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CFX系列快速操作指南及注意事項(xiàng)CFX系列快速操作指南及注意事項(xiàng)CFX系列快速操作指南及注意事項(xiàng)xxx公司CFX系列快速操作指南及注意事項(xiàng)文件編號(hào):文件日期:修訂次數(shù):第1.0次更改批準(zhǔn)審核制定方案設(shè)計(jì),管理制度CFX?系列Real-TimePCR檢測(cè)系統(tǒng)快速操作指南確認(rèn)系統(tǒng)數(shù)據(jù)線和電源線連接正常后,打開(kāi)CFX96電源開(kāi)關(guān),系統(tǒng)進(jìn)入自檢。自檢完成后啟動(dòng)CFXManager,軟件將自動(dòng)搜索設(shè)備,完成連接后“DetectedInstruments”列表出現(xiàn)設(shè)備名稱(chēng),PCR儀器屏幕顯示紅色“Underremotecontrol”文字。點(diǎn)擊“Experimentsetup”彈出實(shí)驗(yàn)設(shè)置選項(xiàng)。標(biāo)簽下,“CreateNew”可新建熱循環(huán)程序,“SelectExisting”可調(diào)用已有熱循環(huán)程序,“Expressload”下拉菜單中可選擇各種標(biāo)準(zhǔn)熱循環(huán)程序,“EditSelected”可對(duì)選中的熱循環(huán)程序進(jìn)行編輯。
新建或編輯熱循環(huán)程序時(shí),可在圖形或文字區(qū)域輸入各步驟設(shè)定溫度、時(shí)間值。
:插入一個(gè)普通溫控步驟;
:插入溫度梯度步驟;
:插入熱循環(huán)范圍,須在插入后輸入循環(huán)起始步驟和循環(huán)次數(shù);
:插入熔解曲線分析步驟;
:插入熒光采集步驟;
:對(duì)當(dāng)前溫控步驟的變溫速率及方式進(jìn)行調(diào)節(jié);
:刪除當(dāng)前溫控步驟;
里應(yīng)輸入PCR反應(yīng)液體積(此例為25微升)
編輯好熱循環(huán)程序后點(diǎn)擊OK保存。確定熱循環(huán)程序后點(diǎn)擊“Next”或標(biāo)簽進(jìn)入樣品位置及類(lèi)型設(shè)定?!癈reateNew”可新建樣品設(shè)置,“Select”可調(diào)用已有樣品設(shè)置,“Expressload”下拉菜單可選擇各種標(biāo)準(zhǔn)樣品設(shè)置,“EditSelected”可對(duì)選中的熱循環(huán)程序進(jìn)行編輯。新建和編輯按下面步驟進(jìn)行:
從里選擇熒光掃描模式,“SYBR/FAMOnly”為單通道快速掃描模式,適用于僅使用核酸染料或/和FAM標(biāo)定探針的情況?!癆llChannels”為全通道掃描模式,適用于任何檢測(cè)情況?!癋RET”模式使用于特殊的FRET探針的情況。
點(diǎn)擊,可在彈出的對(duì)話框里選擇與檢測(cè)方法一致的熒光素。注意“SYBR/FAMonly”模式下只有FAM/SYBR可用。
選擇欲使用的樣品孔位置后,在下拉菜單里指定樣品類(lèi)型,此例為standard標(biāo)準(zhǔn)品。
在打勾,為所選樣品指定熒光類(lèi)型(此例為SYBR),根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,還可在后面的輸入擴(kuò)增基因名稱(chēng)。
根據(jù)需要可在為輸入所選樣品孔位的樣品名稱(chēng)。
如果樣品設(shè)置有重復(fù),可在里逐一指定,或者點(diǎn)擊快速設(shè)置重復(fù)。中分別填入重復(fù)的數(shù)量以及起始重復(fù)編號(hào),可指定重復(fù)放置的方向,點(diǎn)擊即可。
如果設(shè)置了標(biāo)準(zhǔn)品,需要為標(biāo)準(zhǔn)品賦值,可在中逐一輸入,或者點(diǎn)擊快速設(shè)定。
可為相對(duì)定量數(shù)據(jù)分析時(shí)指定內(nèi)參基因的名稱(chēng)。
可解除所選樣品的重復(fù)設(shè)置狀態(tài)。
可刪除當(dāng)前選定的樣品孔設(shè)置。
有疑問(wèn)可點(diǎn)擊,參考在線幫助。
編輯好板位文件后,點(diǎn)OK保存。確定樣品設(shè)置后點(diǎn)擊“Next”或者準(zhǔn)備運(yùn)行系統(tǒng)。點(diǎn)擊設(shè)備自動(dòng)打開(kāi)樣品槽,按照設(shè)置好的樣品位置放置好樣品,然后點(diǎn)擊關(guān)閉樣品槽。熱蓋閉合后點(diǎn)擊,設(shè)備詢問(wèn)數(shù)據(jù)存放的位置,確定后開(kāi)始運(yùn)行。程序運(yùn)行時(shí)可對(duì)PCR程序循環(huán)數(shù)、樣品類(lèi)型進(jìn)行實(shí)施再編輯,也可編輯新的實(shí)驗(yàn)方案或者分析數(shù)據(jù)。注意事項(xiàng):設(shè)備長(zhǎng)時(shí)間停用時(shí)請(qǐng)勿將樣品槽打開(kāi)閑置,以免灰塵在樣品槽上長(zhǎng)期積累,影響熱傳遞。樣品槽開(kāi)閉時(shí)讓設(shè)備自由運(yùn)行,不得強(qiáng)行人為掰開(kāi)或壓合。不可同時(shí)使用不同規(guī)格的耗材。避免意外斷電,建議為設(shè)備配置在線式UPS系統(tǒng)。程序未結(jié)束前不得關(guān)閉系統(tǒng)電源,不得帶電扳動(dòng)設(shè)備背后的鎖定桿。PCR運(yùn)行時(shí)不要搬動(dòng)
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