NY/T××××—××××IICS：01.040.65CCS：B40/49DB13河北省市場監(jiān)督管理局發(fā)布202ICS：01.040.65CCS：B40/49DB13河北省市場監(jiān)督管理局發(fā)布2023-XX-XX實(shí)施2023-XX-XX發(fā)布機(jī)械化籠養(yǎng)肉雞舍清洗消毒效果評價技術(shù)規(guī)程（網(wǎng)上征求意見稿）DB13/TXXXX—2023河北省地方標(biāo)準(zhǔn)DB13/Txxxx—2023PAGEPAGE2前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1－2020給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由河北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河北省畜牧獸醫(yī)研究所河北農(nóng)業(yè)大學(xué)保定市畜牧工作站河北玖興農(nóng)牧發(fā)展有限公司秦皇島中紅三融畜禽有限公司河北灤牧農(nóng)業(yè)開發(fā)股份有限公司河北恩康牧業(yè)有限公司本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王學(xué)靜、李牧、盧金河、許利軍、李茜、陳立功、邵麗瑋、王飛、陶嶸、高磊、李麒麟、石銳利、楊永柏、平凡、魏忠華、馮志華、王俊杰、周云升、郭常春、田彪機(jī)械化籠養(yǎng)肉雞舍清洗消毒效果評價技術(shù)規(guī)程1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了機(jī)械化籠養(yǎng)肉雞養(yǎng)殖空欄期清洗消毒效果的檢測及評估等技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于規(guī)模化肉雞場空欄期清洗消毒效果的檢測及評估，其他類型雞場清洗消毒效果檢測及評估可參考執(zhí)行。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T18883-2022室內(nèi)空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)GB/T36004-2018食品接觸表面清洗消毒效果試驗(yàn)方法三磷酸腺苷生物發(fā)光法3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1空欄期是指從上一批雞全部轉(zhuǎn)出后，至下一批雞轉(zhuǎn)入前這一非飼養(yǎng)期階段。3.2空氣浮游菌六級撞擊采樣法根據(jù)顆粒撞擊原理和等速采樣理論設(shè)計(jì)，采用篩孔撞擊式六級空氣微生物采樣器，在抽氣泵作用下，空氣經(jīng)高速噴射并撞擊到裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿上，經(jīng)培養(yǎng)后形成菌落予以計(jì)數(shù)。3.3接觸碟法接觸碟法是將充滿規(guī)定的瓊脂培養(yǎng)基的接觸碟對規(guī)則表面或平面取樣，然后置于合適的溫度下培養(yǎng)一定時間并計(jì)數(shù)，每碟取樣面積約為25cm2，微生物計(jì)數(shù)結(jié)果以cfu/碟報告。3.4ATP（三磷酸腺苷）生物發(fā)光檢測法利用螢火蟲發(fā)光原理與微生物的數(shù)量和微生物所含的ATP有明確的相關(guān)性，通過檢測ATP含量，間接反應(yīng)微生物數(shù)量。單位以相對光單位RLU表示。4舍內(nèi)衛(wèi)生指標(biāo)要求4.1表觀衛(wèi)生清潔要求肉雞舍清洗后表觀衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)參見表1。表1表觀衛(wèi)生清潔標(biāo)準(zhǔn)合計(jì)評分清潔水平＝0良好＞0且≤2合格＞2不合格4.2表面潔凈度要求4.2.1ATP法評價標(biāo)準(zhǔn)雞舍清洗后表面潔凈度要求（ATP法評價標(biāo)準(zhǔn)）見表2。表2清洗后舍內(nèi)表面潔凈度要求（ATP法評價標(biāo)準(zhǔn)）單位：RLU等級籠具水線網(wǎng)墊料槽墻面地面合格＜300＜300＜150＜300＜150＜1500警告300－1500300－1500150－1500300－1500150－15001500－3500不合格＞1500＞1500＞1500＞7500＞1500＜4500雞舍消毒后表面潔凈度要求（ATP法評價標(biāo)準(zhǔn)）見表3。表3消毒后舍內(nèi)表面潔凈度要求（ATP法評價標(biāo)準(zhǔn)）單位：RLU等級籠具水線網(wǎng)墊料槽墻面地面合格＜100＜100＜50＜100＜50＜500警告100－500100－50050－500100－50050－500500-2500不合格＞500＞500＞500＞500＞500＞25004.2.2接觸碟法評價標(biāo)準(zhǔn)雞舍清洗后表面潔凈度要求（接觸碟法評價標(biāo)準(zhǔn)）見表4。表4清洗后舍內(nèi)表面潔凈度要求（接觸碟法評價標(biāo)準(zhǔn)）單位：cfu/碟等級籠具水線網(wǎng)墊墻面地面料槽合格＜50＜30＜30＜30＜150＜100警告50-25030-15030-15030-150150－多不可數(shù)100－200不合格＞250＞150＞150＞150多不可數(shù)＞200雞舍消毒后表面潔凈度要求（接觸碟法評價標(biāo)準(zhǔn)）見表5。表5消毒后舍內(nèi)表面潔凈度要求（接觸碟法評價標(biāo)準(zhǔn)）單位：cfu/碟等級籠具水線網(wǎng)墊墻面地面料槽合格＜2＜2＜2＜2＜50＜2警告2-52-52-52-550-2502-5不合格＞5＞5＞5＞5＞250＞54.3舍內(nèi)空氣細(xì)菌數(shù)量評價標(biāo)準(zhǔn)雞舍清洗或消毒后舍內(nèi)細(xì)菌數(shù)量評價標(biāo)準(zhǔn)見表6。表6清洗及消毒后舍內(nèi)空氣細(xì)菌數(shù)量評價標(biāo)準(zhǔn)單位：cfu/m3等級指標(biāo)清洗晾干后消毒后24h合格細(xì)菌總數(shù)＜100＜50警告細(xì)菌總數(shù)100-20050－100不合格細(xì)菌總數(shù)＞200＞1005測定方法依次按照目測法、表面潔凈度測定法、雞舍空氣微生物測定法對雞舍清洗消毒效果開展評價。5.1目測法5.1.1采樣確定墻壁底部、通風(fēng)設(shè)備、料槽、水線管道、傳送帶、籠具、地面、屋頂為主要采樣部位，雞舍每個部位隨機(jī)選擇5個采樣點(diǎn)，每個采樣點(diǎn)連續(xù)觀察2次。5.1.2測定參照附表2填寫附表1，計(jì)算各部位平均得分，并合計(jì)，作為雞舍整體衛(wèi)生得分。5.1.3評價依據(jù)4.1要求，確定雞舍表觀衛(wèi)生情況。合格水平以上可進(jìn)一步進(jìn)行雞舍表面及空氣微生物指標(biāo)測定，判定清洗效果，一般及以下水平，建議重新清洗。5.2雞舍表面潔凈度測定法根據(jù)生產(chǎn)需求，在雞舍表觀衛(wèi)生情況合格及以上水平清洗或消毒后，可采用ATP法或接觸碟法進(jìn)行表面潔凈度測定。5.2.1ATP法5.2.1.1采樣確定籠具、水線、料槽、墻面、地面為主要采樣部位，每個采樣部位隨機(jī)設(shè)定3個采樣點(diǎn)，每個采樣點(diǎn)采集數(shù)據(jù)2次，計(jì)算平均值。5.2.1.2測定雞舍清洗晾干或消毒24小時后，利用手持式ATP檢測儀對不同采樣點(diǎn)進(jìn)行采樣，每個采樣點(diǎn)利用ATP采樣試子選擇邊長5cm正方形區(qū)域進(jìn)行全部涂抹，具體操作參照GB/T36004-2018中規(guī)定的手持式ATP生物發(fā)光檢測儀涂抹法執(zhí)行。5.2.1.3評價依據(jù)4.2.1要求，ATP清洗結(jié)果各部位均達(dá)合格后，才能進(jìn)行消毒，不合格重新進(jìn)行清洗或部分整頓；ATP消毒結(jié)果各部位標(biāo)準(zhǔn)均達(dá)合格后才能進(jìn)雞。5.2.2接觸碟法5.2.2.1采樣采樣方法參照5.2.1.1規(guī)定執(zhí)行。一般采用φ55cmTSA無菌接觸碟?？勺孕匈徶?，也可自行按照瓊脂培養(yǎng)基說明書進(jìn)行配制。5.2.2.2測定待雞舍清洗晾干或消毒24小時后，打開接觸碟碟蓋，無菌培養(yǎng)基表面與被取表面直接接觸，均勻按壓接觸碟底板8~10秒，取樣后，蓋上接觸碟蓋子，放置培養(yǎng)箱36℃±1℃培養(yǎng)48h使用細(xì)菌計(jì)數(shù)器測量，記錄，求平均值。取樣部位立即用75%酒精擦拭被取樣表面，以除去殘留瓊脂。5.2.2.3評價將平均值與4.2.2規(guī)定的數(shù)值進(jìn)行比對，各部位清洗標(biāo)準(zhǔn)均達(dá)合格后，才能下一步消毒工作，不合格重新進(jìn)行清洗；消毒標(biāo)準(zhǔn)達(dá)合格后才能進(jìn)雞。5.3雞舍空氣微生物測定法5.3.1采樣參照GB/T18883-2022《室內(nèi)空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》進(jìn)行點(diǎn)位布設(shè)，采樣高度原則上與雞生活的高度相一致，檢測點(diǎn)避開通風(fēng)口。5.3.2測定可采用JWL-6篩孔撞擊式六級微生物采樣器或手持式單級撞擊式采樣器，將懸浮在空氣中的細(xì)菌采集到營養(yǎng)瓊脂平板上，經(jīng)36℃±1℃、48h培養(yǎng)后得到細(xì)菌菌落數(shù)的測定方法，按以下公式計(jì)算每立方米空氣中所含的細(xì)菌菌落數(shù)。采樣時間可設(shè)三個梯度，便于瓊脂平板細(xì)菌可數(shù)。所涉及瓊脂平板制作同5.2.2.1要求。所有所有平皿菌落數(shù)空氣中微生物數(shù)量（cfu/m3）=×1000采樣時間（min）×采樣流量（L/min）5.3.3評價參照4.3舍內(nèi)空氣微生物要求對比，空氣中細(xì)菌數(shù)量清洗條件達(dá)合格，才能進(jìn)行消毒，消毒后空氣中微生物數(shù)量達(dá)合格才能進(jìn)雞。6記錄保存記錄批次清洗或消毒后評價結(jié)果，以便于生產(chǎn)復(fù)盤。記錄保存至少二年。附表1衛(wèi)生打分表項(xiàng)目采樣點(diǎn)1采