藥物分析第十二章:喹啉與青蒿類抗瘧藥物的分析瘧疾簡介：瘧疾，又名打擺子，是由瘧原蟲經(jīng)按蚊叮咬傳播的疾病。臨床上以周期性發(fā)作的寒戰(zhàn)、高熱、出汗退熱，以及貧血和脾臟腫大為特點。瘧原蟲的生命周期：1）雌按蚊叮咬人時，唾液中的瘧原蟲的長梭形的子孢子進入人體內(nèi)，隨血液運移到肝臟，侵入肝細胞。子孢子在肝細胞內(nèi)部吸收營養(yǎng)，長大成熟后分裂生殖形成很多小的裂殖子。裂殖子成熟后，破壞肝細胞進入體液、血液中，一部分再侵入肝細胞重復上述循環(huán)，一部分侵入紅細胞。2）在紅細胞內(nèi)，裂殖子逐漸吸收血紅蛋白作為營養(yǎng)長大，成為像個戒指的環(huán)狀體。環(huán)狀體進一步長大，向四周伸出偽足，稱為阿米巴樣體或大滋養(yǎng)體。大滋養(yǎng)體進一步發(fā)育形成裂殖體，裂殖體成熟后放出很多裂殖子，破壞紅細胞后進入血液，繼續(xù)感染其他紅細胞。由于人體內(nèi)的瘧原蟲的裂殖子同時破壞大量紅細胞進入血液，人體會產(chǎn)生瘧疾的典型癥狀，如發(fā)冷發(fā)熱。如果宿主環(huán)境不利，一些裂殖子進入紅細胞后可形成大、小配子母細胞。這些配子母細胞在人體中不再進一步發(fā)育，如果不能被蚊子吸血時吸走，配子母細胞在人體內(nèi)可存活60天。3）當蚊子吸取受感染人體的血液后，雄，雌配子母細胞進入蚊子胃內(nèi)，發(fā)育成配子并進行有性繁殖。合子穿透蚊子的胃壁，在胃壁下形成卵囊（oocyte）。卵囊中瘧原蟲進行無性繁殖，最終形成子孢子（sporozoite）。成熟后，卵囊破裂，子孢子進入蚊子體腔，穿透各種組織，進入蚊子唾液腺。蚊子唾液腺中的子孢子可達20萬。子孢子在蚊子體內(nèi)存活70天。準備感染新的脊椎動物宿主。瘧原蟲的生命周期：常見抗瘧藥按結(jié)構(gòu)可分為四類：喹啉類、萘啶類、青蒿素及其衍生物、嘧啶及雙胍類，本書僅介紹前三類。典型藥物典型藥物典型藥物典型藥物磷酸咯萘啶典型藥物主要性質(zhì)堿性含有N原子,一般都有堿性旋光性含有手性原子,一般都有旋光性熒光特性硫酸奎寧和二鹽酸奎寧在稀硫酸顯藍色熒光UV吡啶與苯環(huán)具有共軛結(jié)構(gòu),也有紫外吸收光譜特性二、鑒別反應Identification一、綠奎寧反應（Thalleioquin）

二醌基亞胺的胺鹽取其水溶液加溴試液2～3滴和氨試液1ml，即顯翠綠色；加酸至中性顯藍色；

酸性則呈紫紅色；翠綠色可轉(zhuǎn)溶于醇、氯仿中不溶于醚。二、Identification二、光譜特征UV－ChP磷酸氯喹：取本品，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中約含10ug的溶液，照UV測定，在222nm,257nm,329nm與343nm的波長有最大吸收。FLD－ChP硫酸奎寧：取本品約20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即顯藍色熒光。IR（紅外光譜）：硫酸奎寧、二鹽酸奎寧、磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘喹、磷酸伯氨喹在ChP中均采用IR進行鑒別。二、Identification基于無機酸鹽的鑒別氯化物加稀硝酸和硝酸銀生成白色凝乳狀沉淀加銨試液溶解,加硝酸再沉淀加二氧化錳，加硫酸潤濕，緩慢加熱，產(chǎn)生氯氣使KI試紙遇淀粉變藍二、Identification基于無機酸鹽的鑒別磷酸鹽反應加硝酸銀生成淺黃色沉淀在銨試液或稀硝酸中均易溶解加氯化銨鎂生成白色結(jié)晶性沉淀加鉬酸銨試液與硝酸后,加熱生成黃色沉淀，分離，沉淀在氨試液中溶解三、Detectionofspecificimpurities1.酸度

取本品1.0g，加水25ml溶解，測定pH值應大于2.4。2.水中不溶物

取本品加水溶解后，稍放置即有黃色不溶物產(chǎn)生,影響品質(zhì).3.氯化物系生產(chǎn)工藝帶入.檢查時為了避免溶液顏色干擾堿使咯萘啶沉淀析出,過濾后進行檢查.4.甲醛：合成過程中引入5.四氫吡啶：合成過程中引入

磷酸咯萘啶的純度檢查四含量測定硫酸喹啉含量測定非水溶液滴定法磷酸氯喹的測定體內(nèi)測定注意樣品處理制劑：UV原料：非水溶液滴定法一、硫酸喹啉含量測定當HA酸性較強時，反應不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應順利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游離堿類鹽被置換出的弱酸A、非水溶液滴定法二、磷酸氯喹制劑含量測定磷酸氯喹用非水溶液滴定法測定含量，但制劑中由于含有輔料，所采用的含量測定方法不同。示例12-10：ChP中磷酸氯喹片含量的紫外—可見分光光度測定法：取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于磷酸氯喹0.13g),置200ml量瓶中，加0.lmol/L鹽酸溶液適量，充分振搖使磷酸氯喹溶解并稀釋至刻度，搖勻,濾過，精密量取續(xù)濾液2ml，置100ml量瓶中，用0.lmol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法（附錄IVA)，在343nm的波長處測定吸光度；另取磷酸氯喹對照品適量，精密稱定，加O.lmol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每lml中約含13pg的溶液，同法測定，計算，即得。第二節(jié):青蒿素類藥物的分析青蒿素又名黃蒿素,是我國從菊花科植物黃花蒿中提取分離得到的一個含過氧基團的新型倍半萜內(nèi)酯研究歷史:資料來源于baidu

中國抗瘧新藥的研究源于1967年成立的五二三項目，其全稱為中國瘧疾研究協(xié)作項目，成立于1967年的5月23日,因絕密軍事項目,遂設代號523。研究歷史:資料來源于baidu

歷經(jīng)380多次鼠瘧篩選，1971年10月取得中藥青蒿素篩選的成功。1972年從中藥青蒿中分離得到抗瘧有效單體，命名為青蒿素，對鼠瘧、猴瘧的原蟲抑制率達到100%。

1973年經(jīng)臨床研究取得與實驗室一致的結(jié)果、抗瘧新藥青蒿素由此誕生。

研究歷史:資料來源于baidu1981年10月在北京召開的由世界衛(wèi)生組織主辦的“青蒿素”國際會議上，中國《青蒿素的化學研究》的發(fā)言，引起與會代表極大的興趣，并認為“這一新的發(fā)現(xiàn)更重要的意義是在于將為進一步設計合成新藥指出方向”。研究歷史:資料來源于baidu2011年9月，中國女藥學家屠呦呦因創(chuàng)制新型抗瘧藥———青蒿素和雙氫青蒿素的貢獻，獲得被譽為諾貝爾獎“風向標”的拉斯克獎。這是中國生物醫(yī)學界迄今為止獲得的世界級最高級大獎。

1990年，為控制瘧疾對青蒿素的耐藥性，世界衛(wèi)生組織建議在治療中必須將青蒿素同別的抗瘧藥聯(lián)合使用。2007年5月，在瑞士日內(nèi)瓦舉行的第60屆世界衛(wèi)生大會上，世界衛(wèi)生組織聲明，單方青蒿素為引發(fā)耐藥性，建議在全球范圍內(nèi)推廣使用復方青蒿素。青蒿素在國際上的評價（以維基百科為例）：Treatment：Uncomplicatedmalariamaybetreatedwithoralmedications.ThemosteffectivetreatmentforP.falciparum（惡性瘧疾）infectionistheuseofartemisininsincombinationwithotherantimalarials(knownasartemisinin-combinationtherapy,orACT),whichdecreasesresistancetoanysingledrugcomponent（組分）.[72]青蒿素在國際上的評價（以維基百科為例）：Theseadditionalantimalarialsinclude:amodiaquine,lumefantrine,mefloquineorsulfadoxine/pyrimethamine.[73]（苯芴醇，甲氟喹或阿莫地喹，磺胺/乙胺嘧啶）Anotherrecommendedcombinationisdihydroartemisininand

piperaquine.[74][75]ACTisabout90%effectivewhenusedtotreat

uncomplicated

malaria.[51]青蒿素在國際上的評價（以維基百科為例）：Totreatmalariaduringpregnancy,theWHOrecommendstheuseofquinineplusclindamycin（奎寧克拉霉素片）earlyinthepregnancy(1sttrimester),andACTinlaterstages(2ndand3rdtrimesters).[76]Inthe2000s(decade),malariawithpartialresistancetoartemisinsemergedinSoutheastAsia.[77][78]小節(jié)：青蒿素抗瘧作用有迅速、高效、安全、低毒且與大多數(shù)抗瘧藥無交叉抗性是一類全新結(jié)構(gòu)的抗瘧藥，為抗瘧藥的研發(fā)提供了新的先導化合物易產(chǎn)生耐藥性，推薦使用復方青蒿素合成難度較大，藥物的生產(chǎn)仍依賴于天然藥材的提取青蒿素類藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)脂溶性青蒿素類藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)水溶性青蒿素類藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)青蒿素經(jīng)過硼氫化鈉還原而來青蒿素類藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)青蒿素類藥物化學性質(zhì)氧化性過氧橋鍵具有氧化性旋光性手性原子,具有旋光性紫外吸收特性環(huán)狀結(jié)構(gòu)雖然不具有共軛特性,但取代基具有一定吸收特性怎么做？水解反應內(nèi)酯結(jié)構(gòu)，堿性條件下易水解青蒿素類藥物的鑒別試驗呈色反應過氧橋鍵具有氧化性酸性條件下能將碘離子氧化成碘與淀粉指示液顯藍紫色青蒿素類藥物的鑒別試驗羥肟酸鐵反應含內(nèi)酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯類化合物在堿性條件下與羥胺反應生成羥肟酸。在稀酸溶液中與高鐵離子呈色顯紫色青蒿素類藥物的鑒別試驗香草醛-硫酸反應使分子中的羧基脫水，增加雙鍵位移，分子縮合反應生成其軛系統(tǒng)，在酸作用下形成陽碳離子鹽而顯色青蒿素類藥物的鑒別試驗吸收光譜特征紅外，與標準譜圖對照紫外，取代基末端吸收以鑒別，ChP2010未采用青蒿素類藥物的鑒別試驗色譜法HPLC法保留時間定性青蒿素類藥物的鑒別試驗目前青蒿素的制備仍以黃花蒿的提取為主，所以結(jié)構(gòu)類似物較多HPLC法TLC法純度檢查青蒿素類藥物的含量測定【含量測定】照高效液相色譜法（附錄V

D)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（60：40)為流動相；檢測波長為210nm。取本品和雙氫青蒿素對照品適量，加甲醇溶解并稀釋制成每lml中各約含lmg的混合溶液，量取注入液相色譜儀，雙氫青蒿素呈現(xiàn)兩個色譜峰，青蒿素峰與相鄰雙氫青蒿素峰的分離度應大于2.0;理論板按青蒿素峰計算不低于3000