丙型肝炎實(shí)驗(yàn)室檢測策略研究第1頁/共40頁課題研究總體思路檢測策略制定三原則：

1.檢測的目的（監(jiān)測、診斷、血液篩查）

2.檢測方法的敏感性和特異性

3.被檢測人群的HCV感染率檢測策略評估三階段：

1.參比實(shí)驗(yàn)室小樣本的評估

2.臨床實(shí)驗(yàn)室大樣本的現(xiàn)場評估策略實(shí)施前試點(diǎn)

3.策略實(shí)施后的評估（提供持續(xù)的檢測性能評價的數(shù)據(jù)）第2頁/共40頁一、丙型肝炎實(shí)驗(yàn)室檢測方法學(xué)評價（一）1.方法學(xué)評價指標(biāo)

1）敏感性、特異性；

2）分析靈敏度;3）分析特異性;4）對弱陽性樣本的檢出能力；

5）線形范圍；

6）批內(nèi)及批間精密度；

第3頁/共40頁一、丙型肝炎實(shí)驗(yàn)室檢測方法學(xué)評價（二）2.評價用血清盤（panel）

1)參比實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)血清盤；

2)美國BBI商業(yè)陽轉(zhuǎn)血清盤（4套）；

3)參比室干擾樣本血清盤；

4)參比實(shí)驗(yàn)室特性血清盤；

5)參比實(shí)驗(yàn)室系列稀釋血清盤（4套）；

6)參比實(shí)驗(yàn)室精密度質(zhì)控品（高、中、底值）；3.評價實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制美國CAP能力驗(yàn)證血清盤

第4頁/共40頁一、丙型肝炎實(shí)驗(yàn)室檢測方法學(xué)評價（三）4.酶聯(lián)免疫試劑評價結(jié)果（15家）

1）敏感性97.5%~100%，特異性97.5%~100%。2）4套BBI血清盤的平均間隔天數(shù)（從采樣開始到檢測出陽性的間隔天數(shù)）8.75天-19天。3）分析特異性皆為100%。4）弱陽性樣本檢測結(jié)果見附件。5）4套系列稀釋血清盤的線性范圍稀釋度11~23。6）批內(nèi)精密度(CV%)3.4~23.9；批間精密度(CV%)高值3.36~57.74；中值1.87~38.64;

低值2.68~56.39;第5頁/共40頁附件反應(yīng)強(qiáng)度—特性盤檢測結(jié)果(s/co)-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------廠家 TX-0101廠家TX-0102廠家TX-0103廠家TX-0104廠家TX-0105廠家TX-0106……………………………..中山 0.725安圖0.446金豪0.196貝爾0.333ORTHO0.321安圖0.913貝爾 0.82華美0.504新創(chuàng)0.2中山0.34 新創(chuàng)0.428ORTHO 1.019科衛(wèi) 1.141吉比愛0.622中山0.22Murex0.395 華美0.715Murex 1.239Murex 1.233中山0.67貝爾0.24安圖0.52 科衛(wèi)1.012貝爾 1.553華美 1.405ORTHO0.743華美0.259華美0.597 中山1.06中山 1.965ORTHO 1.416Murex0.748科衛(wèi)0.275吉比愛1.016 Murex1.649華美 2.247安圖 1.42榮盛1.153萬泰0.321科衛(wèi)1.089 貝爾1.933科衛(wèi) 2.25三維 2.06貝爾1.214三維0.34三維1.253 金豪2.281吉比愛 3.783高達(dá) 2.326科衛(wèi)1.365高達(dá)0.406萬泰1.292 麗珠2.423萬泰 5.314麗珠 2.4新創(chuàng) 1.428ORTHO0.656ORTHO1.303 三維2.433榮盛 5.626萬泰 2.607麗珠 1.641麗珠0.705高達(dá)1.38 萬泰3.128三維 5.68新創(chuàng) 2.692三維1.853Murex1.115榮盛1.443 榮盛4.76高達(dá) 6.373榮盛 2.74高達(dá) 2.246吉比愛1.188麗珠1.729 高達(dá)5.113麗珠 6.382吉比愛 2.75金豪3.192安圖1.613新創(chuàng)2.007 安圖6.106新創(chuàng) 6.492金豪 4.67萬泰4.457榮盛1.793金豪2.168 吉比愛7.561金豪 9.519------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------第6頁/共40頁附件

線性范圍—系列稀釋樣本檢測結(jié)果-------------------------------------------------------------------------------------廠家系列-01系列-02系列-03系列-04稀釋度北京萬泰655622上海榮盛655622北京科衛(wèi)443415北京金豪665623珠海麗珠655622ORTHO323311Murex432211華大GBI555520英科新創(chuàng)665623現(xiàn)代高達(dá)655622濰坊三維555520安圖綠科433313北京貝爾434415中山生物554519河南華美332311……………….第7頁/共40頁附件批內(nèi)精密度—室內(nèi)質(zhì)控品檢測結(jié)果（s/co）-----------------------------------------------------------------廠家 平均值 SD CV（%）…………北京萬泰2.728 0.196 7.2上海榮盛2.472 0.132 5.3北京科衛(wèi)1.170 0.051 4.4北京金豪3.542 0.271 7.7珠海麗珠3.063 0.474 15.5ORTHO0.998 0.039 3.9Murex 1.123 0.122 10.9華大GBI3.988 0.298 7.5英科新創(chuàng)4.075 0.288 7.1現(xiàn)代高達(dá)2.607 0.088 3.4濰坊三維1.609 0.245 15.2安圖綠科1.489 0.356 23.9北京貝爾0.936 0.094 10.1中山生物1.567 0.212 13.5河南華美1.551 0.153 9.9-----------------------------------------------------------------第8頁/共40頁附件批間精密度—室內(nèi)質(zhì)控品檢測結(jié)果(s/co)-------------------------------------------------------------------廠家 T17CV(%)IQC-1CV(%)IQC-2CV(%)………….北京萬泰4.10 20.03 19.92上海榮盛7.55 7.79 11.25北京科衛(wèi)18.10 12.13 22.02北京金豪4.50 3.36 38.64珠海麗珠14.64 20.53 1.87ORTHO 8.74 14.71 14.99Murex 13.85 16.75 11.19華大GBI9.13 19.41 23.21英科新創(chuàng)12.51 17.18 22.68現(xiàn)代高達(dá)11.62 5.25 15.98濰坊三維4.47 8.75 6.97安圖綠科2.68 4.74 18.33北京貝爾33.23 22.51 19.27中山生物56.39 57.74 10.82河南華美49.96 16.38 25.78---------------------------------------------------------------第9頁/共40頁一、丙型肝炎實(shí)驗(yàn)室檢測方法學(xué)評價（四）5.金標(biāo)快速檢測試劑的評價結(jié)果（8家）1）敏感性82.5%-100%，特異性97.5%-100%。。2）4套系列稀釋血清盤的稀釋度1~23。3）分析特異性皆為100%。第10頁/共40頁附件系列稀釋樣本檢測結(jié)果--------------------------------------------------------------------------------廠家系列-01系列-02系列-03系列-04稀釋度北京藍(lán)十字444416上海榮盛333312中新科炬554519英科新創(chuàng)02035濰坊康華01001上海凱創(chuàng)656623珠海麗珠322310廣州萬浮01124-------------------------------------------------------------------------------第11頁/共40頁一、丙型肝炎實(shí)驗(yàn)室檢測方法學(xué)評價（五）

小結(jié)1.ELISA試劑1）多數(shù)試劑敏感性、特異性較高，適合我國一般人群篩查。2）個別試劑未檢出抗NS3抗體，所有試劑均能檢測出抗核心區(qū)抗體。3）國產(chǎn)抗-HCVELISA試劑的S/CO比值差異較大。4）個別試劑分析靈敏度較差。2.快速試劑1）多數(shù)試劑的特異性較高，個別試劑的敏感性較差。2）試劑性能相互之間有較大差異。第12頁/共40頁二、丙型肝炎感染的血清流行病學(xué)調(diào)查（一）１.2007-2008年中國部分人群HCV感染的血清流行病學(xué)調(diào)查1）調(diào)查對象及地區(qū)分布

吸毒人群（9600人）；云南、新疆、廣西。性病門診就診者（7821人）；北京、黑龍江、湖北、廣東。男男同性性接著觸者（670人）；山東。既往有償供血/漿者（6645人）；河南、山西、安徽。無償獻(xiàn)血者（10051人）；上述各省血液中心。

HIV感染者（1200）；河南、山西、黑龍江、湖北、云南。2）實(shí)驗(yàn)室檢測質(zhì)量控制

室內(nèi)質(zhì)控、能力驗(yàn)證（PT）、現(xiàn)場督導(dǎo)。第13頁/共40頁二、丙型肝炎感染的血清流行病學(xué)調(diào)查（二）3）結(jié)果(1)吸毒人群抗-HCV陽性率69.8%.

廣西、云南、新疆分別為85.5%、70.0%、53.9%.(2)既往有償供血/漿者(HIV陰性)抗-HCV陽性率26.4%

山西、湖北、河南分別為15.7%、15.2%、48.4%。(3)性病門診就診者抗-HCV陽性率0.4%.

北京、黑龍江、湖北、廣東分別為0.4%、0.5%、0.3%、0.4%.(4)男男同性性接著觸者（山東）抗-HCV陽性率1.8%.(5)無償獻(xiàn)血者抗-HCV陽性率0.4%.(6)HIV感染者抗-HCV陽性率64.5%

河南、山西、黑龍江、湖北、云南分別為92.3%、69.4%、20.6%、68.0%、46.0%.第14頁/共40頁二、丙型肝炎感染的血清流行病學(xué)調(diào)查（三）4）小結(jié)

靜脈吸毒人群是我國目前HCV感染的最主要高危人群。既往有償獻(xiàn)血/漿者HCV感染率處于較高水平。

性病門診就診者HCV感染率相對不高。

HIV陽性者中合并較高的HCV感染率。第15頁/共40頁二、丙型肝炎感染的血清流行病學(xué)調(diào)查（四）2.2009年全國丙型病毒性肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查1）調(diào)查對象

本次全國“丙型肝炎調(diào)查”檢測標(biāo)本為“2006年全國乙肝調(diào)查”保留的B管血清，實(shí)驗(yàn)室共檢測樣本78937人份，與“2006年全國乙肝調(diào)查”數(shù)據(jù)庫對接后，有效樣本78746人份用于數(shù)據(jù)分析。分布在全國31個?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市，未包括香港、澳門和臺灣地區(qū)）的160個疾病監(jiān)測點(diǎn)

2）實(shí)驗(yàn)室檢測流程3）實(shí)驗(yàn)室檢測質(zhì)量控制

第16頁/共40頁二、丙型肝炎感染的血清流行病學(xué)調(diào)查（五）4）結(jié)果(1)1～59歲人群HCV感染陽性率0.40%，調(diào)整陽性率0.43%（95%CI=0.33%～0.53%），

HCV感染陽性率隨年齡組的遞增呈上升趨勢（z=-10.92，p<0.001）。

第17頁/共40頁在調(diào)查1～59歲人群中，三個地區(qū)HCV感染陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.33，p=0.01）。東部地區(qū)HCV感染陽性率0.27%，調(diào)整陽性率0.37%（95%CI=0.21%～0.53%）；中部地區(qū)HCV感染陽性率0.54%，調(diào)整陽性率0.67%（95%CI=0.40%～0.94%）；西部地區(qū)感染HCV陽性率0.40%，調(diào)整陽性率0.31%（95%CI=0.20%～0.42%），第18頁/共40頁(3)1～59歲人群中，不同職業(yè)人群HCV感染陽性率不同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=56.52，p<0.0001）。

農(nóng)民HCV感染陽性率最高0.63%（調(diào)整陽性率0.68%,95%CI=0.47%～0.89%）,

散居兒童最低0.06%（調(diào)整陽性率0.05%,95%CI=0.00～0.12%）。(4)1～59歲人群中，性別間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.41,p=0.52)。

男性HCV感染陽性率0.41%，調(diào)整陽性率0.46%(95%CI=0.31%～0.61%)；女性HCV感染陽性率0.40%，調(diào)整陽性率0.40%(95%CI=0.27%～0.54%)，

第19頁/共40頁

(5)1～59歲人群中，不同民族HCV感染陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.17,p=0.40）。

維吾爾人群族HCV感染陽性率最高0.96%（調(diào)整陽性率0.29%,95%CI=0.03%～0.54%）,

藏族人群最低0.13%（調(diào)整陽性率0.05%,95%CI=0.00～0.13%）。(6)1～59歲人群中，不同文化程度人群HCV感染陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=21.36，p<0.001）。

文盲人群HCV感染陽性率最高0.74%（調(diào)整陽性率1.03%,95%CI=0.24%～1.83%）,

學(xué)齡前兒童最低0.08%（調(diào)整陽性率0.04%,95%CI=0.01%～0.08%）。第20頁/共40頁二、丙型肝炎感染的血清流行病學(xué)調(diào)查（六）5）小結(jié)

全國1～59歲人群HCV感染調(diào)整陽性率為0.43%，在全世界范圍內(nèi)我國丙型肝炎感染屬于較低水平，同時由此推算我國HCV感染者約650萬人。第21頁/共40頁三、丙型肝炎檢測策略的提出及臨床評估（一）參比實(shí)驗(yàn)室的評估

1）評估方法(1)依據(jù)方法學(xué)評價結(jié)果，結(jié)合實(shí)際工作，選取試劑（敏感性大于99%、特異性大于95%）用于HCV檢測策略研究。(2)根據(jù)感染途徑分四類人群（感染率不同），共篩選402份樣品。采用8種抗-HCVELISA試劑檢測樣品，任一陽性樣品采用CHIRONRIBAHCV進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)，確認(rèn)每份樣品抗-HCV情況。(3)分析探討不同試劑的各自特定S/CO比值（樣品S/CO≥特定S/CO比值，則該試劑檢測結(jié)果陽性符合率≥95%）。(4)按照假設(shè)的不同檢測策略，分析各策略判讀的檢測結(jié)果與樣品的真實(shí)結(jié)果的差異，計(jì)算敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值評價指標(biāo)；并按照不同人群，對各檢測策略評價指標(biāo)進(jìn)行比較。采用秩和檢驗(yàn)分析不同檢測策略的評價指標(biāo)。第22頁/共40頁三、丙型肝炎檢測策略的提出及臨床評估

（二）2）評估結(jié)果

總?cè)巳杭胺治救巳?、性病門診人群、既往獻(xiàn)血人群、義務(wù)獻(xiàn)血人群的評價

(1)單一試劑檢測策略的評價(2)兩種試劑平行檢測策略的評價(3)兩種試劑順序檢測策略的評價(4)S/CO比值替代檢測策略的評價(5)三種試劑檢測策略的評價評價指標(biāo)：敏感性、特異性、陰性預(yù)期值、陽性預(yù)期值。第23頁/共40頁三、丙型肝炎檢測策略的提出及臨床評估

（三）3）小結(jié)

(1).本次研究提示單一試劑檢測策略可用于人群監(jiān)測。

(2).單一試劑檢測策略的敏感性較高，特異性較低（低感染率）。

(3).平行檢測和順序檢測在四項(xiàng)指標(biāo)方面無顯著性差異。

(4).S/CO替代策略的陽性預(yù)測值顯著大于其他策略，敏感性則較低（高感染率）。

(5).替代策略因陽性符合率為95%時對應(yīng)的S/CO比值，國產(chǎn)試劑差異較大，不建議針對不同國產(chǎn)試劑做出有關(guān)S/CO比值的統(tǒng)一規(guī)定。S/CO替代策略用于臨床診斷時，應(yīng)考慮各試劑S/CO比值差異較大這一因素。

(6).三種試劑檢測的陽性預(yù)測值均高于單一檢測試劑、平行檢測和順序檢測，但低于S/CO比值替代策略。

(7).各策略的國產(chǎn)試劑組合與國產(chǎn)和進(jìn)口試劑組合在檢測能力方面無顯著差異。第24頁/共40頁三、丙型肝炎檢測策略的提出及臨床評估

（四）2.臨床實(shí)驗(yàn)室大樣本的現(xiàn)場評估1)評估現(xiàn)場地區(qū)：黑龍江、廣西、四川、陜西。2)評估樣本人群：吸毒、腎透析、醫(yī)院侵入性診療、性病門診就診者、無償獻(xiàn)血體檢。3)評估指標(biāo)：根據(jù)樣本的真實(shí)感染狀況計(jì)算檢測策略的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值。4)評估策略：監(jiān)測策略、診斷策略、S/CO比值替代策略。5）實(shí)驗(yàn)室檢測質(zhì)量控制第25頁/共40頁三、丙型肝炎檢測策略的提出及臨床評估（五）策略1樣品陰性反應(yīng)初篩試驗(yàn)陽性反應(yīng)復(fù)檢試驗(yàn)陰性反應(yīng)陽性反應(yīng)篩查試劑-1圖1HCV感染疫情報(bào)告的檢測流程報(bào)告抗-HCV陰性報(bào)告抗-HCV陽性篩查試劑-2第26頁/共40頁三、丙型肝炎檢測策略的提出及臨床評估（六）策略2篩查試劑樣品陰性反應(yīng)初篩試驗(yàn)陽性反應(yīng)復(fù)檢試驗(yàn)均陰性反應(yīng)一陰一陽均陽性反應(yīng)補(bǔ)充試驗(yàn)原有試劑雙孔或原有試劑加另一種不同原理（或廠家）試劑圖2臨床診斷篩查檢測流程報(bào)告抗-HCV陰性第27頁/共40頁三、丙型肝炎檢測策略的提出及臨床評估（七）策略2復(fù)檢陽性樣品陽性反應(yīng)免疫印跡試驗(yàn)陰性反應(yīng)圖3臨床診斷補(bǔ)充試驗(yàn)檢測方法-1流程不確定報(bào)告抗-HCV不確定報(bào)告抗-HCV陰性報(bào)告抗-HCV陽性第28頁/共40頁三、丙型肝炎檢測策略的提出及臨床評估（八）策略3初/復(fù)檢陽性樣品樣品不確定免疫印跡試驗(yàn)陰性反應(yīng)圖4臨床診斷補(bǔ)充試驗(yàn)檢測方法-2流程陽性反應(yīng)根據(jù)S/CO值判斷高S/CO值低S/CO值報(bào)告抗-HCV陽性報(bào)告抗-HCV陰性報(bào)告抗-HCV不確定第29頁/共40頁四、丙型肝炎實(shí)驗(yàn)室檢測能力驗(yàn)證（PT）1.PT方法

1)依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)：

2)PT方式：

3)PT樣品：

4)預(yù)期結(jié)果的確定：

5)評定方法（PT得分）：第30頁/共40頁四、丙型肝炎實(shí)驗(yàn)室檢測能力驗(yàn)證（PT）2.參加單位

參加單位來自全國31個省、自治區(qū)、直轄市的324家艾滋病檢測確證實(shí)驗(yàn)室（疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)274家、檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)24家、醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)16家、軍隊(duì)系統(tǒng)4家、公安系統(tǒng)1家、血液系統(tǒng)3家、臨檢中心1家、高校1家）。

第31頁/共40頁四、丙型肝炎實(shí)驗(yàn)室檢測能力驗(yàn)證（PT）3.實(shí)驗(yàn)室PT成績(抗-HCVELISAPT)…………………年度100分90—99分80—89分80分以下90分以上（%）………….2011242611591.7201021951796.6200917191397.82008902249420073511