專題強化練（十五）發(fā)酵工程

一、單選題

1.（2023?廣東汕頭統(tǒng)考三模）利用微生物發(fā)酵制作醬油在我國具有悠久的歷史。某企業(yè)通過發(fā)酵制作

醬油的流程示意圖如下。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

/廠、廠、乳酸菌一食鹽氣油

小麥下二―二’二軍*竺二也竺年

米曲霉------------------

米曲霉發(fā)酵發(fā)酵池發(fā)酵提取醬油

A.米曲霉發(fā)酵過程中，大豆、小麥和麥數(shù)中的蛋白質(zhì)和淀粉均可為米曲霉的生長提供碳源

B.米曲霉菌為好氧微生物，因此發(fā)酵過程需給發(fā)酵罐通入空氣并攪拌

C.在發(fā)酵池發(fā)酵階段添加的乳酸菌和酵母菌屬于原核生物，因此不含核膜

D.發(fā)酵池中發(fā)酵產(chǎn)生的乳酸與酒精可抑制雜菌污染和繁殖，保證醬油質(zhì)量

解析：米曲霉發(fā)酵過程中，大豆、小麥和麥秋中均含有蛋白質(zhì)和淀粉，而蛋白質(zhì)和淀粉均可為米曲

霉的生長提供碳源，另外蛋白質(zhì)還可提供氮源，A項正確；米曲霉的代謝類型是異養(yǎng)需氧型，因此

發(fā)酵過程需給發(fā)酵罐通入空氣并攪拌,B項正確；在發(fā)酵池中酵母菌產(chǎn)生的酒精能抑制雜菌的生長，

乳酸菌產(chǎn)生的乳酸使發(fā)酵液呈酸性也能抑制雜菌的生長，但酵母菌是真核生物，其細胞結(jié)構(gòu)中有核

膜，而乳酸菌為原核生物，不含有核膜，C項錯誤；發(fā)酵池中乳酸發(fā)酵產(chǎn)生的乳酸和酵母菌發(fā)酵產(chǎn)

生酒精可抑制雜菌污染和繁殖，保證醬油質(zhì)量，同時添加的食鹽也能起到抑制雜菌的作用，D項正

確。

答案：C

2.（2023?廣東模擬預(yù)測）利用油桃釀造果酒的工藝流程如圖所示，下列敘述錯誤的是（）

piWl|酶解、成|pBTlr?

A.油桃去核前清洗，目的是防止雜菌污染

B.為提高發(fā)酵速率，成分調(diào)整環(huán)節(jié)可加入大量葡萄糖

C.前發(fā)酵階段需要通氧氣，后發(fā)酵階段需要密封

D.在果酒的制作過程中，發(fā)酵液pH逐漸降低

解析：油桃去核前進行清洗，該操作的目的是防止去核后清洗造成雜菌污染，A項正確；成分調(diào)整

環(huán)節(jié)加入大量葡萄糖，會使發(fā)酵液濃度過高，可能導(dǎo)致酵母菌失水，影響菌體的生長，不利于發(fā)酵

的進行，B項錯誤；前發(fā)酵階段需要通氧氣，使酵母菌進行有氧呼吸，促進酵母菌大量繁殖；后發(fā)

酵階段需要密封，創(chuàng)設(shè)無氧條件，促進酵母菌進行酒精發(fā)酵，C項正確；在果酒的制作過程中，酵

母菌進行呼吸作用產(chǎn)生的CO2溶于水中，會導(dǎo)致發(fā)酵液pH逐漸降低，D項正確。

答案：B

3.（2023?廣東深圳建文外國語學校?？家荒＃┑厍蛏系闹参锩磕戤a(chǎn)生的纖維素超過70億噸，其中

40%?60%能被土壤中的某些微生物分解利用，這是因為它們能夠產(chǎn)生纖維素酶。研究者從牛的瘤

胃中篩選產(chǎn)生纖維素酶的纖維素分解菌，其篩選過程如圖1所示。將丙中的菌懸液轉(zhuǎn)接于含有稻草

作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用剛果紅處理，看到如圖2所示情況，下列有關(guān)敘述，

正確的是（）

l

109020挑出菌落

1mL1

mL一

-①一=②

[-][-2

一

)一)I號n號日

甲

分解纖維乙培養(yǎng)基培養(yǎng)基丙

素菌樣品

圖1

周圍不出現(xiàn)透

明圈的菌落

周圍出現(xiàn)透

明圈的菌落

圖2

A.②過程是涂布器蘸取乙中的菌液均勻地涂布在I號培養(yǎng)基表面

B.甲、乙試管中的液體都屬于液體培養(yǎng)基，主要作用是稀釋菌種

C.I號、II號培養(yǎng)基都屬于固體培養(yǎng)基，配制時先滅菌后調(diào)節(jié)pH

D.可挑取圖2中周圍出現(xiàn)透明圈的菌落，用平板劃線法繼續(xù)純化

解析：根據(jù)I號培養(yǎng)基上菌落分布均勻可知，②過程是用移液槍或移液管吸取0.1mL乙中的菌液,

用涂布器均勻涂布在I號培養(yǎng)表面，A項錯誤；液體培養(yǎng)基的作用是讓菌體增殖，而不是稀釋菌種，

甲、乙試管中的液體都是樣品稀釋液，不是液體培養(yǎng)基，B項錯誤；配置固體培養(yǎng)基的基本步驟是

計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板，故需要先調(diào)pH,再滅菌，C項錯誤；剛果紅能與纖維

素形成紅色復(fù)合物，若菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明纖維素分解菌將纖維素進行了分解，可挑取該菌

落用平板劃線法繼續(xù)純化該菌體，D項正確。

答案：D

4.（2023?廣東深圳模擬預(yù)測）酵母菌的品質(zhì)影響葡萄酒的產(chǎn)量和質(zhì)量，研究人員為分離出產(chǎn)酒精能力

強的酵母菌菌株，進行了如圖I所示實驗，甲、乙、丙、丁錐形瓶內(nèi)分別加入100mL完全培養(yǎng)基，

下列說法正確的是（）

葡

萄

酒

濾5

液稀釋1()4倍r1mLp1XIO

過t

萄5[9mL無菌水

①葡

制

的

酒分別取菌落接種無菌水區(qū)甲

作菌落0.1mL個數(shù)

個數(shù)

涂布在6挑選不同「△乙

62

募.空白培7加1造區(qū)丙

68寒養(yǎng)基上

74裔」"圣」-7［區(qū)丁

②平板涂布③發(fā)酵產(chǎn)酒精

圖I

口瓶中酒精濃度/%

□瓶中活菌數(shù)量/（1。8個.『】）靜

20-灣

15-ri1-13盡

10-2

5I5

III||->

「甲Z甫亍彳

圖n3

A.在傳統(tǒng)葡萄酒發(fā)酵過程中，為避免污染發(fā)酵裝置需嚴格滅菌

B.用稀釋涂布平板法計算出葡萄酒過濾液的活菌數(shù)為6.8x106個/L,此數(shù)值可能低于實際的活菌數(shù)

C.對培養(yǎng)基進行滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌法，菌種接種過程中的試管口、瓶口等無需再灼燒滅

菌

D.由圖II可知，丙瓶出現(xiàn)的原因可能是培養(yǎng)瓶密封不嚴，丁組酵母菌產(chǎn)酒精能力比乙強

解析：在傳統(tǒng)葡萄酒發(fā)酵過程中，利用的是葡萄皮表面的天然酵母菌，不需要嚴格滅菌，A項錯誤；

若對菌液計數(shù)，需選取菌落數(shù)處于30?300的培養(yǎng)皿計數(shù)。平均菌落數(shù)除以涂布體積乘上稀釋倍數(shù)

求的是每毫升發(fā)酵液的微生物數(shù)量，還應(yīng)該再乘1000算每升發(fā)酵液的微生物數(shù)，故先求平均菌落

數(shù)為（62+68+74）+3=68,除以涂布體積0.1mL后等于680個/mL,稀釋倍數(shù)為IxlO4,再乘1000,

最后為6.8x109個/L,計數(shù)過程中兩個或兩個以上細胞連在一起，平板上生長出一個菌落，所以數(shù)目

偏小，B項錯誤；培養(yǎng)基滅菌采用高壓蒸汽滅菌，玻璃器皿、接種用具可采用干熱滅菌，接種時的

玻璃瓶口等都需在酒精燈火焰處進行灼燒滅菌，C項錯誤；乙、丙、丁挑取不同的菌落培養(yǎng)，丙瓶

與乙、丁瓶相同條件培養(yǎng)，但培養(yǎng)液沒有酒精產(chǎn)生，且瓶內(nèi)活菌數(shù)量不低，丙瓶出現(xiàn)的原因可能是

培養(yǎng)瓶密封不嚴，進行有氧呼吸；丁組的活菌數(shù)比乙組少，但是產(chǎn)生的酒精和乙組一樣多，所以丁

組產(chǎn)生酒精能力比乙強，D項正確。

答案：D

5.（2023?廣東校聯(lián)考二模）土壤中重金屬銘（CN+）污染對植物的影響較大，并可通過食物鏈富集進入

人和動物體內(nèi)，危害人畜健康。科研人員期望通過實驗篩選出對重金屬CM+污染具有耐受性和修復(fù)

能力的細菌，實驗流程如圖所示。下列分析錯誤的是（）

固體

需圈船!取樣口些培養(yǎng)I篩選

.培養(yǎng)

"菌株

在^無菌水稀釋基甲

甲星

儀器檢測菌株對培養(yǎng)n接種n

鋁污染的耐受性

25匕48h乙氐

和修復(fù)能力丙國

液體培

養(yǎng)基乙

A.處理A、培養(yǎng)基甲和培養(yǎng)基乙需要添加重銘酸鈉等使Cr6+達到一定濃度

B.培養(yǎng)I能篩選耐受Cr6+的菌株，培養(yǎng)H能篩選修復(fù)Cr6+污染能力強的菌株

C.固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基在成分上的主要差異是前者添加了瓊脂

D.采樣土壤、接種工具、培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等工具與材料都需要進行濕熱滅菌

解析：進行處理A之前為無重金屬污染的土壤，需要向土壤中添加重鋁酸鈉至CM+達到一定離子濃

度，來創(chuàng)造有利于該微生物生長的環(huán)境，培養(yǎng)基甲、乙要用于篩選或研究對重金屬銘具有耐受性和

修復(fù)能力的細菌，也需要添加重銘酸鈉至Cr6+達到一定離子濃度，A項正確；培養(yǎng)II用于進一步篩

選耐銘菌株中對土壤中CN+的修復(fù)污染能力強的菌株，B項正確；固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基在成分

上的主要差異是前者添加了瓊脂作為凝固劑，C項正確；接種工具一般用灼燒滅菌，培養(yǎng)基和培養(yǎng)

皿等工具和材料需要高壓蒸汽滅菌，但是采樣土壤不需要滅菌，D項錯誤。

答案：D

6.（2023.廣東統(tǒng)考三模）利用馬鈴薯淀粉生產(chǎn)中產(chǎn)生的廢渣為主要原料，添加秋皮、磷酸二氫鉀、尿

素、硫酸錢、硫酸鎂等，以黑曲霉、白地霉和熱帶假絲酵母等多種真菌為發(fā)酵菌種，可生產(chǎn)單細胞

蛋白飼料。下列說法錯誤的是（）

A.廢渣能為菌種的繁殖提供碳源

B.雜菌會增加單細胞蛋白的產(chǎn)量

C.單細胞蛋白就是菌體本身

D.所用培養(yǎng)基的pH最可能為酸性

解析：結(jié)合題干“利用馬鈴薯淀粉生產(chǎn)中產(chǎn)生的廢渣為主要原料”，淀粉為有機物，故廢渣能為菌種

的繁殖提供碳源，A項正確；雜菌的存在會影響目標菌種的數(shù)量，二者存在競爭關(guān)系，會導(dǎo)致單細

胞蛋白的產(chǎn)量降低，B項錯誤；許多國家以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通

過發(fā)酵獲得了大量的微生物菌體，即單細胞蛋白，即單細胞蛋白就是菌體本身，C項正確；在培養(yǎng)

霉菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性，結(jié)合題干“以黑曲霉、白地霉和熱帶假絲酵母等多種真菌為發(fā)酵菌

種”可知所用培養(yǎng)基的pH最可能為酸性，D項正確。

答案：B

7.（2023?廣東惠州統(tǒng)考）下圖表示培養(yǎng)和純化X細菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行滅菌處理

B.步驟①倒平板操作時，倒好后應(yīng)立即將其倒過來放置

C.步驟②的目的是使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落

D.步驟③劃線結(jié)束后在培養(yǎng)皿蓋上做好標注

解析：對實驗操作的空間、操作者的衣著和手需要進行消毒處理，A項錯誤；倒完平板后立即蓋上

培養(yǎng)皿，冷卻凝固后將平板倒過來放置，B項錯誤；步驟②多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培

養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落，C項正確；圖中操作結(jié)束后需在培養(yǎng)基皿底標注菌種及接種日期等信息，而不

是在皿蓋上做標注，D項錯誤。

答案：c

8.（2023?廣州大學附屬中學三模）釀酒酵母菌種的性能是決定果酒品質(zhì)的重要因素。如圖表示從土壤

中篩選釀酒酵母的過程。下列敘述正確的是（）

別

0.5mL0.5mL0.1mL鑒

質(zhì)

優(yōu)

種

mL菌

存

保

用

備

10g無菌水輯科化培養(yǎng)

無菌水

①②③④⑤

A.圖示接種方法為稀釋涂布平板法，據(jù)結(jié)果推測1g土壤中酵母菌數(shù)最多為1.6x106

B.分離、純化酵母菌時，還可采用平板劃線法且該方法也需要進行③步驟操作

C.獲得釀酒酵母純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，故應(yīng)對土壤、培養(yǎng)基及用具進行滅菌

D.進行步驟⑤時，應(yīng)用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)④中的酵母菌，并檢測酵母菌的數(shù)量和酒精含量

解析：圖示接種方法為稀釋涂布平板法，據(jù)結(jié)果推測1g土壤中酵母菌數(shù)為1.6x106,該方法估算值

低于真實數(shù)值，故1g土壤中酵母菌數(shù)最少為1.6x106,A項錯誤；分離、純化酵母菌時，還可采用

平板劃線法且該方法不需要進行③步驟操作，B項錯誤；對土壤滅菌可將其中的釀酒酵母殺死，將

不能獲得釀酒酵母的純培養(yǎng)物，C項錯誤；用經(jīng)過④純化的菌種，需要檢測酵母菌的數(shù)量和酒精含

量，然后進行步驟⑤，D項正確。

答案：D

9.（2023?廣東統(tǒng)考二模）營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌需在基本培養(yǎng)基中添加某些物質(zhì)才能生長。A、B兩種

缺陷型菌株混合培養(yǎng)后能在基本培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落。如下所示，科學家分別對A、B兩種缺陷型菌

株進行藥物處理，使其停止分裂（不致死），混合培養(yǎng)在基本培養(yǎng)基上。已知兩種菌株間可發(fā)生DNA

轉(zhuǎn)移且僅由A菌株轉(zhuǎn)移到B菌株，不考慮基因突變，下列對實驗結(jié)果的判斷正確的是（）

①藥物處理的A菌株+未處理的B菌株-實驗結(jié)果

②藥物處理的B菌株+未處理的A菌株-實驗結(jié)果

選項①培養(yǎng)基上是否有菌落②培養(yǎng)基上是否有菌落

A有有

B無無

C有無

D無有

解析：①藥物處理的A菌株+未處理的B菌株，A菌株的DNA可以轉(zhuǎn)移到B菌株體內(nèi)，并在B菌

株內(nèi)表達，類似于A、B兩種缺陷型菌株混合培養(yǎng)，B菌株未經(jīng)過藥物處理，因此可以在基本培養(yǎng)

基上繁殖形成菌落。②藥物處理的B菌株+未處理的A菌株，A菌株的DNA可以轉(zhuǎn)移到B菌株體

內(nèi)，但B菌株經(jīng)過藥物處理，停止分裂，因此在基本培養(yǎng)基上不能繁殖成菌落。綜上，①培養(yǎng)基上

有菌落，②培養(yǎng)基上無菌落。因此，C項正確，A、B、D項錯誤。

答案：C

10.（2023?山東卷）以下是以泡菜壇為容器制作泡菜時的4個處理：①沸鹽水冷卻后再倒入壇中；②

鹽水需要浸沒全部菜料；③蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水；④檢測泡菜中亞硝酸鹽的含

量。下列說法正確的是（）

A.①主要是為了防止菜料表面的醋酸桿菌被殺死

B.②的主要目的是用鹽水殺死菜料表面的雜菌

C.③是為了使氣體只能從泡菜壇排出而不能進入

D.④可檢測到完整發(fā)酵過程中亞硝酸鹽含量逐漸降低

解析：鹽水煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響，

A項錯誤；②鹽水需要浸沒全部菜料，造成無氧環(huán)境，有利于乳酸菌無氧呼吸，B項錯誤；③蓋好

壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，是排氣減壓、隔絕空氣、防止雜菌污染等，C項正確；④檢

測泡菜中亞硝酸鹽的含量，腌制泡菜過程中亞硝酸鹽的含量先增多后減少，D項錯誤。

答案：C

11.（2023?山東濟寧統(tǒng)考三模）黃酒是世界上最古老的酒類之一，傳統(tǒng)淋飯法生產(chǎn)紹興黃酒的工藝如

圖所示。加酒藥的10?12h為前發(fā)酵，隨后進行6d左右的主發(fā)酵，然后將醪液分裝到壇中進行30d

左右的后發(fā)酵。下列敘述錯誤的是（）

蒸煮，冷卻一落缸搭窩一糖化、發(fā)酵一加曲沖缸一開耙

t、t

浸米酒藥酒糟1水、麥曲

卜水染卜壓榨+后發(fā)酵

大米成品一裝壇一煎酒工酒液」

A.酒藥中只含有酵母菌一種微生物

B.前發(fā)酵過程中缸內(nèi)含氧量降低而酵母菌數(shù)量增加

C.主發(fā)酵階段開耙降低溫度可以防止溫度過高影響發(fā)酵

D.通過煎酒殺死微生物并破壞殘存酶的活力可提高黃酒的穩(wěn)定性

解析：藥酒的制作是傳統(tǒng)發(fā)酵，菌種是混合菌種，不是單一菌種，A項錯誤；前發(fā)酵過程中酵母菌

主要進行有氧呼吸，缸內(nèi)含氧量降低，而酵母菌的數(shù)量增加，B項正確；微生物的發(fā)酵需要一定的

溫度，故主發(fā)酵階段開耙降低溫度可以防止溫度過高影響發(fā)酵，C項正確；通過煎酒殺死微生物，

可防止雜菌污染，故通過煎酒殺死微生物并破壞殘存酶的活力可提高黃酒的穩(wěn)定性，延長保質(zhì)期，

D項正確。

答案：A

12.（2023?湖南岳陽高三統(tǒng)考期末）《禮記?月令》中記載：“仲冬之月，乃命大酋，秫稻必齊，曲窠

必時，湛熾（清潔煮沸）必潔，水泉必香，陶器必良，火齊必得。兼用六物，大酋兼之，毋有差貸?！?/p>

這是一套比較完整的釀酒工藝流程，對于釀酒時節(jié)、原料選擇等都有嚴格規(guī)定，更對我國釀酒技術(shù)

的發(fā)展有著深遠的影響。下列說法正確的是()

A.“秫稻必齊”可為釀酒提供豐富的糖，隨著發(fā)酵的進行糖含量會升高

B.為防止二次污染，應(yīng)在“湛熾”后立即接種釀酒的酒曲

C.“陶器必良”可以防止酵母菌產(chǎn)生酒精的同時有醋酸的產(chǎn)生

D.在適宜的溫度下發(fā)酵，發(fā)酵液的溫度并不會隨發(fā)酵的進行而改變

解析：釀酒過程中，酵母菌進行無氧呼吸分解糖類產(chǎn)生酒精和二氧化碳，糖含量下降，A項錯誤；

在“湛熾”后立即接種釀酒的酒曲，會殺死酵母菌，應(yīng)在冷卻后加入酒曲，B項錯誤；“陶器必良”是

為了有良好的容器從而控制好發(fā)酵過程氣體條件(無氧條件)，可以確保酵母菌產(chǎn)生酒精的同時避免

醋酸的產(chǎn)生，C項正確；在發(fā)酵的過程中，酵母菌進行呼吸作用，產(chǎn)生的熱能會使發(fā)酵液的溫度升

高，D項錯誤。

答案：C

二、綜合題

13.(2023?湖南岳陽三模憫讀下列關(guān)于能源、環(huán)境和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方面的材料，回答相關(guān)問題：

材料I隨著能源和環(huán)境問題日益嚴峻，利用纖維素酶降解秸稈生產(chǎn)燃料乙醇，對緩解全球能源危

機有著重大意義?？蒲腥藛T開展篩選、誘變及選育高產(chǎn)纖維素酶菌株的相關(guān)研究，過程如下圖。請

回答：

富集培養(yǎng)基產(chǎn)纖維素酶紫外誘變產(chǎn)纖維素酶50Coy射線

黑土壤CMC平板

菌株XZ—33處埋’菌株UV—10

產(chǎn)纖維素酶菌

株UV-CO16

(1)富集培養(yǎng)后的菌種常采用法接種于CMC平板，培養(yǎng)一段時間后，可根據(jù)菌

落的形態(tài)、特征初步鑒定并挑取產(chǎn)纖維素酶菌株XZ33。

(2)誘變選育高產(chǎn)纖維素酶的菌株時，通過向培養(yǎng)基中加入剛果紅染液篩選出_________與菌落直徑

比大的菌落。

材料II尿素只有被細菌將其分解成氨之后，才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解

尿素的細菌并進行計數(shù)的過程如下圖所示。請回答：

取1mL取1mL取1mL取1mL取1mL

1

無菌水無菌無菌無菌無菌接種計算菌

落數(shù)

(即99g)水稀水稀水稀水稀

釋10倍釋10倍釋10倍釋10倍

(3)在接種前，進行①?⑤系列操作的意圖是o

⑷某同學接種了3個培養(yǎng)皿，一段時間后分別長出了54個、46個、50個菌落，根據(jù)實驗結(jié)果，該

1g土壤樣本中約有分解尿素的細菌個。

材料III某興趣小組擬用植物組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,技術(shù)路線為“培養(yǎng)基的配制一外植體的選

擇一外植體的消毒一外植體的接種-誘導(dǎo)脫分化形成愈傷組織一誘導(dǎo)再分化一煉苗移植等過程，，。請

回答：

（5）誘導(dǎo)脫分化形成愈傷組織時，向該培養(yǎng)基加入的生長素/細胞分裂素為（高、低、適中），

將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到特定的培養(yǎng)基上先誘導(dǎo)生______。

解析：（1）富集培養(yǎng)后，菌液的濃度較高，一般采用稀釋涂布平板法進行接種。（2）高產(chǎn)纖維素酶的菌

株比普通產(chǎn)纖維素酶的菌株能力較強，產(chǎn)生的纖維素酶較多，因此在剛果紅培養(yǎng)基上產(chǎn)生的透明圈

直徑與菌落直徑比較大，可以據(jù)此來篩選。（3）①?⑤系列操作是進行梯度稀釋，目的是使菌液按一

定的梯度稀釋，為后續(xù)接種和計數(shù)做準備。（4）根據(jù)圖解可知，對菌液進行稀釋時共稀釋了倍，

接種了3個培養(yǎng)皿，一段時間后三個培養(yǎng)皿中分別長出了54個、46個、50個菌落，該1g土壤樣

本中約有分解尿素的細菌=（54+46+50）+3x106=5x107個。（5）在誘導(dǎo)脫分化的培養(yǎng)基中，生長素/

細胞分裂素的比例應(yīng)適中。愈傷組織再分化，先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根（先生芽有利于生根）。

答案：（1）稀釋涂布平板

（2）透明圈直徑

（3）使菌液按一定的梯度稀釋

⑷5x107

⑸適中芽

14.（2023?湖北武漢統(tǒng)考二模）微生物代謝可分泌生物表面活性劑，其分子結(jié)構(gòu)和性質(zhì)類似磷脂，可

用于降解石油、清除農(nóng)藥殘留等。我國科學家采用如下技術(shù)方案，從被原油污染的土壤中分離得到

了可分泌生物表面活性劑的細菌。回答下列問題：

挑選,二鑒定_—

單菌一目"苣

土壤樣品稀釋

初篩培養(yǎng)基牛肉膏蛋白菌種

豚培養(yǎng)基

（1）圖示中初篩培養(yǎng)基為（填“液體”或“固體”）培養(yǎng)基。該初篩培養(yǎng)基是否需要以石油為唯一

碳源，為什么？

（2）液態(tài)的生物表面活性劑可以使紅細胞破裂，該性質(zhì)稱為溶血性，其原理是

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

依據(jù)這個性質(zhì)，可以在培養(yǎng)基中添加羊血，制成初篩培養(yǎng)基，對分泌表面活性劑的細菌進行初步篩

選，周圍出現(xiàn)溶血圈的菌落為候選菌落。初篩得到的菌落不一定是分泌生物表面活性劑的細菌，如

分泌（答出一種即可）的細菌也能溶血。

(3)將氯化十六烷基毗咤(CPC)和澳麝香草酚藍溶液(BTB)混合后加入生物表面活性劑，溶液可發(fā)生顏

色反應(yīng)，據(jù)此可對目的菌株的產(chǎn)物進行最終鑒定。BTB還可用于細胞呼吸產(chǎn)物的檢測。從

初篩培養(yǎng)基上挑選單菌落接種到牛肉膏蛋白腺液體培養(yǎng)基的目的是

(4)若要將篩選得到的目的菌用于環(huán)境保護實踐，還需要考慮的問題有

_________________________________________________________________。(答出一點即可)

解析：(1)據(jù)題意可知，在初篩培養(yǎng)基能長出菌落，說明該培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基。本實驗是要從被原

油污染的土壤中分離得到了可分泌生物表面活性劑的細菌，不是降解石油的菌株，因此該初篩培養(yǎng)

基不需要以石油為唯一碳源。(2)微生物代謝可分泌生物表面活性劑，其分子結(jié)構(gòu)和性質(zhì)類似磷脂，

可以溶解血細胞膜，因此液態(tài)的生物表面活性劑可以使紅細胞破裂。初篩時，周圍出現(xiàn)溶血圈是由

于該細菌能分泌生物表面活性劑，溶解血細胞膜形成的，細胞膜的成分主要是磷脂和蛋白質(zhì)，如果

某細菌能分泌磷脂酶和蛋白酶，也能溶解血細胞膜，形成溶血圈。(3)BTB還可用于細胞呼吸產(chǎn)物

CO2的檢測，C02能使澳麝香草酚藍溶液由藍變綠再變黃。牛肉膏蛋白陳瓊脂培養(yǎng)基是一種應(yīng)用十

分廣泛的天然培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基常用于微生物的擴大培養(yǎng)，從初篩培養(yǎng)基上挑選單菌落接種到牛

肉膏蛋白膝液體培養(yǎng)基的目的是進行擴大培養(yǎng)，以便與CPC和BTB的混合溶液發(fā)生顏色反應(yīng)。(4)

若要將篩選得到的目的菌用于環(huán)境保護實踐，還需要考慮的問題有目的菌能否在自然環(huán)境中大量生

長繁殖、是否會產(chǎn)生對環(huán)境有害的代謝物、是否會產(chǎn)生二次污染等。

答案：(1)固體不需要，本實驗的目的是篩選產(chǎn)生物表面活性劑的菌株，而不是降解石油的菌株

(2)生物表面活性劑結(jié)構(gòu)和性質(zhì)與磷脂類似，可以溶解血細胞膜蛋白酶、磷脂酶

(3)CO2進行擴大培養(yǎng)，以便與CPC和BTB的混合溶液發(fā)生顏色反應(yīng)

(4)目的菌能否在自然環(huán)境中大量生長繁殖、是否會產(chǎn)生對環(huán)境有害的代謝物、是否會產(chǎn)生二次污染

等

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l°g玉米胚芽粕“梯④初篩、獲

10g玉米皮加入/\180r/min.15℃獸③度取101、得24株

10g玉米淀粉渣①/一\振蕩好2h賴一"您稀