1、高中生物選修三動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體第1頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四 回憶已學(xué)知識(shí)，你是否已經(jīng)見到過動(dòng)物細(xì)胞融合的實(shí)例？人-鼠(想像圖)第2頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 第3頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四鼠細(xì)胞人細(xì)胞人工誘導(dǎo)一、動(dòng)物細(xì)胞融合雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合（技術(shù)）：是指（在一定的條件下）兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。1、概念：第4頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四2、誘導(dǎo)融合的因素化學(xué)法：聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)融合. 物理法：電激融合生物法：滅活的病毒誘

2、導(dǎo)融合.病毒顆粒黏 附細(xì)胞表面細(xì)胞膜連接細(xì)胞膜被 病毒顆粒穿通細(xì)胞融合、形成雜種細(xì)胞 為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑？滅活喪失感染性但保留融合活性第5頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四獲得雜種植株物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振蕩、電激）化學(xué)（聚乙二醇）直接誘導(dǎo)細(xì)胞融合去壁原生質(zhì)體融合誘導(dǎo)新壁雜種植株細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性結(jié)果誘導(dǎo)方法步驟融合的原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較獲得雜交細(xì)胞小結(jié)第6頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四3、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用第7頁，共25頁，2022年，5月20日，11

3、點(diǎn)1分，星期四問題：抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？其化學(xué)本質(zhì)是什么？與抗原作用的特點(diǎn)？主要分布在哪里？二、單克隆抗體的制備第8頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法：從血清中分離抗體 該法制備抗體的特點(diǎn)： 產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差。多種漿細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)多種抗體抗原 第9頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四提示：每一個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)的抗體。 如果利用單個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖（克?。?，形成細(xì)胞群，這樣的細(xì)胞群就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體單克隆抗體。問題： 怎樣獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體呢？

4、第10頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四材料：效應(yīng)B細(xì)胞在體內(nèi)只能由B淋巴細(xì)胞增殖、分化而來,不再進(jìn)行分裂,在體外培養(yǎng)的條件下，也很難分裂。 思考：用什么方法才能讓B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖?第11頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體 既能產(chǎn)生特異性抗體， 又能大量繁殖的細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖 +一個(gè)漿細(xì)胞只分泌一種特異性抗體設(shè)計(jì)方案：米爾斯坦科勒第12頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四讀下面一段文字資料，找出單克隆抗體的概念 人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的

5、過程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，即克隆。單克隆抗體的概念單: 單個(gè)細(xì)胞 克隆: 無性繁殖單克隆抗體:單個(gè)細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一特異性強(qiáng)的抗體第13頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四單克隆抗體的制備問題思考Q1Q2細(xì)胞兩兩融合后，有哪些類型？B-B;B-瘤;瘤-瘤哪種是需要的類型，要篩選嗎？第14頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合

6、成途徑，但一般不分裂增殖。 鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑，沒有S途徑，可是能不斷分裂增殖。 你想到篩選雜交瘤細(xì)胞的方案了么？ 小資料：第15頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四單克隆抗體的制備問題思考Question經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞群進(jìn)行克隆是否就得到產(chǎn)生純度高的抗體？還需怎么辦？第16頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四有限稀釋法稀釋多次稀釋 對能產(chǎn)生特異性抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆，即單細(xì)胞克隆。 由它產(chǎn)生的抗體，即單克隆抗體。將培養(yǎng)皿孔內(nèi)的上清液取出，檢測抗體。多孔細(xì)胞培養(yǎng)板第17頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四

7、單克隆抗體雜交 細(xì)胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細(xì)胞第一次篩選用特定的選擇培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體4.單抗制備過程中應(yīng)用了那些技術(shù)？動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.此過程中至少進(jìn)行了幾次篩選？目的相同嗎？3.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)？特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備。2.最終從哪兒提取單克隆抗體？第18頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四（1）作為診斷試劑最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡易、快速（如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）三、單克隆抗體的應(yīng)用第19頁，共25頁，2022年，5月20日

8、，11點(diǎn)1分，星期四（2）治療疾病和運(yùn)載藥物生物導(dǎo)彈 = 單克隆抗體 + 藥物（治療腫瘤）(“生物導(dǎo)彈” 單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭)單克隆抗體的應(yīng)用療效高、副作用小第20頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（ ） A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D.沒經(jīng)過免疫的淋巴細(xì)胞A鞏固練習(xí)2.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同 B.所用的技術(shù)手段基本相同 C. 操作步驟基本相同 D. 都能形成雜種細(xì)

9、胞 D第21頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四3. 單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是（ ）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合 B.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 C.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 D.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 D4.只能使動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法是（ ）APEG B滅活的病毒 C電刺激 D離心B第22頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四5. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是 （ ）淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞A. B.C. D. C6.“生物導(dǎo)彈”是指 （ ）A.單克隆抗體 B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞 D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物 D第23頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四單克隆抗體的制備第24頁，共25頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)1分，星期四有夢想，才會(huì)有創(chuàng)