生物安全實驗室使用程序

三級個人防護(hù)要求

實驗室生物安全防護(hù)的內(nèi)容包括

1、安全設(shè)備、個體防護(hù)裝置和措施（一級防護(hù)）2、實驗室的特殊設(shè)計和建設(shè)要求（二級防護(hù)）3、嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序和規(guī)程等方面采取綜合措施實驗室生物安全防護(hù)的目的確保實驗室工作人員不受實驗對象侵染，確保周圍環(huán)境不受其污染。一、個人防護(hù)裝備

是指用于防止工作人員受到物理、化學(xué)和生物等有害因子傷害的器材和用品。在生物安全實驗室中，這些器材和用品主要是保護(hù)實驗人員免于暴露于生物危害物質(zhì)（氣溶膠、噴濺物以及意外接種等）危險的一種物理屏障。（一）個人防護(hù)所涉及的部位

1、眼睛、2、頭面部、3、軀體、4、手、5、足、耳（聽力）6、呼吸道（二）個人防護(hù)裝備包括1、眼鏡（安全鏡、護(hù)目鏡）2、口罩、面罩、防毒面具3、帽子4、防護(hù)衣(實驗服、隔離衣、連體衣、圍裙)5、手套6、鞋套7、聽力保護(hù)器等。二、個人防護(hù)裝備選擇原則實驗室工作人員可根據(jù)不同級別的生物安全水平的操作來選擇個人防護(hù)裝備。結(jié)合所進(jìn)行工作的性質(zhì)來選擇著裝和裝備。要求工作人員應(yīng)掌握的要點1、必須十分了解和掌握自己工作性質(zhì)和特點。2、所涉及的實驗工作需要使用個人防護(hù)裝備的類型。3、正確的使用方法。三、各級生物安全實驗室

個體防護(hù)裝備的配備原則BSL－1實驗室1、工作人員在實驗時應(yīng)穿工作服，戴防護(hù)眼鏡。2、工作人員手上有皮膚破損或皮疹時應(yīng)戴手套。BSL－2實驗室除符合BSL－1的要求外，還應(yīng)該符合下列條件：1、在實驗室中應(yīng)穿著工作服或罩衫等防護(hù)服。離開實驗室時，防護(hù)服必須脫下并留在實驗室內(nèi)。不得穿著外出。用過的工作服應(yīng)先消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。2、當(dāng)手可能接觸感染材料、污染的表面或設(shè)備時應(yīng)戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實驗室。工作完全結(jié)束后方可除去手套。3、一次性手套不得清洗和再次使用。

4、當(dāng)微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，而必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護(hù)裝置（護(hù)目鏡、戴N95口罩、面罩、個體呼吸保護(hù)用品或其他防濺出保護(hù)設(shè)備）。BSL－3實驗室

除符合BSL－2的要求外，還應(yīng)該符合下列條件1、在進(jìn)行感染性組織培養(yǎng)、有可能產(chǎn)生感染性氣溶膠的操作時，必須使用個體防護(hù)設(shè)備。2、當(dāng)不能安全有效地將氣溶膠限定在一定范圍內(nèi)時，應(yīng)使用呼吸保護(hù)裝置。3、工作人員在進(jìn)入實驗室工作區(qū)前，應(yīng)在專用的更衣室（或緩沖間）穿著背開式工作服或其他防護(hù)服。工作完畢必須脫下工作服，不得穿工作服離開實驗室。可再次使用的工作服必須先消毒后清洗。4、工作時必須戴手套（兩付為宜）。一次性手套必須先消毒后丟棄。5、在實驗室中必須配備有效的消毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水，且易于取用?？膳鋫鋺?yīng)急藥品。

6、在使用傳染性物質(zhì)或已被污染的儀器時，需戴手套。在使用電話、計算機等設(shè)備進(jìn)行文書工作前，必須脫掉手套。

7、謹(jǐn)記不能帶著手套離開BSL-3實驗室。所有離開BSL-3實驗室的物品必須正確消除污染，并放在干凈的容器或袋子中。

8、有可能濺出或噴出傳染性物質(zhì)、危險試劑時，需使用面部和眼部防護(hù)器具。

9、當(dāng)有程序不能在生物安全柜內(nèi)處理時，要組合使用適當(dāng)?shù)牟僮魅藛T防護(hù)設(shè)備（如面罩、呼吸器）和物理容器設(shè)備。四、個體防護(hù)裝備的

注意事項

1、個人防護(hù)用品應(yīng)符合國家規(guī)定的有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；2、在危害評估的基礎(chǔ)上，按不同級別的防護(hù)要求選擇適當(dāng)?shù)膫€人防護(hù)裝備；3、對個人防護(hù)裝備的選擇、使用、維護(hù)應(yīng)有明確的書面規(guī)定、程序和使用指導(dǎo)；

4、使用前應(yīng)仔細(xì)檢查，不使用標(biāo)志不清、破損或泄漏的防護(hù)用品。

（一）眼睛防護(hù)裝備

1、安全眼鏡和護(hù)目鏡（物理、化學(xué)和生物因素）1）在所有易發(fā)生潛在眼睛損傷的生物安全實驗室中工作時必須采取眼睛防護(hù)措施；2）所選用的眼睛防護(hù)裝備的類型取決于外界危害因子對眼睛危害程度。一般而言：

佩戴側(cè)面帶有護(hù)罩的安全眼鏡就可以達(dá)到防護(hù)的目的。只有在進(jìn)行有可能發(fā)生化學(xué)和生物污染物質(zhì)濺出的實驗時，必須佩戴護(hù)目鏡。進(jìn)行有潛在爆炸的反應(yīng)和使用或混合強腐蝕性和強酸溶液時，必須佩戴面罩或同時佩戴面罩和護(hù)目鏡或安全眼鏡。

建議：工作人員在生物安全實驗室中工作時不配戴隱型眼鏡。不得戴眼鏡防護(hù)裝備

離開實驗室區(qū)域！

安全眼鏡能夠保護(hù)工作人員避免受到大部分實驗室操作所帶來的損害。但對某些特殊的操作如腐蝕性液體噴濺出或細(xì)小顆粒飛濺出時佩戴安全眼鏡顯然是不夠安全的！

1）用鉻酸類溶液洗滌玻璃器皿、碾磨物品；

2）或在使用玻璃器皿進(jìn)行極具爆破或破損危害（例如在壓力或溫度突然增加或降低的情況下）的實驗室操作時?！谶@些情況下，有必要保護(hù)整個面部和喉部，應(yīng)該佩戴護(hù)目鏡或面罩。

a、安全鏡b、安全護(hù)目鏡

不得戴眼鏡防護(hù)裝備離開實驗室區(qū)域！眼鏡配戴和卸下方法示意圖2、洗眼裝置如發(fā)生腐蝕性液體或生物危害液體噴濺至工作人員的眼睛時，應(yīng)該（或在同事的幫助下）在就近的洗眼臺（洗眼裝置）用大量緩流清水沖洗眼睛表面至少15到30分鐘。事后必須立即填寫事故報告單并立即報告主管領(lǐng)導(dǎo)。洗眼裝置——要求1）洗眼裝置應(yīng)安裝在室內(nèi)明顯和易取的地方，并保持洗眼水管的通暢，便于工作人員緊急時使用。2）工作人員應(yīng)掌握其操作方法。固定式洗眼裝置（二）淋浴裝置和

應(yīng)急消毒噴淋裝置1、規(guī)定：----BSL-2實驗室在必要時應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置；----BSL-3實驗室應(yīng)設(shè)置淋浴裝置（清潔區(qū)），必要時在半污染區(qū)設(shè)置應(yīng)急消毒噴淋裝置。2、要求：

保持管道的通暢、必須告知工作人員應(yīng)急消毒噴淋裝置的擺放位置、培訓(xùn)其操作方法。

——應(yīng)急消毒噴淋裝置

在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗時間至少需要20分鐘。如果為化學(xué)物品濺出污染，用大量急水沖洗。當(dāng)使用緊急淋浴裝置后必須立刻填寫事故報告單并立即報告主管領(lǐng)導(dǎo)?。ㄈ╊^面部防護(hù)裝備

口罩僅可以保護(hù)部分面部免受生物危害物質(zhì)如血液、體液、分泌液以及排泄物等噴濺物的污染；僅適用于BSL-1或

BSL-2實驗室中使用；正確佩戴和卸下口罩示意圖

一般在使用時可同時佩戴面罩，以組合使用的方法保護(hù)整個面部,單獨使用不能對工作人員提供呼吸保護(hù)。（四）防護(hù)面罩

1、對整個臉部進(jìn)行防護(hù)：必須使用一種標(biāo)準(zhǔn)的防護(hù)面罩以罩住整個臉部，或使用口罩加護(hù)目鏡（或口罩加安全鏡）。2、保護(hù)部分面部：

配戴安全眼鏡或護(hù)目鏡，但必須戴口罩以保護(hù)部分面部或配戴標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)面罩。注意事項：1）在使用防護(hù)面罩時常常同時佩帶安全鏡或護(hù)目鏡或口罩。2）實驗完畢后必須先摘下手套，然后用手卸下防護(hù)面罩。——防護(hù)面罩——一次性面罩——防護(hù)帽

在生物安全實驗室中佩戴簡易防護(hù)帽可以保護(hù)工作人員避免化學(xué)和生物危害物質(zhì)飛濺至頭部(頭發(fā))所造成的污染。要求：工作人員在實驗操作時應(yīng)佩帶防護(hù)帽。一次性簡易防護(hù)帽（五）呼吸防護(hù)裝備

1、當(dāng)實驗室操作不能安全有效的將氣溶膠限定在一定的范圍內(nèi)，要求使用呼吸防護(hù)裝備。

2、使用和維護(hù)指導(dǎo)書包括在相應(yīng)活動的安全操作程序手冊中，并按指導(dǎo)書及培訓(xùn)的要求使用。

3、呼吸防護(hù)的有效裝備----防毒面具（面具、個人呼吸器和正壓防護(hù)服）

呼吸防護(hù)裝備使用：1）在進(jìn)行高度危險性的操作（清理溢出的感染性物質(zhì)和氣溶膠）時，可以采用防毒面具來進(jìn)行防護(hù)。2）根據(jù)危險類型來選擇防毒面具。

4、防毒面具1）在防毒面具中裝有一種可更換的過濾器，它可以保護(hù)佩戴者免受氣體、蒸汽、顆粒和微生物以及氣溶膠損害的影響。2）過濾器必須與防毒面具的正確類型相配套。3）為了達(dá)到理想的防護(hù)效果，每一個防毒面具都應(yīng)與操作者的面部相吻合。4）應(yīng)安排工作場所監(jiān)控、醫(yī)學(xué)評估和對呼吸器使用者的監(jiān)督，以確保其始終正確使用該類裝備。5）應(yīng)對呼吸器作個體適應(yīng)性測試。（六）手部防護(hù)裝備（手套）1、手套應(yīng)在實驗室工作時使用。2、在接觸感染性物質(zhì)（血液、體液、分泌液、滲出液、以及接觸粘膜和非完整皮膚時），必須使用合適的手套以保護(hù)工作人員避免受到污染物濺出或生物污染的事故所造成的損害。

3、手套被污染，應(yīng)該盡可能早的脫下，消毒后丟棄。4、手套應(yīng)按所從事操作的性質(zhì)符合舒適、靈活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并應(yīng)對所涉及的危險提供足夠的防護(hù)。5、對實驗室工作人員進(jìn)行手套選擇、使用前及使用后的配戴及摘除等培訓(xùn)。6、一次性手套不得重復(fù)使用。一次性手套必須先消毒后丟棄。規(guī)范的使用手套方法的幾個要點

1、手套的選擇：生物安全實驗室一般使用乳膠橡膠或聚腈類或聚氯乙烯手套用于對強酸、強堿、有機溶劑和生物危害物質(zhì)的防護(hù)。2、手套的檢查：在使用手套前應(yīng)該檢查手套是否退色、穿孔（漏損）或有裂縫?？梢酝ㄟ^充氣試驗，將其浸入水中觀察是否有汽泡來檢查手套的質(zhì)量。

3、手套的使用1）一般情況下，佩戴一副手套即可（BSL-1實驗室）；2）若在生物安全柜中操作感染性物質(zhì)時（BSL-2和BSL-3實驗室）應(yīng)該佩戴兩副手套；3）在操作過程中，外層手套被污染，立即用消毒劑噴灑手套并脫下后丟棄在生物安全柜中的高壓滅菌袋中并立即戴上新手套繼續(xù)實驗；4）戴好手套后應(yīng)完全遮住手及腕部，如必要可覆蓋實驗服袖；乳膠手套聚脂手套4、手套的清洗和更換：

1)使用一次性手套，不可再次使用。用后立即進(jìn)行高壓滅菌消毒然后丟棄；2)不得戴著手套離開實驗室區(qū)域；3)在脫去手套之前，應(yīng)該用自來水或肥皂和水加以徹底清洗、摘除并消毒（BSL-1實驗室）；4)脫去手套后,拉下袖口將手遮?。?)工作人員在完成感染性物質(zhì)實驗,離開生物安全柜之前,應(yīng)該脫去外層手套丟入生物安全柜內(nèi)的高壓滅菌袋中。然后用消毒液噴洗內(nèi)層手套，以避免污染門捏手、電燈開關(guān)、電話等（BSL-2和BSL-3實驗室）。在撕破、損壞或手套污染時應(yīng)及時更換手套。

5、避免手套“觸摸污染”

1)戴手套的手避免觸摸鼻子、面部和避免觸摸或調(diào)整其他個人防護(hù)裝備（如眼鏡等）；2)避免觸摸不必要的物體表面如燈開關(guān)、門或捏手等；3)如果手套撕破應(yīng)該脫去，在換戴新手套前應(yīng)清洗手部；4)注意盡量不去觸摸工作臺面和其他物品。6、戴手套注意要點:

1)在實驗室工作中要一直保持戴手套狀態(tài)并選擇正確類型和尺寸的手套。2)將手插入手套后將手套口遮蓋實驗服袖;手套的手要遠(yuǎn)離面部。

戴手套7、脫手套過程及注意要點:

1）用一手捏起另一近手腕部處的手套外緣,將手套從手上脫下并將手套外表面翻轉(zhuǎn)入內(nèi)；2）用戴著手套的手拿住該手套；3）用脫去手套的手指插入另一手套腕部處內(nèi)面；4）脫下該手套使其內(nèi)面向外并形成一個由兩個手套組成的袋狀；5）丟棄在高溫消毒袋中并進(jìn)行消毒處理。

脫手套8、洗手根據(jù)(GB19489-2004）要求:1）應(yīng)該安裝洗手裝置，該裝置可以是腳控或紅外控制的洗手池，或者配置一個酒精擦手器。2）洗手是