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大鼠常規(guī)操作技術(shù)孫泉首都醫(yī)科高校試驗動物辦公室)sunquan@11.了解動物試驗的目的和意義2.了解試驗動物選擇和染毒途徑。3.駕馭大鼠試驗的基本操作技術(shù)。一、試驗?zāi)康模?31.試驗動物的選擇2.試驗動物的抓取和固定3.性別鑒定4.試驗動物編號標(biāo)記5.試驗動物給藥途徑和方法(灌胃、腹腔、皮下注射、尾靜脈注射)6.生物標(biāo)本的采集(鼠尾取血、心臟采血、眼眶取血)7.試驗動物的處死二.試驗內(nèi)容:4試驗流程5動物物種選擇基本原則:
動物的選擇6健康動物首先看外觀:體形豐滿,被毛濃密有光澤、緊貼體表,眼睛光明,反應(yīng)行動靈敏。有無明顯疾病癥狀體重、年齡外觀視察7動物的抓取和固定單手固定雙手固定固定器固定板留意抓取動物的手法抓取固定時力氣大小適宜8未成熟鼠生殖器發(fā)育不明顯,肛門與生殖器之間的距離來區(qū)分。遠——♂、近——♀。成年鼠:雄性臥位可見睪丸,雌性可見腹部有12個乳頭。性別鑒定9常用標(biāo)記,兩種染料(苦味酸和中性紅或品紅)先左后右,先上后下動物的編號標(biāo)記10穿耳孔法左耳代表十位,右耳代表個位應(yīng)留意防止孔口愈合,多運用消毒滑石粉涂抹在打孔局部11原則:同一試驗中,試驗動物的年齡盡可能一樣,試驗動物體重大致相近;同組、同性別動物體重差異應(yīng)小于平均體重的10%;不同組間同性別動物體重均值差異小于5%;♀♂動物各半,且♀♂試驗結(jié)果分開統(tǒng)計、分析。稱重編號隨機分組
試驗動物的分組12經(jīng)口染毒(喂飼、灌胃、吞咽膠囊等)經(jīng)呼吸道染毒(靜式、動式和氣管內(nèi)注入)經(jīng)皮膚染毒注射染毒(皮下、皮內(nèi)、肌內(nèi)、腹腔和鼠尾靜脈注射等)其它(直腸內(nèi)、鼻腔等)試驗動物染毒途徑和方法13灌胃抓取老鼠時應(yīng)是鼠成豎直線灌胃成功時,所遇阻力較小灌胃時留意胃容量0.1ml/10g-0.3ml/10g,<1mL14腹下1/3外側(cè),避開損傷實質(zhì)器官30-45°角刺入扎入時有“落空感”,回抽無尿液或血液腹腔注射15酒精擦拭尾部左手食指,拇指協(xié)作按住尾端右手持注射器,針尖輕輕抬起與血管平行刺入血管由紅變白,按壓止血尾靜脈注射16俯臥固定,左手拇指和食指捏住頸背部皮膚提起,右手持針沿縱軸方向刺入皮下,進針時感覺有阻力,接著刺入,突然阻力消逝,活動針頭,確認刺入皮下即可注射藥液。
皮下注射17俯臥保定,與皮膚平行刺入捏住的皮膚,注射部位局部形成皮丘。為避開藥液流出,停留片刻,再將針頭撥出
皮內(nèi)注射
18血液采集(斷尾采血、眼眶采血、心臟采血等)尿液采集糞便采集生物標(biāo)本的采集19固定→用手輕揉鼠尾→靜脈充血后剪尾尖(1-2mm)→用手從尾根向尾尖推擠→采血→干棉止血。每次0.1mL尾尖靜脈采血法20左手固定動物→滴少量10%可卡因于動物眼內(nèi)→右手持消毒過毛細吸管→以抗凝劑潮濕內(nèi)壁→眼瞼和眼球間旋轉(zhuǎn)刺入→采血后消毒紗布止血30秒。每次0.2-0.3mL眼眶后靜脈叢采血21動物仰臥→固定器固定→剪左側(cè)心區(qū)毛→皮膚消毒→小號針頭注射器在3-4肋間刺入??蛇_0.5mL心臟采血法22脊椎脫臼法:用左手按住動物的頭部于試驗臺上,右手抓住尾根部,快速、不間斷地向后、略向上用勁拉,使動物的頸椎以致脊椎脫臼死亡。過量麻醉法動物的處死23將動物固定于解剖臺上,從恥骨聯(lián)合至下頜沿正中線切開皮膚,再從恥骨聯(lián)合至肋骨下緣沿腹正中線切開腹壁肌肉(不要用力過猛,以免切破腹腔臟器,特殊是膀胱)。從肋骨下端向脊柱方向,將兩側(cè)腹壁剪開,以便視察腹腔內(nèi)臟器。應(yīng)留意不行將腹腔內(nèi)臟器翻亂,應(yīng)有次序地檢查。臟器標(biāo)本的采集2425262728抓取稱重給藥采血麻醉解剖1.抓取與操作動物時當(dāng)心不要被咬傷,假如被咬傷需立刻用清水沖洗并用碘酒消毒。2.抓取動物時用力要恰當(dāng),防
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