生物實(shí)驗(yàn)中試劑的作用及實(shí)驗(yàn)方法總結(jié)一、化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)方法

①淀粉——碘液(藍(lán)色)

②還原性糖——斐林試劑\班氏試劑(磚紅色)

③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水變渾濁)

④乳酸——pH試紙

⑤O2——余燼復(fù)然

⑥蛋白質(zhì)——被蛋白酶水解、雙縮脲試劑(紫紅色)

⑦脂肪——蘇丹Ⅲ染液(橘黃色)、蘇丹Ⅳ染液(紅色)

⑧DNA——二苯胺(藍(lán)色)

⑨染色體——龍膽紫溶液，醋酸洋紅溶液

二、實(shí)驗(yàn)條件的控制方法

1、加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物

2、減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開(kāi)水

3、除去容器中CO2——NaOH溶液

4、除去葉中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境

5、除去葉中葉綠素——酒精水浴加熱

6、除去光合對(duì)呼吸干擾——給植株遮光

7、如何得到單色光——棱鏡色散或透明薄膜濾光

8、血液抗疑——加入檸檬酸鈉

9、線粒體提取——細(xì)胞勻漿離心

10、骨無(wú)機(jī)鹽的除去——鹽酸溶液

11、滅菌方法——培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌;接種環(huán)用火焰灼燒滅菌;雙手用肥皂冼凈，擦干后用75%酒精消毒;實(shí)驗(yàn)室或接種箱用甲醛蒸汽或紫外燈滅菌;整個(gè)過(guò)程都在實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌區(qū)或酒精燈旁進(jìn)行。四、實(shí)驗(yàn)中控制溫度的方法

1、還原糖，DNA鑒定——沸水浴加熱

2、酶促反應(yīng)——水浴保溫

3、用酒精溶解葉中的葉綠素——酒精要隔水加熱、

4、細(xì)胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)——恒溫箱培養(yǎng)

五、實(shí)驗(yàn)中常用器材和藥品的使用

1、NaOH：用于吸收CO2或改變?nèi)芤旱膒H

2、Ca(OH)2：鑒定CO2

3、CaCl2提高細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性

4、HCl：解離或改變?nèi)芤旱膒H

5、NaHCO3：提供CO2

6、NaCl：配制生理鹽水或用于提取DNA

7、瓊脂：激素或其他物質(zhì)的載體或培養(yǎng)基的凝固劑

8、亞甲基藍(lán)：用于檢測(cè)污水的細(xì)菌含量

9、酒精：用于消毒、提純DNA、葉片脫色及配制解離液

10、蔗糖：測(cè)定植物細(xì)胞液濃度或觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原、作為碳源和能源物質(zhì)

11、濾紙：過(guò)濾或紙層析

12、紗布、尼龍布：過(guò)濾，遮光

13、龍膽紫溶液或醋酸洋紅：堿性染料，用于染色體染色

14、檸檬酸鈉——血液抗凝劑六、一些常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)方法

⑴、根據(jù)顏色來(lái)確定某種物質(zhì)的存在：

淀粉+I2(藍(lán)色);還原性糖+斐林試劑(磚紅色);脂肪+蘇丹Ⅲ(橘黃)或+蘇丹Ⅳ(紅色);蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑(紫色);

大腸桿菌+伊紅和美藍(lán)(菌落為深紫色，有金屬光澤)

⑵、用顏色標(biāo)記法來(lái)確定原腸胚三個(gè)胚層的分化情況。

⑶、用熒光標(biāo)記法來(lái)證明細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性

⑷、同位素示蹤法：光合作用產(chǎn)生氧氣的來(lái)源;光合作用中二氧化碳的去向;

噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)，蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì);

DNA的復(fù)制是半保留復(fù)制。

⑸、確定某種元素為植物生長(zhǎng)必需的元素的方法:

水培法(完全培養(yǎng)液與缺素完全培養(yǎng)液對(duì)照)

⑿、確定某一個(gè)體是否具有抗性基因的方法：

確定小麥?zhǔn)欠窬哂锌逛P病基因，用銹病菌去侵染，一段時(shí)間后，觀察有無(wú)銹斑出現(xiàn)。

⒀、鑒定血型的方法：

用標(biāo)準(zhǔn)血清與待測(cè)血型混合，在顯微鏡下觀察血液的凝集情況。

⒁、育種的方法：

雜交育種;人工誘變育種;單倍體育種;基因工程育種;細(xì)胞工程育種;多倍體育種等。

⒂、測(cè)定種群密度的方法：樣方法;標(biāo)志重捕法

⒃、生態(tài)瓶的制作方法;瓶必須透明，且封閉

⒄、分離微生物的方法：

平板劃線法;用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)(如：圓褐固氮菌的分離，金黃色葡萄球菌的分離，細(xì)菌和酵母菌的分離)

⒅、測(cè)定微生物群體生長(zhǎng)的方法：

測(cè)定細(xì)菌的數(shù)目---顯微計(jì)數(shù)

測(cè)定細(xì)菌的重量---取一定體積的培養(yǎng)基，經(jīng)離心分離，反復(fù)洗滌后，稱濕重，或烘干后稱干重。七、實(shí)驗(yàn)研究方法

1、顯微觀察法如觀察植物細(xì)胞有絲分裂的實(shí)驗(yàn)，觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的實(shí)驗(yàn)。

2、觀察法觀察微生物的外在性狀和表現(xiàn)等，如觀察注射了甲狀腺激素的小狗的活動(dòng)狀況，觀察動(dòng)物的毛色和植物花色的遺傳實(shí)驗(yàn)等。

3、同位素示蹤法如噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)，用18O和14C追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉(zhuǎn)移途徑的實(shí)驗(yàn)等。

4、加法創(chuàng)意如用飼喂法研究甲狀腺激素的實(shí)驗(yàn)、用注射法研究生長(zhǎng)激素的實(shí)驗(yàn)，用移植法研究性激素的實(shí)驗(yàn)等。

5、減法創(chuàng)意如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素、生長(zhǎng)激素的實(shí)驗(yàn)，雌蕊授粉后除去發(fā)育著的種子實(shí)驗(yàn)等。

6、雜交實(shí)驗(yàn)法如孟德?tīng)柊l(fā)現(xiàn)遺傳定律的植物雜交、測(cè)交的實(shí)驗(yàn)，小麥的雜交實(shí)驗(yàn)等。

7、化學(xué)分析法如番茄和水稻對(duì)Ca和Si選擇吸收的實(shí)驗(yàn)，葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)等。

8、理論分析法如大小草履蟲(chóng)競(jìng)爭(zhēng)的實(shí)驗(yàn)，植物根向地生長(zhǎng)、莖背地生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)，植物向光性的實(shí)驗(yàn)等。

9、模擬實(shí)驗(yàn)法如滲透作用的實(shí)驗(yàn)裝置，分離定律的模擬實(shí)驗(yàn)等。

3、研磨和過(guò)濾技術(shù)

適用于從生物組織中提取物質(zhì)，如酶、色素等。研磨時(shí)要先將生物材料切碎，然后加入研磨劑〈常用SiO2〉、提取液及其他必要物質(zhì)，充分研磨后，往往要進(jìn)行過(guò)濾，以除去濾渣，所用過(guò)濾器具則根據(jù)需要或或根據(jù)試題中提供的器材加以選用，如可用濾紙、紗布、脫脂棉、尼龍布等。

4、解離技術(shù)

用于破壞細(xì)胞壁，分散植物細(xì)胞，制作臨時(shí)裝片。

5、恒溫技術(shù)

適用于有酶參加的生化反應(yīng)，一般用水浴或恒溫箱。根據(jù)題目要求選用。

6、紙層析技術(shù)

適用于溶液中物質(zhì)分離。重要步驟包括制備