蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測目錄1前言…………………11.1農(nóng)藥殘留概述……………………11.2農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留快速檢測現(xiàn)狀………………21.3課題研究的目的和意義………41.4檢測原理………………………42實驗部分……………62.1材料和方法……………………62.1.1儀器設(shè)備…………………62.1.2試劑及材料………………62.2氣相色譜分析條件……………72.2.1檢測有機磷類農(nóng)藥檢測色譜分析條件…………………62.2.2檢測有機磷類農(nóng)藥檢測色譜分析條件…………………62.3有機磷類農(nóng)藥檢測樣品前處理………………72.3.1樣品的提取………………72.3.2提取物的凈化與濃縮……………………82.4有機氯類農(nóng)藥檢測樣品前處理………………82.4.1樣品制備與提取…………82.4.2樣品凈化…………………83結(jié)果與討論…………93.1有機磷類農(nóng)藥檢測的結(jié)果與討論…………………93.1.1樣品前處理條件的選擇…………………93.1.2色譜分析…………………93.1.3方法最低檢測濃度………93.1.4標準曲線的測定…………103.1.5目標化合物色譜保留時間的影響實驗…………103.1.6不同蔬菜樣品中加標實驗………………113.2有機氯類農(nóng)藥檢測的結(jié)果與討論…………………123.2.1色譜分離情況……………123.2.2色譜分析條件的確定……………………123.2.3方法的回收率及精密度、標準曲線……133.2.4樣品測試結(jié)果……………154結(jié)論與展望………………………161前言1.1農(nóng)藥殘留概述農(nóng)藥自從應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)以來，就給人類帶來巨大的經(jīng)濟利益。但是，農(nóng)藥的大量使用也使害蟲的天敵受到摧殘，使害蟲的危害加大，從而使農(nóng)業(yè)生產(chǎn)更增加了對農(nóng)藥的依賴。而且隨著農(nóng)藥品種和用量的不斷增加，農(nóng)藥在食品和環(huán)境中的殘留問題、安全問題越來越突出。隨著人們環(huán)境意識的不斷加強，由農(nóng)藥殘留引起的食品安全問題與環(huán)境問題也越來越受到人們的關(guān)注。人們在長期的生活和生產(chǎn)實踐過程中逐漸認識到一些天然物質(zhì)具有防治農(nóng)牧業(yè)有害生物的性能，到17世紀以后又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了一些真正具有實用價值的農(nóng)用藥物。在公元前曾使用的天然農(nóng)藥有硫磺、含砷礦物和防蟲植物如嘉草、莽草、牡鞠、藜蘆、附于和干艾等。在19世紀70年代使用的殺蟲、殺菌劑有硫磺、白砒等，至17世紀在民間使用多年的煙草、除蟲菊和魚藤三種植物先后被加工成為農(nóng)藥使用。在這三種農(nóng)藥中除蟲菊素后來作為先導化合物對人工合成擬除蟲菊脂類農(nóng)藥起了重要作用。作為農(nóng)藥大規(guī)模發(fā)展的歷史，大致可從20世紀40年代來劃分。在20世紀40年代以前，是以天然藥物及無機化合物農(nóng)藥為主的天然和無機藥物時代；20世紀40年代以來出現(xiàn)了大量有機合成農(nóng)藥，它們具有類型多、藥效高、對作物安全、應(yīng)用范圍寬等特點。無機農(nóng)藥因無法與之競爭而用量銳減，農(nóng)藥進入了有機合成時代[1]。在討論農(nóng)藥的環(huán)境污染問題時，主要是指化學農(nóng)藥。所謂化學農(nóng)藥，一般是指用于防治農(nóng)、林、牧業(yè)中的病、蟲、草、鼠害和其他有害生物(含衛(wèi)生害蟲)以及調(diào)節(jié)植物生長的藥物及加工制劑。按照農(nóng)藥的主要防治對象、作用方式、來源和化學結(jié)構(gòu)可以將農(nóng)藥分為不同的類型[2]。如圖1-1所示。圖1-1農(nóng)藥的分類農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥使用后殘存于生物體、農(nóng)副產(chǎn)品和環(huán)境中的農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱，殘存的數(shù)量稱為殘留量。田間噴灑的農(nóng)藥只有10%粘附在作物上，其它大部分通過各種方式撒播出去，污染大氣、土壤和水等。在一般情況下農(nóng)藥殘留主要是指農(nóng)藥原體的殘留量和具有比原體毒性更高或相當毒性的降解物的殘留量，具體大小與多種因素有關(guān)。農(nóng)藥污染及其產(chǎn)生的危害后果是嚴重的。農(nóng)藥對大氣、土壤和水體污染，對環(huán)境質(zhì)量的影響與破壞，尤其是地下水污染問題已引起廣泛重視；農(nóng)藥污染的生態(tài)效應(yīng)十分深遠，尤其是對生物多樣性保護的影響；農(nóng)藥也危害人體健康，尤其是三致作用和對人類生殖性能的影響等[3-5]。1.2農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留快速檢測現(xiàn)狀農(nóng)藥殘留分析一般分為單殘留分析、多殘留分析。多殘留分析通常又分為單類型多殘留分析、多類型多殘留分析和未知樣本農(nóng)藥多殘留分析。農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測主要是后兩種[6]。隨著人們生活水平的不斷提高和我國加人WTO后國際貿(mào)易的迫切要求，21世紀我國農(nóng)業(yè)將由數(shù)量型向質(zhì)量型轉(zhuǎn)變，對農(nóng)產(chǎn)品安全生產(chǎn)和質(zhì)量控制更加嚴格。控制農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留對人體的危害，除嚴格限制使用高毒、高殘留農(nóng)藥外，對農(nóng)藥殘留實施快速檢測是行之有效的辦法，這在歐美發(fā)達國家已經(jīng)制度化，有效地控制了農(nóng)藥殘留量超標的農(nóng)產(chǎn)品的銷售和食用。我國農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)相對分散，而且使用的農(nóng)藥種類繁多[7]。因此，選擇一種合適的分析方法顯的尤為重要。目前，農(nóng)藥殘留分析一般分為兩大步驟，樣品前處理與檢測。樣品前處理主要為提取和凈化。它們對樣品測定結(jié)果的準確可靠起著十分重要的作用。（1）農(nóng)藥的提取：其目的是將蔬菜中的農(nóng)藥殘留從樣品中分離出來，并盡量減少其它組分的提出。目前主要是采用各種適宜的有機溶劑對蔬菜樣品中的農(nóng)藥進行提取，采用的方法主要有萃取法、振蕩法、浸漬法、索氏提取法、超聲提取法等，應(yīng)用較多的是有機溶劑萃取法和超聲法，尤其是后者，具有快速、簡便、所需樣品量少和提取效果好等特點[8]。選擇提取溶劑時應(yīng)考慮以下兩方面：A.溶劑的純度：農(nóng)殘分析中所應(yīng)用的溶劑較特殊，它必須經(jīng)過處理并在色譜條件下檢驗不含雜質(zhì)峰。通常采用全玻璃蒸餾裝置對提取溶劑進行重蒸餾，收集溶劑沸程之餾分，取樣品測定操作中需要接受溶劑總量的5倍濃縮至測定體積，按色譜條件進樣，色譜測定時間內(nèi)不應(yīng)有雜質(zhì)峰或僅出現(xiàn)少量不干擾農(nóng)藥測定的雜質(zhì)峰。B.溶劑的極性：通常采用相似相溶原理來選擇溶劑，一般情況下非極性或弱極性的農(nóng)藥應(yīng)選擇低極性溶劑提取[9]，如六六六、滴滴涕等應(yīng)選擇石油醚、正己烷等溶劑；極性較強的農(nóng)藥如有機磷、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥應(yīng)選擇如二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮等極性較大的溶劑，依據(jù)提取效果使用單一或混合溶液提取。其中，丙酮是比較理想的溶劑，對不同極性的農(nóng)藥都有很好的提取效果，應(yīng)用較為廣泛。（2）樣品提取液的凈化：采用有機溶劑對樣品中農(nóng)藥進行提取后，往往有許多其它成分不可避免地一并提出，提取液不能直接用于氣相色譜測定。樣品凈化目的就是要有效除去提取液中對農(nóng)藥測定的干擾物質(zhì)，以滿足樣品氣相色譜分析的要求。目前采用的凈化方法主要有液液萃取法、Florisil硅土柱層析、氧化鋁柱層析以及化學方法如硫酸磺化法等。它們各有特點：液液萃取法經(jīng)濟、實用；各種柱層析法凈化效果好，可以測定多種農(nóng)藥；而磺化法操作簡單，凈化效果滿意，但測定樣品僅限于六六六、滴滴涕和五氯硝基苯等少數(shù)耐酸有機氯農(nóng)藥品種，不能滿足當前對重要質(zhì)量控制的迫切需要[10]。實際工作中應(yīng)根據(jù)測定的具體要求及環(huán)境客觀情況選擇適宜的凈化方法。農(nóng)藥殘留分析已經(jīng)由原先的單殘留分析(SRMs)發(fā)展到多殘留分析(MRMs)。目前，絕大部分農(nóng)藥殘留分析檢測是利用氣相色譜法。氣相色譜是近代儀器分析方法之一，具有高選擇性，高效能，高靈敏度以及速度快等優(yōu)點，所以應(yīng)用廣泛[11]。另外氣相色譜儀器價格相對低廉，能同時分離分析多組分混合物，使它在分析化學中占有重要的地位。由于具有不同分離能力的氣相色譜的發(fā)展，多種農(nóng)藥可以一次進樣，得到完全的分離和定性、定量的測定。又由于近年來各種高性能檢測器的出現(xiàn)，低至ppb級的農(nóng)藥殘留很容易被檢測出來，雜質(zhì)干擾問題也大大減少或消除。氣相色譜儀的檢測器具有各種不同的靈敏度和選擇性種類，通過靈活應(yīng)用這些檢測器，可以用于各種試樣的分析。1.3課題研究的目的和意義我國是一個農(nóng)業(yè)大國，每年平均發(fā)生病蟲害18×109hm2以上，施用農(nóng)藥防治面積為15×109hm2[12]。隨著化學農(nóng)藥種類的不斷增多，濫用、誤用農(nóng)藥問題日趨嚴重，造成蔬菜、水果產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留大大超出國家或國際規(guī)定的標準，致使農(nóng)藥急性中毒和慢性中毒的事件屢有發(fā)生。中國已經(jīng)加入世貿(mào)組織(WTO)，農(nóng)產(chǎn)品走出國門，其農(nóng)藥殘留量必須達到A級(國際WHO標準)或允許值范圍。這對農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量、農(nóng)藥的使用和生產(chǎn)方面無疑是一個嚴峻的挑戰(zhàn)。減少農(nóng)藥污染和對人類及環(huán)境的危害是保證我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展的需要。農(nóng)產(chǎn)品各種殘留農(nóng)藥中，以有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留超標最為嚴重，危害也最大。本課題研究的目的是氣相色譜儀對周邊農(nóng)貿(mào)市場和超市中的部分蔬菜中的有機磷類農(nóng)藥殘留進行檢測，同時確定此類農(nóng)藥殘留檢測最佳檢測條件。1.4檢測原理利用試樣中各組份在氣相和固定液液相間的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同，使用外力使含有樣品的流動相（氣體、液體）通過一固定于柱中或平板上，與流動相互不相溶的固定相表面，當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時，混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用，由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強弱不同，隨著流動相的移動，混合物在兩相間經(jīng)過反復多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中先后流出，進入檢測器，產(chǎn)生的離子流訊號經(jīng)放大后，在記錄器上描繪出各組份的色譜峰，實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。2實驗部分2.1材料和方法2.1.1儀器設(shè)備Agilent6890N氣相色譜儀?；鹧婀舛葯z測器(FPD)，Shimadzu電子捕獲檢測器（ECD），色譜柱HP-5石英毛細管色譜柱30mx0.25mm(0.32mm)x0.25m。凝膠凈化柱：長30cm；內(nèi)徑2．5cm，具活塞玻璃層析柱，柱底墊少許玻璃棉。用洗脫劑乙酸乙酯-環(huán)己烷(1：1)浸泡的凝膠以濕法裝入柱中。柱床高約26cm，膠床始終保持在洗脫液中。載氣為高純度氮氣（99.999%），輔助氣體為高純度氫氣（99.999%）（溫州特種氣體廠）和經(jīng)干燥后的壓縮空氣超聲波提取器；電動振蕩器；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；具塞錐形瓶，250ml；分液漏斗250ml;臺式離心機(4000/min以上)；旋渦式振蕩器；加樣槍(200ul～1000ul；50ul～500ul；5ul～40ul;)槍頭用前以丙酮處理2.1.2試劑及材料試劑：乙腈化學純天津四友化學試劑廠乙酸乙酯色譜純天津四友化學試劑廠環(huán)己烷色譜純天津四友化學試劑廠丙酮色譜純天津四友化學試劑廠氯化鈉分析純天津市化學試劑五廠石油醚分析純天津四友化學試劑廠正己烷色譜純天津四友化學試劑廠無水硫酸鈉分析純天津四友化學試劑廠凝膠：Bio-BeadsS-X3200～400目農(nóng)藥標準品：有機磷類：敵敵畏，氧化樂果，殺螟硫磷，甲胺磷，馬拉硫磷由農(nóng)業(yè)部環(huán)境監(jiān)測總站提供。標準溶液的配制：分別準確稱取各農(nóng)藥標準品。用少量苯溶解。再以正己烷稀釋成一定濃度的儲備液。根據(jù)各農(nóng)藥在儀器上的響應(yīng)情況，以丙酮配制混合標準工作液。有機氯類：α-六六六、γ-六六六、δ-六六六；β-六六六、P，P’-DDE、O，P’-DDT、P，P’-DDD、P，P’-DDT，六氯苯，氧氯丹，狄氏劑，環(huán)氧七氯等12種有機氯農(nóng)藥標準品農(nóng)業(yè)部環(huán)境監(jiān)測總站提供。標準溶液的配制：分別準確稱取各農(nóng)藥標準品。用少量苯溶解。再以正己烷稀釋成一定濃度的儲備液。根據(jù)各農(nóng)藥在儀器上的響應(yīng)情況，以正己烷配制混合標準工作液。蔬菜樣品為附近農(nóng)貿(mào)市場所購2.2氣相色譜分析條件2.2.1檢測有機磷類農(nóng)藥檢測色譜分析條件色譜柱：HP-5石英毛細管色譜柱(30m×0.25mm×0.33μm)；流速：載氣(N2)3.0ml/min。氫氣4.0ml/min，空氣70ml/min，尾吹氣20ml/min；不分流進樣；進樣量：1μL；進樣口溫度：250℃；色譜柱升溫程序：初始溫度80℃，保持1min，以20℃/min升至140℃，以13℃/min升至230℃，保持1min，再以20℃/min升至250℃，保持5.5min；定量方法：以保留時間定性。以峰面積外標法定量。2.2.2檢測有機氯類農(nóng)藥檢測色譜分析條件色譜柱：HP-5石英毛細管色譜柱(30m×0.25mm×0.33μm)載氣，高純氮氣；程序升溫，初溫60℃，保持0.5min，以30℃/min的速率升至150℃，再以2℃/min的速率升至250℃，保持5min；進樣量1μL，進樣口溫度250℃；進樣0.8min后，分流流量60ml/min；載氣流速10ml/min；ECD基座溫度250℃；檢測器溫度300℃以保留時間定性，外標法定量。2.3有機磷類農(nóng)藥檢測樣品前處理2.3.1樣品的提取將蔬菜樣品打成勻漿，稱取10.0g于50ml離心管中，加入20ml乙腈，搖勻后超聲提取10min，向離心管中加入飽和氯化鈉5ml。再超聲提取10min.3000r/min離心5min，將上清液移入錐形瓶中。殘渣重復提取1次，合并提取液。提取液在氮氣吹干儀上50℃吹干。加入乙酸乙酯一環(huán)己烷混合溶液(體積比為1:1)1ml溶解殘渣。2.3.2提取物的凈化與濃縮在具活塞玻璃層析柱下端墊少許脫脂棉，將用乙酸乙酯—環(huán)己烷混合溶液(體積比為1：1)浸泡過夜的凝膠以濕法裝柱。將樣品提取物溶液加到已準備好的凝膠層析柱上，用乙酸乙酯—環(huán)己烷混合溶液(體積比為1：1)洗脫，流速為40滴/min。最初的30ml洗脫液棄去。再接收25ml洗脫液，于氮氣流下50℃吹干，用丙酮定容1.00ml，進樣測定。層析柱用20m1洗脫液沖洗，可凈化下一個樣品提取溶液。2.4有機氯類農(nóng)藥檢測樣品前處理2.4.1樣品制備與提取市場上購買新鮮蔬菜樣品，去除雜質(zhì)后，用食品攪碎機攪碎混勻，稱取20.0g置于200mL具塞三角瓶中，加水15mL，加140mL丙酮，振搖30min，加氯化鈉6g，充分搖勻，再加30mL石油醚，振搖30min。經(jīng)無水硫酸鈉靜置過夜后取35mL上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，濃縮至約lmL。加12mL乙酸乙酯—環(huán)己烷(1：1)溶液再濃縮。如此重復3次。濃縮至約lmL。2.4.2樣品凈化使用長30cm，內(nèi)徑2.5cm的凝膠凈化柱，具活塞玻璃層析柱,柱底墊少許玻璃棉,用洗脫劑乙酸乙酯-環(huán)己烷(1：1)浸泡的凝膠以濕法裝人柱中，柱床高約26cm。膠床始終保持在洗脫液中。將上述濃縮液經(jīng)凝膠柱以乙酸乙酯-環(huán)己烷(1：1)溶液洗脫。棄去0～35mL流分。收集35～70mL流分。將其旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至約lmL。用氮氣吹除溶劑。以正己烷定容至lmL，進樣。3結(jié)果與討論3.1有機磷類農(nóng)藥檢測的結(jié)果與討論3.1.1樣品前處理條件的選擇（1）樣品的提取有機磷農(nóng)藥極性強，根據(jù)相似相溶原理，在二氯甲烷、乙醚、石油醚等有機溶液中有較好的溶解度，但考慮到蔬菜中含有大量的水分，為了保證農(nóng)藥的充分提取。觀察二氯甲烷、乙醚、乙酸乙脂及丙酮一正己烷混合提取液(體積比為1：1)的提取效果，其中乙腈、丙酮—正己烷提取效果好，乙腈則操作上更簡化。樣品提取過程在50ml離心管中進行。充分提取后。直接通過離心分離提取液，不用再轉(zhuǎn)移溶液，使樣品提取更加充分，并簡化操作。（2）樣品的濃縮采用全自動氮氣吹干儀，自動控溫，保證樣品于氮氣流下50℃吹干。避免了高溫時某些農(nóng)藥的分解，加快了分析速度，提高了回收率。樣品提取液的凈化：使用凝膠技術(shù)。該技術(shù)操作方便，凈化效果好。所使用的凝膠與被分離試樣沒有任何相互作用，完全依據(jù)凝膠對不同大小分子的排阻效應(yīng)進行分離。大分子的類脂物、色素、生物堿等先被洗脫出來。條件溫和，被分離物在分離中不會發(fā)生化學變化。因而對于十幾種農(nóng)藥同時進行分析測定更為適宜。3.1.2色譜分析量取1μL混合標準溶液或樣品凈化液注入色譜儀中，以保留時間定性，以試樣峰面積與標準比較定量。標準溶液色譜保留時間(min)如下：敵敵畏7.357，氧化樂果11.600，殺螟硫磷15.358，甲胺磷17.063，馬拉硫磷17.938。3.1.3方法最低檢測濃度根據(jù)空白樣品3倍噪聲水平確定每種農(nóng)藥的最低檢測濃度，見表1-1。表1-1有機磷最低檢測濃度及平均回收率農(nóng)藥名稱最低檢測濃度(mg/kg)平均回收率(%)RSD(%)敵敵畏0.01817.9氧化樂果0.04798.3殺螟硫磷0.021019.5試劑R甲胺磷0.028910.2馬拉硫磷0.021059.83.1.4標準曲線的測定在本方法所確定的實驗條件下，配置一系列不同濃度的標樣含量的標準溶液進行色譜測定，以各組分的峰面積(y)對濃度(x)作標準曲線y=ax+b，標準曲線的線形關(guān)系見表1-2，有機氯混合標準溶液色譜圖和加標樣色譜圖如圖所示，各種有機氯農(nóng)藥殘留量色譜分析的線性關(guān)系滿足定量分析要求。實驗證實，單一目標化合物內(nèi)標曲線的線性、斜率高于混標法，因為克服了目標化合物之間相互作用帶來的誤差。表1-2有機磷標準曲線的測定農(nóng)藥名稱色譜保留時間(min)rab敵敵畏7.3570.997030.003040.04591氧化樂果11.6000.998250.000250.02040殺螟硫磷15.3580.999260.004220.08539試劑R甲胺磷17.0630.994560.005020.01384馬拉硫磷17.9380.999820.001270.013423.1.5目標化合物色譜保留時間的影響試驗進行了不同進樣量、不同樣品基質(zhì)對外標、回收率指示物和5種有機磷目標化合物色譜保留時間的影響試驗。結(jié)果顯示，進樣體積多于2.0ul就會引起部分目標化合物峰形改變，從而引起色譜保留時間變化，所以最適進樣體積為1～2ul；在實際樣品測定的濃度范圍0～5.0g/L內(nèi)(上機前有機相濃度)，進樣量引起的保留時間變化一般在0.011～0.05min之間，敵敵畏為0.1、馬拉硫磷為0．19、甲胺磷為0．06min；在不同樣品基質(zhì)菜花、青菜、西紅柿影響下，當樣品中添加濃度為0.5mg/kg時，樣品基質(zhì)引起的目標化合物保留時間變化一般在0．01～0．05min之間，甲胺磷為0.08、馬拉硫磷為0.07、殺螟硫磷為0.085、氧化樂果為0.225min，并且氧化樂果色譜保留時間隨混合溶劑比例變化極大；本文所述方法充分考慮到了上述變化，在本文測定方法下，5種有機磷均沒有測定歧視。3.1.6不同蔬菜樣品中加標實驗作了不同樣品特別是蔬菜樣品中加標實驗，部分結(jié)果見表1-3，樣品中添加濃度為0.5mg/kg時，黃瓜中回收率范圍在54.22%～118.2%之間，平均回收率為86.76%，其中回收率指示物回收率為86．58；青菜中回收率范圍在81.84%～103.6%之間，平均回收率為91.9％，其中回收率指示物回收率為87.14%；胡蘿卜中回收率范圍在58.73%～110.16%之間，平均回收率為83.76%，其中回收率指示物回收率為72.70%；表1-3在不同樣品中添加混合標準的回收率農(nóng)藥名稱添加量黃瓜青菜胡蘿卜回收值回收率回收值回收率回收值回收率敵敵畏21.88594.242.061103.11.58679.30氧化樂果21.08454.221.63781.841.45272.61殺螟硫磷22.364118.22.071103.61.17558.73試劑R甲胺磷21.98099.001.95097.482.203110.16馬拉硫磷21.67085.001.93096.51.52476.203.2有機氯類農(nóng)藥檢測的結(jié)果與討論3.2.1色譜分離情況標準溶液色譜分離情況見圖1，其中各組份出峰順序依次為1α-六六六;2γ-六六六;3δ-六六六；4β-六六六;5P，P’-DDE;6O，P’-DDT;7P，P’-DDD;8P，P’-DDT；9六氯苯；10氧氯丹;11狄氏劑;12環(huán)氧七氯。圖1標準溶液色譜分離3.2.2色譜分析條件的確定在實驗中采用2種不同的升溫程序，分別為：A.升溫程序：初溫40℃（保持2min），以20℃/min，升到150℃，再以3℃/min升到270℃（保持5min）。B.升溫程序：初溫60℃（保持0.5min），以30℃/min，升到150℃，再以2℃/min升到270℃（保持5min）。在上述兩種程序升溫條件下，分別進樣（混標）2μL.濃度均為0.05μg/mL,從下圖可以看出：升溫程序A中，初始溫度過低延長了分析時間，樣品中低沸點物質(zhì)也較少，所以，初始溫度可作適當?shù)奶岣?；另外，在升溫程序A中后一階段升溫速度較快（3℃/min），有些組分未能完全分開；而在升溫程序B中這2個問題得到了解決，綜合以上因素，實驗中我們采用升溫程序B圖2升溫程序A色譜圖圖3升溫程序B色譜圖3.2.3方法的回收率、精密度及標準曲線在蔬菜樣品中添加3個不同含量水平的有機氯農(nóng)藥標準溶液，按2.4步驟進行回收率實驗，得到回收氯結(jié)果見表1，方法平均回收率為81.02%-110.14%；相同樣品同一添加含量按3.2步驟進行3次回收率實驗，得到相對標準偏差為3.14%-11.69%（見表2-1），方法回收氯及精密度均達到農(nóng)藥殘留限量檢測的要求。在本方法所確定的實驗條件下，配置一系列不同濃度的標樣含量的標準溶液進行色譜測定，以各組分的峰面積(y)對濃度(x)作標準曲線y=ax+b，標準曲線的線形關(guān)系見表2，有機氯混合標準溶液色譜圖和加標樣色譜圖如圖所示，各種有機氯農(nóng)藥殘留量色譜分析的線性關(guān)系滿足定量分析要求。表2-1加標回收率及精密度農(nóng)藥名稱Addedμg/gRecovery%RSD%n=3農(nóng)藥名稱Addedμg/gRecovery%RSD%n=3α-六六六0.290.317.52γ-六六六0.299.727.612.0101.255.592.096.155.3420.0106.933.5620.095.743.14δ-六六六0.2104.919.67β-六六六0.288.8111.692.099.827.562.083.137.6720.0105.312.8920.089.524.69P，P’-DDE0.281.027.94O，P’-DDT0.297.126.882.097.195.322.089.144.5320.0103.154.3720.091.272.99P，P’-DDD0.2110.1410.12P，P’-DDT0.295.127.782.096.185.122