實驗五微生物的大小和數(shù)量的測定第1頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六一、實驗?zāi)康呐c要求：學(xué)習(xí)使用血球記數(shù)板測定微生物數(shù)量的方法。學(xué)習(xí)使用目鏡測微尺和鏡臺測微尺在顯微鏡下測定微生物大小的方法。第2頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六二、實驗原理---血球計數(shù)板對酵母菌培養(yǎng)液計數(shù)：血球計數(shù)板的構(gòu)造﹟﹟第3頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六細胞數(shù)/ml=[每中方格平均細胞數(shù)×25（16）/10-4]×稀釋倍數(shù)第4頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六二、實驗原理---酵母菌大小測定測量工具及構(gòu)造鏡臺測微尺目鏡測微尺第5頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六目鏡測微尺的校正第6頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六三、實驗器材顯微鏡血球計數(shù)板、鏡臺測微尺、目鏡測微尺酵母菌懸液（測數(shù)用）、酵母菌裝片（測定大小用）長頸膠頭吸管、蓋玻片、擦鏡紙等。第7頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六四、實驗步驟---酵母菌懸液計數(shù)

1、取清潔無油的血球計數(shù)板，檢查計數(shù)室，找出計數(shù)室的中方格與小方格；2、在計數(shù)室上面加蓋玻片，取酵母菌液，搖勻，用滴管由蓋玻片邊緣滴一小滴，使菌液自行滲入，計數(shù)室內(nèi)不得有氣泡；3、靜止5min后，用低倍鏡觀察并將計數(shù)室移至視野中央；4、在高倍鏡下計數(shù)：按要求計數(shù)五個中方格的菌數(shù)總值，然后求得每個中格的平均值。乘上25（或16）就得出一大格中的總菌數(shù)，最后再換算到每mL菌液中的含菌數(shù)。第8頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六5、壓在方格線上的菌體，以壓在底線和右側(cè)線上的菌體計入本格內(nèi)；遇到有芽體的酵母時，若芽體和母體同等大，就按單個酵母計數(shù)。6、計數(shù)完畢后，血球計數(shù)板要立即清洗干凈，并用吸水紙吸干，最后用擦鏡紙擦干凈，并放回盒內(nèi)。四、實驗步驟---酵母菌懸液計數(shù)

（X1+X2+X3+X4+X5）5×25（或16）×10×1000×稀釋倍數(shù)

酵母菌細胞數(shù)/mL=第9頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六四、實驗步驟---酵母菌大小的測定1、目鏡測微尺的校正：在高倍鏡下，看清鏡臺測微尺的刻度后，轉(zhuǎn)動目鏡，使目鏡測微尺與鏡臺測微尺的刻度平行，移動推動器，使目鏡測微尺的0點與鏡臺測微尺的某一刻度重合2、仔細尋找兩尺第二個完全重合的刻度。計算兩刻度間目鏡測微尺的格數(shù)和鏡臺測微尺的格數(shù)。鏡臺測微尺的刻度每格長10μm，所以：目鏡測微尺每格長度（μm）=（鏡臺測微尺格數(shù)×10）/目鏡測微尺格數(shù)第10頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六3、菌體大小的測定：取下鏡臺測微尺，將酵母菌染色標(biāo)本置于載物臺上，然后在高倍鏡下用目鏡測微尺測量菌體的大小。第11頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六將顯微計數(shù)結(jié)果記錄于下表中。T表示五個中方格中的總菌數(shù)；D表示菌液稀釋倍數(shù)。

各中方格中菌數(shù)TD二室平均值個/ml12345第一室

第二室

五、實驗結(jié)果第12頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六目鏡測微尺標(biāo)定結(jié)果：

40×鏡下

倍目鏡測微尺每格長度是

μm。菌號酵母的直徑大小測定結(jié)果

目鏡測微尺格數(shù)實際直徑/μm1

2

3

4

5

均值

第13頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六六、問