1、結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究 結(jié)直腸癌c-erbB-2、CD44v6 及nm23表達(dá) 與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究 碩士研究生 張 建 兵 導(dǎo) 師 陳莉教授 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究2 結(jié)直腸癌c-erbB-2、CD44v6 及nm23表達(dá)結(jié)引言結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究3引言結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究3 腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是當(dāng)今腫瘤治療最棘手的問題之一。據(jù)統(tǒng)計，有90%以上的癌癥病人死于腫瘤的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。研究腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的分子基礎(chǔ)及其與癌基因及抑癌基因的關(guān)系，已成為目前腫瘤防

2、治研究的熱點問題。真核細(xì)胞增殖調(diào)控是一個多因素、多環(huán)節(jié)、涉及到細(xì)胞內(nèi)眾多分子事件的復(fù)雜過程。在細(xì)胞增殖調(diào)控中，大多數(shù)癌基因是促進(jìn)與發(fā)揮正調(diào)作用，而抑癌基因則是抑制與負(fù)調(diào)作用。它們在正常細(xì)胞中可能有調(diào)節(jié)細(xì)胞正常生長、抑制腫瘤形成的作用，它們的失活或缺失會導(dǎo)致細(xì)胞增殖失控或癌變。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究4結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究4 癌基因c-erbB-2又稱為neu 或 HER-2。c-erbB-2編碼分子量為185ku 的穿膜蛋白，與表皮生長因子受體（EGFR）同源，該蛋白可以抑制酪氨酸激酶活性，c-erbB-2過度表達(dá)和擴增可見于多種腫瘤。已有很多研究表

3、明，乳腺癌c-erbB-2的高水平表達(dá)常常與較大的原發(fā)瘤體積、較多的腋下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及較差的內(nèi)分泌治療反應(yīng)性有關(guān)，預(yù)示著更早、更多的術(shù)后復(fù)發(fā)及較短的生存期1，2。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究5 癌基因c-erbB-2又稱為neu 或 HE 粘附分子CD44是淋巴細(xì)胞的一種歸巢受體，為高度異質(zhì)性的單鏈跨膜糖蛋白，參與細(xì)胞與細(xì)胞間、細(xì)胞與基質(zhì)間的粘連，有標(biāo)準(zhǔn)型（CD44s）和變異型（CD44V）兩型。據(jù)報道，其變異體CD44v6 過表達(dá)與結(jié)直腸癌的侵襲能力有關(guān)3，4。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究6 粘附分子CD44是淋巴細(xì)胞的一種歸巢受體，為高度異核苷二磷酸激酶（ND

4、PK/ nm23）屬NME基因家族，被認(rèn)為參與了同惡性腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的多種調(diào)節(jié)活動。nm23異常改變一方面可引起微管聚合而成的紡錘體異常，導(dǎo)致非整倍體形成；另一方面可通過細(xì)胞骨架及細(xì)胞素等信號反應(yīng)性的改變引起細(xì)胞運動，從而參與侵襲和轉(zhuǎn)移過程。研究發(fā)現(xiàn)嚙齒動物實驗性腫瘤的轉(zhuǎn)移能力與nm23基因的表達(dá)呈密切負(fù)相關(guān)5，Bertheau 等6在甲狀腺惡性腫瘤中研究證實nm23及基因產(chǎn)物的表達(dá)與腫瘤的轉(zhuǎn)移和預(yù)后相關(guān)密集，nm23的mRNA 下調(diào)與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和低生存率有關(guān)。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究7核苷二磷酸激酶（NDPK/ nm23）屬NME基因家族，被認(rèn)結(jié)直腸癌（colorec

5、tal carcinoma）是人類常見惡性腫瘤之一，對人類的健康構(gòu)成了極大威脅。近年來對結(jié)直腸癌相關(guān)基因產(chǎn)物的檢測已逐步和早期診斷、發(fā)病機制、病理特征、估計預(yù)后等密切聯(lián)系起來，但研究結(jié)果不盡一致7-10。目前分子病理學(xué)研究認(rèn)為，結(jié)直腸癌的發(fā)生是個多階段、多因素作用的過程，主要是由于癌基因激活、抑癌基因及DNA修復(fù)基因突變或功能缺失所致。我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法同時檢測結(jié)直腸癌中癌基因蛋白c-erbB-2、CD44v6及nm23的表達(dá)，并探討其與病理特征和臨床預(yù)后的相關(guān)性。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究8結(jié)直腸癌（colorectal carcinoma）是人類材料和方法結(jié)直腸癌表

6、達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究9材料和方法結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究91.1材料1.1.1臨床資料： 92例結(jié)直腸癌： 28例：有十年以上隨訪結(jié)果 64例：無隨訪結(jié)果以上病例均為結(jié)直腸原發(fā)性腺癌，不含腺瘤癌變的病例，都只作了結(jié)直腸癌根治手術(shù)，未作化療、放療等輔助治療。男性49例，女性43例，年齡2475歲（中位55歲）。結(jié)腸癌27例，直腸癌65例。根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟（UICC）的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)11（見表1）作臨床分期：期19例，期28例，期37例，期8例。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究101.1材料結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究10表1 UICC

7、結(jié)直腸癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)A.TNM定義 分期 描述原發(fā)腫瘤（T） Tx 原發(fā)腫瘤資料不詳 T0 原發(fā)灶不能確定 Tis 原位癌 T1 腫瘤侵入粘膜下層 T2 腫瘤侵入肌層 . T3 腫瘤穿過肌層到漿膜下或至無腹膜的結(jié)腸周圍或直腸周圍組織 T4 腫瘤穿過臟層腹膜或直接侵入其它器官組織結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究11表1 UICC結(jié)直腸癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)A.TNM定表1 UICC結(jié)直腸癌分期A.TNM定義 分期 描述區(qū)域淋巴結(jié)（N） Nx 區(qū)域淋巴結(jié)資料不詳 No 無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 N1 腫瘤轉(zhuǎn)移至13個結(jié)腸（直腸）周圍淋巴結(jié) N2 腫瘤轉(zhuǎn)移至4個結(jié)腸（直腸）周圍淋巴結(jié) N3 腫瘤轉(zhuǎn)移至主

8、要血管沿途的任何淋巴結(jié)結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究12表1 UICC結(jié)直腸癌分期A.TNM定義 分期 表1 UICC結(jié)直腸癌分期A.TNM定義 分期 描述遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（M） Mx 不能確定有無轉(zhuǎn)移 M0 無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 M1 有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究13表1 UICC結(jié)直腸癌分期A.TNM定義 分期表1 UICC結(jié)直腸癌分期B. 分期標(biāo)準(zhǔn) 期別 T N M 0 Tis N0 M0 T1 ,T2 N0 M0 T3,T4 0 0 ny 1,2,3 0 ny ny 1 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究14表1 UICC結(jié)直腸癌分期B. 分期標(biāo)準(zhǔn) 1

9、.1.2病理資料：92例結(jié)直腸癌中，高分化腺癌16例，中分化腺癌45例，低分化腺癌21例，粘液腺癌10例。對全部病例觀察了鏡下腫瘤生長方式（推進(jìn)式為主34例，圖1；浸潤性為主58例，圖2）以及瘤周淋巴樣細(xì)胞聚集情況（21例見有大量淋巴樣細(xì)胞浸潤，圖3；71例無大量淋巴樣細(xì)胞浸潤，圖2）。 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究151.1.2病理資料：結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究16結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究16結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究17結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究17結(jié)直腸癌表

10、達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究18結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究181.1.3主要試劑及實驗材料： c-erbB-2 單克隆抗體（克隆系TAB250），工作濃度1：100；CD44v6單克隆抗體（克隆系2F10）, 工作濃度1：100；nm23單克隆抗體（克隆系M-0421），工作濃度1：80?？乖迯?fù)液為0.01M、PH6.0 枸櫞酸鹽緩沖液，DAB顯色。以上試劑、二抗及SP試劑盒均為DAKO公司產(chǎn)品。免疫標(biāo)記陽性對照組織來自乳腺癌、胃癌。 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究191.1.3主要試劑及實驗材料：結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù) 1.2 方法 1. 2.

11、1 標(biāo)本及玻片的處理：所有標(biāo)本經(jīng)10%中性甲醛固定，石蠟包埋，34m連續(xù)切片。每例選取四張切片貼于經(jīng)多聚賴氨酸處理的玻片上，70 oC烘烤2小時，1張進(jìn)行HE染色，其余3張進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究20 1.2 方法結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究21.2.2 HE染色：主要步驟： 石蠟切片 脫蠟 梯度乙醇水化 蘇木素染色 鹽酸乙醇分化 返藍(lán) 伊紅染色 梯度乙醇脫水 透明 封固 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究211.2.2 HE染色：主要步驟：結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特1.2.3 c-erbB-2、CD44v6及 nm23免疫組

12、織化學(xué)染色： 主要步驟：石臘切片脫蠟至水 去內(nèi)源性酶抗原修復(fù)（高壓鍋煮沸放氣3分鐘,nm23不需） 一抗 二抗 SP復(fù)合物 DAB顯色 水洗，蘇木素復(fù)染，封片。 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究221.2.3 c-erbB-2、CD44v6及 nm21.1.2.4 免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果分析方法： c-erbB-2、CD44v6 陽性定位在細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒，nm23陽性定位在細(xì)胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒。著色細(xì)胞10%為陰性，10%為陽性。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究231.1.2.4 免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果分析方法：結(jié)直腸癌表達(dá)1.2.5 統(tǒng)計學(xué)處理方法： 運用Stata

13、 7.0統(tǒng)計軟件（美國計算機資源中心研制）進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。不同組間表達(dá)率的比較采用Fisher精確檢驗；對有隨訪結(jié)果的病例用Cox比例風(fēng)險模型進(jìn)行單因素和多因素生存分析，并對有預(yù)后意義的指標(biāo)作出Kaplan-Meier生存曲線。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究241.2.5 統(tǒng)計學(xué)處理方法： 運用Stata 7.結(jié)果結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究25結(jié)果結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究252.1 結(jié)直腸癌癌基因蛋白表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 92例結(jié)直腸癌中，44例c-erbB-2陽性（圖4、5），陽性率47.8%；51例CD44v6陽性（圖6、7），陽性率

14、55.4%；39例nm23陽性（圖8、9），陽性率42.4%。c-erbB-2、CD44v6及nm23表達(dá)與組織分型、UICC分期、腫瘤生長方式及瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤的關(guān)系見表2。 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究262.1 結(jié)直腸癌癌基因蛋白表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系結(jié)直腸癌表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N C-erbB-2 陰性 陽性 陽性率% 組織類型高分化腺癌 16 10 6 37.5 中分化腺癌 45 23 22 48.9低分化腺癌 21 9 12 57.1粘液腺癌 10 6 4 40.0 p=0.658 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病

15、理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究27表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N CD44V6 陰性 陽性 陽性率% 組織類型高分化腺癌 16 8 8 50.0中分化腺癌 45 21 24 53.3低分化腺癌 21 7 14 66.7粘液腺癌 10 5 5 50.0 p=0.696 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究28表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N nm23 陰性 陽性 陽性率% 組織類型高

16、分化腺癌 16 9 7 43.8中分化腺癌 45 27 18 40.0低分化腺癌 21 13 8 38.1 粘液腺癌 10 4 6 60.0 p=0.690 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究29表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N C-erbB-2 陰性 陽性 陽性率% UICC分期 、期 47 31 16 34.0 期 37 15 22 59.5期 8 2 6 75.0 p=0.018* 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究30表2 C-erbB-2、CD44v6、nm2

17、3表達(dá)與結(jié)直表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N CD44V6 陰性 陽性 陽性率% UICC分期 、期 47 28 19 40.4 期 37 10 27 73.0期 8 3 5 62.5 p=0.009* 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究31表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N nm23 陰性 陽性 陽性率% UICC分期 、期 47 29 18 38.3期 37 18 19 51.4期 8 6 2 25.0 p=0.300 結(jié)直腸癌

18、表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究32表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N C-erbB-2 陰性 陽性 陽性率% 腫瘤生長方式 推進(jìn)式為主 34 21 13 38.2 浸潤性為主 58 27 31 53.4 p=0.197 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究33表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N CD44V6 陰性 陽性 陽性率% 腫瘤生長方式 推進(jìn)式為主 34 17 17 5

19、0.0浸潤性為主 58 24 34 58.6 p=0.516 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究34表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N nm23 陰性 陽性 陽性率% 腫瘤生長方式 推進(jìn)式為主 34 23 11 32.4浸潤性為主 58 30 28 48.3 p=0.190 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究35表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N C-erbB-2 陰性

20、 陽性 陽性率% 瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤有大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 21 16 5 23.8 無大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 71 32 39 54.9 p=0.014* 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究36表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N CD44V6 陰性 陽性 陽性率% 瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤有大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 21 13 8 38.1無大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 71 28 43 60.6 p=0.084 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究37表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23

21、表達(dá)與結(jié)直表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N nm23 陰性 陽性 陽性率% 瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤有大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 21 11 10 47.6無大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 71 42 29 40.8 p=0.622注：p為Fisher精確檢驗值 * 示P0.05 *示P0.01 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究38表2 C-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)與結(jié)直 由表2可見，c-erbB-2表達(dá)與UICC分期及瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤有關(guān)（P0.05），而與組織分型及腫瘤生長方式無明顯關(guān)系。CD44v6表達(dá)與UICC分期有關(guān)（P0.01）

22、，而與其余參數(shù)無關(guān)。nm23表達(dá)與上述各項參數(shù)間均無明顯關(guān)系。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究39 由表2可見，c-erbB-2表達(dá)與UICC分期及瘤周淋巴樣2.2 結(jié)直腸癌的單因素和多因素生存關(guān)系分析隨訪十年以上的28例結(jié)直腸癌臨床病理特征、癌基因蛋白表達(dá)與隨訪結(jié)果見表3。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究402.2 結(jié)直腸癌的單因素和多因素生存關(guān)系分析結(jié)直腸癌表達(dá)與表3 28例結(jié)直腸癌臨床病理特征、癌基因蛋白表達(dá)與生存資料 生存時間（例） 5年（%） 510年（%）10年（%）組織類型高、中分化腺癌（20） 3(15.0) 10(50.0) 7(35.0)低分化、粘液

23、 腺癌（8） 6(75.0) 2(25.0) 0UICC分期 、期（17） 2(11.8) 8(47.0) 7(41.2) 、期（11） 7(63.6) 4(36.4) 0 腫瘤生長方式 推進(jìn)式（10） 2(20.0) 3(30.0) 5(50.0) 浸潤性（18） 7(38.9) 9(50.0)2(11.1) 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究41表3 28例結(jié)直腸癌臨床病理特征、癌基因蛋白表達(dá)與生存資表3 28例結(jié)直腸癌臨床病理特征、癌基因蛋白表達(dá)與生存資料生存時間（例） 5年（%） 510年（%） 10年（%）瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤 有大量淋巴樣細(xì)胞（6） 0 2(33.3) 4(

24、66.7) 無大量淋巴樣細(xì)胞（22 9(40.9) 10(45.5) 3(13.6) c-erbB-2 (16) 2(12.5) 7(43.75) 7(43.75) (12) 7(58.3) 5(41.7) 0 CD44v6 (14) 4(28.6) 3 (21.4) 7(50.0) (14) 5(35.7) 9(64.3) 0 nm23 (15) 7(46.7) 7(46.7) 1(6.6) (13) 2(15.4) 5(38.5) 6(46.1) 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究42表3 28例結(jié)直腸癌臨床病理特征、癌基因蛋白表達(dá)與生存資 對表3進(jìn)行單因素Cox模型分析，結(jié)果見

25、表4。 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究43 對表3進(jìn)行單因素Cox模型分析，結(jié)果見表4。表4. 結(jié)直腸癌單因素生存分析(Cox比例風(fēng)險模型)結(jié)果 風(fēng)險比 標(biāo)準(zhǔn)誤 z統(tǒng)計量 P值 95可信區(qū)間組織分型 4.316485 2.070272 3.05 0.0021.686075 11.05054UICC分期 6.158393.069948 3.65 0.0002.318166 16.36025 腫瘤生長方式 3.236392 1.677992 2.27 0.023 1.171477 8.941054瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤 5.977281 4.484426 2.38 0.0171.3737

26、06 26.00839c-erbB-2 5.519218 2.756547 3.42 0.0012.073714 14.68947CD44v6 2.576888 1.232054 1.98 0.0481.009535 6.577633nm23 .2552479 .1230412 -2.83 0.005.0992302 .6565691結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究44表4. 結(jié)直腸癌單因素生存分析(Cox比例風(fēng)險模型)結(jié)果 由表4可見，結(jié)直腸癌組織分型、 UICC分期、腫瘤生長方式、瘤周大量淋巴樣細(xì)胞浸潤及c-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)均與預(yù)后有關(guān)（P0.05）。結(jié)

27、直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究45 由表4可見，結(jié)直腸癌組織分型、 UICC分對表3進(jìn)行多因素Cox模型分析結(jié)果見表5 表5. 結(jié)直腸癌多因素生存分析(Cox比例風(fēng)險模型)結(jié)果 風(fēng)險比 標(biāo)準(zhǔn)誤 z統(tǒng)計量 P值 95可信區(qū)間UICC分期 10.88877 6.41264 4.05 0.000 3.43310934.53587c-erbB-2 5.724749 3.2123253.11 0.002 1.90599717.19454nm23 .3072231 .1580824 -2.29 0.022 .1120639 .8422513結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究46對表3

28、進(jìn)行多因素Cox模型分析結(jié)果見表5 表5. 結(jié)直腸癌 由表5可見，只有UICC分期、c-erbB-2和nm23表達(dá)具有獨立的預(yù)后意義（P0.05），即UICC、期，c-erbB-2過表達(dá)及nm23表達(dá)減少與結(jié)直腸癌的不良預(yù)后有關(guān)（圖1a-3a）。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究47 由表5可見，只有UICC分期、c-erb結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究48結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究48結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究49結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究49結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究50結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特

29、征及預(yù)后的相關(guān)性研究50結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究培訓(xùn)課件31 c-erbB-2的表達(dá)及其意義 C-erbB-2 癌基因 位于17號染色體q21區(qū)帶上，與表皮生長因子受體（EGFR）基因具有同源性，編碼具有抑制酪氨酸激酶活性的穿膜蛋白（分子量185ku）。通過分析腫瘤細(xì)胞中c-erbB-2基因在DNA、mRNA或其產(chǎn)物的不同水平上質(zhì)和量的變化與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移表型之間的相關(guān)性，或通過基因轉(zhuǎn)染使轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)移能力的實驗，已證明該基因與一些腫瘤的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移有關(guān)。 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究5231 c-erbB-2的表達(dá)及其意義 C 目前已有較多證據(jù)表明c-e

30、rbB-2基因過表達(dá)與乳腺癌的較差預(yù)后有關(guān)1，2，但有關(guān)該基因與結(jié)直腸癌關(guān)系的研究較少。Yamaguchi等12和Yang等13報道發(fā)生肝轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌c-erbB-2蛋白的陽性率顯著高于無肝轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌。 Nakae等14報道c-erbB-2蛋白的陽性率在Dukes D期顯著高于Dukes A、B、C期。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究53 目前已有較多證據(jù)表明c-erbB-2基因過表達(dá)與乳腺癌本組92例結(jié)直腸癌免疫酶標(biāo)結(jié)果顯示，c-erbB-2陽性率與UICC分期呈正相關(guān)（P0.05）,與瘤周大量淋巴樣細(xì)胞浸潤呈負(fù)相關(guān)（P0.05）,但與組織類型及腫瘤生長方式無明顯相關(guān)性(P

31、0.05)13,15。對有10年以上隨訪資料的28例結(jié)直腸癌研究表明, c-erbB-2陰性者5年生存率(87.5%)明顯高于c-erbB-2陽性者(41.7% ,P0.05)，并且經(jīng)作多因素Cox回歸模型分析提示， c-erbB-2過表達(dá)與結(jié)直腸癌的不良預(yù)后有關(guān)。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究54本組92例結(jié)直腸癌免疫酶標(biāo)結(jié)果顯示，c-erbB-2陽性率與32 CD44v6的表達(dá)及其意義 CD44是分布極為廣泛的細(xì)胞表面跨膜糖蛋白分子,主要參與細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞-基質(zhì)之間的特異性粘附過程。人類CD44基因定位于11號染色體短臂，全長約50kb，共由20個高度保守的外顯子組成。外顯

32、子按照轉(zhuǎn)錄方式不同可分為組成型外顯子（c）和變異性拼接外顯子(v)兩大類,變異性拼接外顯子共有10個,其中較為重要的第6位變異性拼接外顯子(CD44v6)的過度轉(zhuǎn)錄已被發(fā)現(xiàn)與一些上皮性腫瘤的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移有關(guān)。 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究5532 CD44v6的表達(dá)及其意義結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征 有作者報道CD44v6過表達(dá)的結(jié)直腸癌易于轉(zhuǎn)移 3，4 ,還有作者報道CD44V6表達(dá)減少與結(jié)直腸癌的更強侵襲性和不良預(yù)后有關(guān) 9，16，17 ，但Morrin等 10 和Jungling等18的最近報道認(rèn)為CD44v6的表達(dá)與結(jié)直腸癌進(jìn)展沒有明顯關(guān)系。 本組92例結(jié)直腸癌進(jìn)行CD4

33、4v6標(biāo)記的陽性率與UICC分期之間具有相關(guān)性（P.01），即、期CD44v6陽性率明顯高于、期，但期陽性率（73.0%）卻高于期（62.5%）。此外，CD44v6表達(dá)與組織類型、腫瘤生長方式及瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤間無明顯相關(guān)性。 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究56 有作者報道CD44v6過表達(dá) 在有10年以上隨訪資料的28例結(jié)直腸癌中，CD44v6的表達(dá)與10年生存率間無明顯相關(guān)性。Weg-Remers等 17 及Chun等19 的研究表明，CD44v6在正常結(jié)腸粘膜內(nèi)很少表達(dá)，而在結(jié)直腸癌組織中的陽性率顯著增高。 因此，CD44基因可能只是在結(jié)直腸癌的腫瘤形成過程中發(fā)揮一定作用

34、9,19 。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究57 在有10年以上隨訪資料的28例結(jié)直腸癌中，CD33 nm23的表達(dá)及其意義 人類nm23基因定位于17號染色體長臂（17q21），該基因全長8.5Kb，由5個外顯子及4個內(nèi)含子組成，編碼蛋白質(zhì)分子量約17000（17KDa）。nm23基因產(chǎn)物NDPK與微管聚集、G蛋白信號傳遞、細(xì)胞與周圍組織粘附力、完整的基底膜形成及轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)等有關(guān)20，21?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)nm23基因主要有H1、H2兩種類型，多數(shù)研究認(rèn)為H1亞型與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系最密切。在人類腫瘤中，該基因的改變有基因丟失、突變、表達(dá)異常22.結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究5

35、833 nm23的表達(dá)及其意義結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)起初，人們通過動物實驗發(fā)現(xiàn)nm23基因具有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的作用，以后不少研究報道結(jié)直腸癌中nm23表達(dá)減少與腫瘤晚期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)23-25，并且Tannapfel等 26 研究認(rèn)為nm23表達(dá)減少可作為評價結(jié)直腸癌具有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移潛能的一項獨立指標(biāo)。Cheah等27報道nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床分期呈反比（分期越晚，表達(dá)越少），但與性別、年齡、腫瘤分化程度及5年生存率等無明顯關(guān)系。結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究59起初，人們通過動物實驗發(fā)現(xiàn)nm23基因具有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的作用最近，Katakura等 28 報道nm23表達(dá)可

36、作為預(yù)測非小細(xì)胞肺癌良好預(yù)后的一項獨立指標(biāo)，但Forte等29認(rèn)為nm23尚不能作為結(jié)直腸癌的一項獨立預(yù)后指標(biāo)。 本組92例結(jié)直腸癌的nm23表達(dá)與組織類型、UICC分期、腫瘤生長方式及瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤均無明顯相關(guān)性，但經(jīng)對有隨訪結(jié)果的結(jié)直腸癌中nm23表達(dá)作多因素Cox回歸模型分析提示，nm23陰性病例預(yù)示更差的預(yù)后。因而我們贊同nm23基因具有抗腫瘤轉(zhuǎn)移的潛能 28 ，認(rèn)為nm23表達(dá)減少預(yù)示結(jié)直腸癌更強的侵襲性和易于轉(zhuǎn)移擴散。 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究60最近，Katakura等 28 報道nm23表達(dá)可作為預(yù)34 其它臨床病理因素341 UICC分期：本研究發(fā)現(xiàn)該

37、分期與C-erbB-2、CD44v6的表達(dá)具有明顯相關(guān)性，提示c-erbB-2、CD44v6癌基因過表達(dá)的結(jié)直腸癌可能具有更強的侵襲性。通過對有隨訪資料的結(jié)直腸癌UICC分期作多因素Cox回歸模型分析證實，該分期具有顯著獨立的預(yù)后意義 18，29 。342 組織類型：本研究發(fā)現(xiàn)組織類型與C-erbB-2、CD44v6及nm23基因蛋白表達(dá)無明顯相關(guān)性 13，18，27。雖然單因素Cox模型分析顯示低分化腺癌、粘液腺癌的預(yù)后明顯差于高、中分化腺癌 30，但經(jīng)作多因素Cox模型分析發(fā)現(xiàn)組織類型不能作為獨立的預(yù)后指標(biāo) 31 。 結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究6134 其它臨床病理因素結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相343 腫瘤生長方式：近年研究認(rèn)