培養(yǎng)前的處理：痰液的洗凈：痰液含有許多正常菌群而影響病原菌檢出?？捎?0-20ml無菌生理鹽水洗兩三次，最后將剩余的膿痰繼續(xù)處理。痰液的均質(zhì)化：向痰液內(nèi)加等量約pH7.6的10g/L胰酶溶液，放置3590min，即能使痰液均質(zhì)化，而對細(xì)菌培養(yǎng)無明顯影響。第三十張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月痰標(biāo)本的處理判斷標(biāo)本是否合格洗過的痰液革蘭染色后用低倍鏡檢鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)量鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)10/lp，則要求重新留取標(biāo)本，不宜做培養(yǎng)；證實(shí)標(biāo)本來自下呼吸道后，用油鏡觀察細(xì)菌的著色、形態(tài)及排列，做出初步病原學(xué)診斷。發(fā)現(xiàn)任何白細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌，均須報(bào)告。第三十一張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月

14、痰標(biāo)本的處理培養(yǎng)基：血瓊脂、麥康凱瓊脂、嗜血桿菌巧克力瓊脂和沙保弱瓊脂。劃線方法：分四區(qū)劃線，每次劃下一區(qū)前都要燒灼接種環(huán)，待冷卻后再劃。下一區(qū)與上一區(qū)要相交4-6次。355%-10%二氧化碳中培養(yǎng)24-48h。第三十二張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十三張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月咽拭子及口腔拭子采集前患者應(yīng)用冷開水反復(fù)漱口，拭子的選擇：要求無菌、不含抑制劑；預(yù)先沾濕拭子（非常重要）；由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子通過舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)，涂抹數(shù)次以取得標(biāo)本。對化膿性扁桃體炎或口腔念珠菌病，直取病灶部位，拭子要避免接觸口腔及舌粘膜。減少污染

15、。立即送檢。室溫保存。接種同痰第三十四張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十五張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月保護(hù)性毛刷標(biāo)本的處理取完后加入1ml無菌生理鹽水立即送檢。震蕩、離心、涂片染色。接種培養(yǎng)基同痰接種劃線方法同尿培養(yǎng)第三十六張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月糞便培養(yǎng)社區(qū)感染標(biāo)本：社區(qū)感染性腹瀉，多由志賀菌、沙門菌、弧菌、耶爾森菌等腸道致病菌感染所引起。將標(biāo)本接種在相應(yīng)的選擇性分離培養(yǎng)基上即可，弧菌、耶爾森菌應(yīng)先增菌后培養(yǎng)以提高檢出率。住院患者腹瀉標(biāo)本：多為大量使用廣譜抗生素后導(dǎo)致菌群失調(diào)引起。住院超過3天或入院診斷不是腸胃炎的不做常規(guī)糞便培養(yǎng)。應(yīng)考慮梭狀芽胞

16、桿菌培養(yǎng)或毒素測定。常見病原菌有艱難梭菌、彎曲菌、葡萄球菌、腸球菌、念珠菌等。選擇培養(yǎng)基應(yīng)根據(jù)涂片結(jié)果而定。第三十七張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月糞便標(biāo)本采集應(yīng)在發(fā)病早期并且盡量在用抗生素治療前采集。排便后，挑取有膿血、黏液部分的糞便（液狀糞便則取絮狀物），稀便不少于1ml，固體便不少于1克，無便患者可用直腸拭子。對不易獲取糞便者或嬰幼兒，可用肛拭采集。將拭子前端用無菌甘油水濕潤。然后插入肛門約45cm（幼兒約23cm）處，輕輕旋轉(zhuǎn)擦取直腸表面黏液后退出，置運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。除嬰兒和有活動性腹瀉癥狀的患者外不推薦用拭子做常規(guī)病源檢查。第三十八張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6

17、月糞便標(biāo)本運(yùn)送卡波氏管：普通培養(yǎng)堿性蛋白胨水：霍亂弧菌培養(yǎng)難辨梭菌培養(yǎng)：及時(shí)送檢，用厭氧輸送培養(yǎng)基。第三十九張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月糞便標(biāo)本處理普通培養(yǎng)MAC、SS、10%綿羊血的彎曲桿菌培養(yǎng)基（暫無)四區(qū)劃線（同痰標(biāo)本）MAC、SS 35培養(yǎng)10%綿羊血的彎曲桿菌培養(yǎng)基42 5%-10%二氧化碳培養(yǎng)霍亂弧菌培養(yǎng)：記錄收到標(biāo)本時(shí)間和病人電話堿性蛋白胨水35培養(yǎng)6-8小時(shí)后轉(zhuǎn)種4號平板（四區(qū)劃線）繼續(xù)35 培養(yǎng)第四十張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月生殖道、尿道標(biāo)本采集男性患者:尿道標(biāo)本:2h不排尿清洗龜頭后,用碘伏等消毒后,擠出分泌物或以專用細(xì)拭子插入尿道口1-2cm

18、旋轉(zhuǎn)采取分泌物立即送檢。前列腺液標(biāo)本: 應(yīng)由醫(yī)師按摩前列腺,以無菌操做自尿道口采取前列腺液放在無菌杯內(nèi)送檢。第四十一張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月生殖道、尿道標(biāo)本采集女性患者: 成年患者: 應(yīng)在擴(kuò)陰器的支持下,以無菌棉拭子擦去分泌物，再用新的無菌拭子緊貼宮頸內(nèi)道采樣送檢。未成年患者: 不應(yīng)使用擴(kuò)陰器, 應(yīng)以無菌拭子在陰道口處采取分泌物送檢。尿道：2h不排尿，拭去尿道口滲出物，再插入尿道口1-2cm旋轉(zhuǎn)采取分泌物立即送檢。第四十二張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月生殖道、尿道標(biāo)本處理立即送檢普通培養(yǎng)和淋球菌培養(yǎng)：室溫支原體、衣原體：4保存第四十三張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月生殖道標(biāo)本處理普通培養(yǎng)：血瓊脂三區(qū)劃線35培養(yǎng)淋球菌