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'.外周血白細胞的分離：(細胞分離液有市售，有各種型號：白細胞、1>取3ml正常人的外周血(枸櫞酸鈉抗凝)與等體積pbs混勻后小2>吸取中間云霧狀白細胞，加3－4mlPBS后3000r/min離心103>棄上清，加1mlPBS洗滌沉淀后，將細胞懸液轉(zhuǎn)移至1.5mLEpinminEDTA7克；用三蒸水配成1升堅守無菌操作原則2.分層后的確有3層，準確說來是4層，最下面是紅細胞，上面的一層不應(yīng)該是稍微混濁的白色，應(yīng)該也不是很難的，比較基本人外周血,肝素抗凝(100U?ml),等量無血清培養(yǎng)液(或者PBS等緩沖液)稀釋。按1∶2的體積比緩置mlg30min,收集培養(yǎng)液2分離液界面上的單個核細胞。于無血清培養(yǎng)液,400離心10min,洗滌2次。數(shù)一外周血白細胞的分離1>取3ml正常人的外周血(枸櫞酸鈉抗凝)與等體積pbs混勻后小心的加于6ml白細胞分離液((33.9%泛影葡胺和9%Ficoll液按1：2.4體積比混合))液面上，1500r/min離心20min。(或先將抗凝血離心，然后吸取中間白細胞層，再混以等體積pbs然后小心加于等體積細胞分離液液面上，離心同上)2>吸取中間云霧狀白細胞，加3－4mlPBS后3000r/min離心10min。3>棄上清，加1mlPBS洗滌沉淀后，將細胞懸液轉(zhuǎn)移至1.5mLEp管中。4>3000r/min離心20min，棄上清。二自然沉降法降率的分離法，採集血液後應(yīng)及時抗凝，通常選用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血纖維蛋白原形成纖維蛋白而防止血液凝固。操作原則是將含抗凝血的試管直立靜置室溫30

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