專題一基因工程核心練習(xí)題1.關(guān)于酶的練習(xí)題例：鐮刀型細(xì)胞貧血癥的病因是血紅蛋白基因的堿基序列發(fā)生了改變。檢測這種堿基序列的改變必須使用的酶是()A.解旋酶B.DNA連接酶C.限制性內(nèi)切酶D.RNA聚合酶答案：C解析：一個DNA分子中有多個基因，而控制合成鐮刀型細(xì)胞貧血癥血紅蛋白的基因只是DNA分子中的一個基因，若要檢測其堿基序列，必須將其從DNA分子中切下來，而這個過程則需要限制酶。答案A：解旋酶用于DNA分子復(fù)制B：DNA連接酶用于目的基因和運載體的結(jié)合D：RNA聚合酶用于RNA的復(fù)制2.獲取目的的基因技術(shù)例：如果所需要的目的基因的序列完全不知，或只知道目的基因的一段，或想從一種生物體內(nèi)獲得很多基因，選用下列方法可以獲得目的基因的是()A.直接從含有目的基因的生物體內(nèi)獲取B.構(gòu)建基因文庫C.利用PCR技術(shù)擴增D.通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成答案：B解析：若目的基因序列完全不知，或只知道基因序列的一段，就無法利用A、C、D三項所述方法獲得，而只能采用構(gòu)建基因文庫的方法獲取目的基因。4.蛋白質(zhì)工程例：蛋白質(zhì)工程中，需要直接操作的對象是()A.氨基酸結(jié)構(gòu)B.蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)C.基因結(jié)構(gòu)D.肽鏈結(jié)構(gòu)答案：C解析：蛋白質(zhì)工程目標(biāo)是對蛋白質(zhì)進行分子設(shè)計，但因為基因決定蛋白質(zhì)，因此歸根到底還需對相應(yīng)的基因進行設(shè)計。5.綜合性大題(2011年青島市高二質(zhì)檢)如圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tetR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復(fù)制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在內(nèi)的多種酶的酶切位點。(1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有________________________________________________________________________、________________、________________三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進行________。(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進行轉(zhuǎn)化實驗。之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是________________；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是________________________________________________________________________。(3)目的基因表達(dá)時，RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點是________________，其合成的產(chǎn)物是________________。(4)在上述實驗中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應(yīng)選用的酶是________________________________________________________________________?！窘馕觥?1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒用EcoRⅠ酶切開后,可形成許多有相同末端的DNA片段，再用DNA連接酶連接起來后,可形成目的基因與目的基因、目的基因與載體、載體與載體連接的重組DNA分子,而基因工程所需要的是目的基因與載體的連接物,所以對以上三種DNA分子片段進行分離提純，以獲得基因工程所需要的?！敬鸢浮?1)目的基因——載體連接物載體——載體連接物目的基因——目的基因連接物分離純化(2)載體——載體連接物目的基因——載體連接物、載體——載體連接物(3)啟動子mRNA(4)EcoRⅠ和BamHⅠ【易誤警示】(1)切割質(zhì)粒和目的基因