1、飼料中粗脂肪的測定飼料中粗脂肪的測定飼料中粗脂肪的測定二、實(shí)驗(yàn)原理一、適用范圍三、準(zhǔn)備儀器設(shè)備四、準(zhǔn)備藥品試劑五、測定并做好記錄六、測定結(jié)果的計(jì)算與表述七、重復(fù)性飼料中粗脂肪的測定二、實(shí)驗(yàn)原理一、適用范圍三、準(zhǔn)備儀器設(shè)備四本方法適用于油籽和油籽殘?jiān)酝獾膭?dòng)物飼料。為了本方法的測定效果，將動(dòng)物飼料分為A、B兩類；B類產(chǎn)品提取前需水解。B類包括：純動(dòng)物性飼料，包括乳制品；脂肪不經(jīng)預(yù)先水解不能提取的純植物性飼料，如谷蛋白、酵母、大豆及馬鈴薯蛋白以及加熱處理的飼料；含有一定數(shù)量加工產(chǎn)品的配合飼料，其脂肪含量至少有20來自這些加工產(chǎn)品。A類：B類以外的動(dòng)物飼料 一、適用范圍本方法適用于油籽和油籽殘?jiān)酝?/p>

2、的動(dòng)物飼料。一、適用范圍1、脂肪含量較高的樣品（至少20g/kg）預(yù)先用石油醚提取。2、B類樣品用鹽酸加熱水解，水解溶液冷卻、過濾，洗滌殘?jiān)⒏稍锖笥檬兔烟崛?，蒸餾、干燥除去溶劑，殘?jiān)Q量。3、A類樣品用石油醚提取，通過蒸餾和干燥除去溶劑，殘?jiān)Q量。 二、實(shí)驗(yàn)原理1、脂肪含量較高的樣品（至少20g/kg）預(yù)先用石油醚提取。（1）提取套管，無脂肪和油，用乙醚洗滌。（2）索氏提取器，虹吸容積約100mL，或用其他循環(huán)提取器。（3）加熱裝置 有溫度控制裝置，不作為火源。（4）干燥箱 溫度能保持在（103+2）。（5）電熱真空箱 溫度能保持在（80+2），并減壓至13.3kPa以下，配有引入干燥空氣

3、的裝置，或內(nèi)盛干燥劑，例如氧化鈣。（6）干燥器 內(nèi)裝有效的干燥劑。三、準(zhǔn)備儀器設(shè)備 （1）提取套管，無脂肪和油，用乙醚洗滌。三、準(zhǔn)備儀器設(shè)備 本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑未注明要求時(shí)，均指分析純試劑。（1）水 至少應(yīng)為GBT 6682規(guī)定的3級。（2）硫酸鈉 無水。（3）石油醚 也可使用揮發(fā)殘?jiān)陀?0mg/L的工業(yè)乙烷。（4）金剛砂或玻璃細(xì)珠。（5）丙酮。（6）鹽酸 c（HCl）3mol/L（7）濾器輔料 例如硅藻土，在鹽酸c(HCl)6mol/L中消煮30min，用水洗至中性，然后在130下干燥。四、準(zhǔn)備藥品試劑本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑未注明要求時(shí)，均指分析純試劑。四、準(zhǔn)備藥品試劑五、測定并做好記錄試樣的制備：選

4、取有代表性的試樣，用四分法將試樣縮減至500g，粉碎至40目，再用四分法縮減至200g，于密封容器中保存。1、分析步驟的選擇如果試樣不易粉碎，或因脂肪含量高（超過200g/kg）而不易獲得均質(zhì)的縮減的試樣，按步驟2處理。否則，按步驟3處理。五、測定并做好記錄試樣的制備：選取有代表性的試樣，用四分法將五、測定并做好記錄2、預(yù)先提?。?）稱取至少20 g制備的試樣（m0），準(zhǔn)確至1 mg，與10g無水硫酸鈉混合，轉(zhuǎn)移至一提取套管并用一小塊脫脂棉覆蓋。將一些金剛砂轉(zhuǎn)移至一干燥燒瓶，如果隨后將對脂肪定性，則使用玻璃細(xì)珠取代金剛砂。將燒瓶與提取器連接，收集石油醚提取物。五、測定并做好記錄2、預(yù)先提取五、

5、測定并做好記錄將套管置于提取器中，用石油醚提取2h。如果使用索氏提取器，則調(diào)節(jié)加熱裝置使每小時(shí)至少循環(huán)10次；如果使用一個(gè)相當(dāng)設(shè)備，則控制流速每秒至少5滴（約10mL/min）。用500mL石油醚稀釋燒瓶中的石油醚提取物，充分混合。對一個(gè)盛有金剛砂或玻璃細(xì)珠的干燥燒瓶進(jìn)行稱量（m1），準(zhǔn)確至lmg，吸取50mL石油醚溶液移人此燒瓶中。五、測定并做好記錄將套管置于提取器中，用石油醚提取2h。如果五、測定并做好記錄（2）蒸餾除去溶劑，直至燒瓶中幾無溶劑，加2mL丙酮至燒瓶中，轉(zhuǎn)動(dòng)燒瓶并在加熱裝置上緩慢加溫以除去丙酮，吹去痕量丙酮。殘?jiān)?03干燥箱內(nèi)干燥（10+0.1）min，在干燥器中冷卻，稱量

6、（m2），準(zhǔn)確至0.1mg。也可采?。赫麴s除去溶劑，燒瓶中殘?jiān)?0電熱真空箱中干燥1.5h，在干燥器中冷卻，稱量（m2），準(zhǔn)確至0.1mg。（3）取出套管中提取的殘?jiān)诳諝庵懈稍?，除去殘余的溶劑，干燥殘?jiān)Q量（m3），準(zhǔn)確至0.1mg。將殘?jiān)鬯槌?mm大小的顆粒，按步驟（3）處理。五、測定并做好記錄（2）蒸餾除去溶劑，直至燒瓶中幾無溶劑，加五、測定并做好記錄3、試料稱取5g左右（m4）制備的試樣，準(zhǔn)確至1mg。對B類樣品按步驟4處理。對A類樣品，將試料移至提取套管并用一小塊脫脂棉覆蓋，按步驟5處理。4、水解將試料轉(zhuǎn)移至一個(gè)400mL燒杯或個(gè)300mL錐形瓶中，加100 ml鹽酸和金剛砂，用

7、表面皿覆蓋，或?qū)㈠F形瓶與回流冷凝器連接，在火焰上或電熱板上加熱混合物至微沸，保持lh，每10min旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)一次，防止產(chǎn)物附著于容器壁上。五、測定并做好記錄3、試料五、測定并做好記錄在環(huán)境溫度下冷卻，加一定量的濾器輔料，防止過濾時(shí)脂肪丟失，在布氏漏斗中通過濕潤的無脂的雙層濾紙抽吸過濾，殘?jiān)美渌礈熘林行?。小心取出濾器并將含有殘?jiān)碾p層濾紙放入一個(gè)提取套管中，在80電熱真空箱中于真空條件下干燥60min，從電熱真空箱中取出套管并用一小塊脫脂棉覆蓋。五、測定并做好記錄在環(huán)境溫度下冷卻，加一定量的濾器輔料，防止五、測定并做好記錄5、提?。?）將一些金剛砂轉(zhuǎn)移至一干燥燒瓶，稱量（m5），準(zhǔn)確至1mg。

8、如果隨后將要對脂肪定性，則使用玻璃細(xì)珠取代金剛砂。將燒瓶與提取器連接，收集石油醚提取物。將套管置于提取器中，用石油醚提取6h。如果使用索氏提取器，則調(diào)節(jié)加熱裝置使每小時(shí)至少循環(huán)10次，如果使用一個(gè)相當(dāng)設(shè)備，則控制回流速度每秒至少5滴（約10 mL/min）。五、測定并做好記錄5、提取五、測定并做好記錄5、提?。?）蒸餾除去溶劑，直至燒瓶中幾無溶劑，加2mL丙酮至燒瓶中，轉(zhuǎn)動(dòng)燒瓶并在加熱裝置上緩慢加溫以除去丙酮，吹去痕量丙酮。殘?jiān)?03干燥箱內(nèi)干燥（100.1）min，在干燥器中冷卻，稱量（m6），準(zhǔn)確至0.1mg。也可采?。赫麴s除去溶劑，燒瓶中殘?jiān)?0電熱真空箱中干燥1.5h，在干燥器中冷

9、卻，稱量（m6），準(zhǔn)確至0.1mg。五、測定并做好記錄5、提取六、測定結(jié)果的計(jì)算和表述1、預(yù)先提取測定法 試樣的脂肪含量W1，按下式計(jì)算，以g/kg表示：式中，m0為在步驟2中稱取的試樣質(zhì)量，g；m1為在步驟2中裝有金剛砂的燒瓶的質(zhì)量，g；m2為在步驟2中帶有金剛砂的燒瓶和干燥的石油醚提取物殘?jiān)馁|(zhì)量，g；m3為在步驟2中獲得的干燥提取殘?jiān)馁|(zhì)量，g；m4為試料步驟3的質(zhì)量，g；m5為在步驟5中使用的盛有金剛砂的燒瓶的質(zhì)量，g；m6為在步驟5中盛有金剛砂的燒瓶和獲得的干燥石油醚提取殘?jiān)馁|(zhì)量，g；f為校正因子單位，g/kg（f1000g/kg）。結(jié)果表示準(zhǔn)確至lg/kg。六、測定結(jié)果的計(jì)算和表述1、預(yù)先提取測定法 試樣的脂肪含六、測定結(jié)果的計(jì)算和表述2、無預(yù)先提取的測定法 試樣的脂肪含量W2按下式計(jì)算，以g/kg表示：式中變量符號意義同上。結(jié)果表示準(zhǔn)確至lg/kg。六、測定結(jié)果的計(jì)算和表述2、無預(yù)先提取的測定法 試樣的脂七、重復(fù)性獲得的兩個(gè)獨(dú)立的測定結(jié)果之間的