抗體研發(fā)助理筆試試題及答案抗體研發(fā)助理筆試試題及答案一、填空題（每題2分，共20分）單克隆抗體制備過程中，常用的細(xì)胞融合方法是______。（聚乙二醇融合法）抗體的基本結(jié)構(gòu)是由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈通過______連接而成。（二硫鍵）在抗體藥物研發(fā)中，用于評(píng)價(jià)抗體親和力的常用技術(shù)是______。（表面等離子共振技術(shù)）噬菌體展示技術(shù)中，抗體基因與______基因融合表達(dá)，使抗體展示在噬菌體表面。（噬菌體外殼蛋白）細(xì)胞培養(yǎng)過程中，常用的用于防止微生物污染的抗生素是______。（青霉素-鏈霉素混合液）抗體的可變區(qū)中，能夠與抗原特異性結(jié)合的區(qū)域被稱為______。（互補(bǔ)決定區(qū)，CDR）免疫球蛋白根據(jù)重鏈恒定區(qū)的不同可以分為______類。（5）在抗體純化過程中，利用抗原-抗體特異性結(jié)合原理進(jìn)行純化的方法是______。（親和層析法）用于檢測抗體效價(jià)的常用免疫學(xué)方法是______。（酶聯(lián)免疫吸附測定法，ELISA）生物制品的穩(wěn)定性研究中，加速試驗(yàn)通常在______溫度下進(jìn)行。（40℃）二、選擇題（每題3分，共30分）以下哪種細(xì)胞不是單克隆抗體制備過程中的常用細(xì)胞？（）A.骨髓瘤細(xì)胞B.脾細(xì)胞C.巨噬細(xì)胞D.雜交瘤細(xì)胞（答案：C）抗體與抗原結(jié)合的特異性主要取決于（）A.抗體的重鏈B.抗體的輕鏈C.抗體的可變區(qū)D.抗體的恒定區(qū)（答案：C）下列關(guān)于噬菌體展示技術(shù)的說法，錯(cuò)誤的是（）A.可以篩選到高親和力的抗體B.能夠進(jìn)行抗體的體外親和力成熟C.只能展示單鏈抗體D.可用于構(gòu)建抗體文庫（答案：C）在細(xì)胞培養(yǎng)中，CO?培養(yǎng)箱的作用主要是（）A.提供適宜的溫度B.維持培養(yǎng)液的pH值C.防止微生物污染D.促進(jìn)細(xì)胞生長（答案：B）抗體藥物的質(zhì)量控制中，不包括以下哪項(xiàng)檢測指標(biāo)？（）A.純度B.活性C.效價(jià)D.毒性（答案：D）以下哪種免疫球蛋白在血清中含量最高？（）A.IgAB.IgDC.IgGD.IgM（答案：C）用于抗體大規(guī)模生產(chǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)方式中，哪種方式可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的高密度培養(yǎng)？（）A.懸浮培養(yǎng)B.貼壁培養(yǎng)C.微載體培養(yǎng)D.固定化細(xì)胞培養(yǎng)（答案：A）在抗體研發(fā)的臨床前研究中，需要進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。以下哪種動(dòng)物常用于抗體的藥代動(dòng)力學(xué)研究？（）A.小鼠B.大鼠C.兔D.猴（答案：D）抗體的Fc段可以與以下哪種細(xì)胞表面的Fc受體結(jié)合？（）A.紅細(xì)胞B.血小板C.巨噬細(xì)胞D.淋巴細(xì)胞（答案：C）生物制品的生產(chǎn)過程中，需要遵循的質(zhì)量管理規(guī)范是（）A.GMPB.GLPC.GCPD.GSP（答案：A）三、判斷題（每題2分，共10分）多克隆抗體是由多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的，因此其特異性不如單克隆抗體。（√）抗體的親和力成熟只發(fā)生在體內(nèi)，體外無法進(jìn)行。（×）在抗體純化過程中，離子交換層析主要是根據(jù)抗體的電荷性質(zhì)進(jìn)行分離的。（√）細(xì)胞培養(yǎng)過程中，血清的主要作用是提供營養(yǎng)物質(zhì)和調(diào)節(jié)細(xì)胞生長。（√）所有的抗體都可以通過基因工程技術(shù)制備。（×）四、簡答題（每題10分，共20分）簡述單克隆抗體制備的基本流程。答案：（1）免疫動(dòng)物：選擇合適的動(dòng)物（如小鼠），用目標(biāo)抗原進(jìn)行免疫，使動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生針對(duì)該抗原的B淋巴細(xì)胞。（2分）（2）細(xì)胞融合：將免疫動(dòng)物的脾細(xì)胞（含B淋巴細(xì)胞）與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，常用聚乙二醇（PEG）作為融合劑，形成雜交瘤細(xì)胞。（2分）（3）篩選雜交瘤細(xì)胞：通過HAT培養(yǎng)基篩選，只有融合成功的雜交瘤細(xì)胞能夠在HAT培養(yǎng)基中生長，未融合的脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞會(huì)死亡。（2分）（4）克隆化培養(yǎng)：對(duì)篩選出的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，采用有限稀釋法或單細(xì)胞顯微操作法，獲得單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆，確保每個(gè)克隆分泌的抗體是單一特異性的。（2分）（5）抗體檢測與鑒定：對(duì)克隆化培養(yǎng)后的雜交瘤細(xì)胞上清液進(jìn)行抗體檢測，常用ELISA等方法檢測抗體的特異性、效價(jià)等，對(duì)陽性克隆進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，并進(jìn)一步鑒定抗體的各項(xiàng)性質(zhì)。（2分）請(qǐng)闡述抗體藥物研發(fā)過程中，臨床前研究的主要內(nèi)容及意義。答案：臨床前研究主要內(nèi)容包括：（1）藥學(xué)研究：包括抗體的制備工藝、質(zhì)量控制、穩(wěn)定性研究等。確定穩(wěn)定、可重復(fù)的制備工藝以保證產(chǎn)品質(zhì)量一致性；建立完善的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)確?？贵w的純度、活性等符合要求；通過穩(wěn)定性研究確定產(chǎn)品的有效期和儲(chǔ)存條件。（3分）（2）藥效學(xué)研究：在體外細(xì)胞模型和體內(nèi)動(dòng)物模型上評(píng)價(jià)抗體的治療效果，如對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用、對(duì)炎癥反應(yīng)的抑制等，明確抗體的作用機(jī)制和藥效特點(diǎn)，為臨床研究提供藥效學(xué)依據(jù)。（3分）（3）藥代動(dòng)力學(xué)研究：研究抗體在動(dòng)物體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄過程，確定藥物的半衰期、血藥濃度-時(shí)間曲線等參數(shù)，為臨床給藥方案的設(shè)計(jì)提供參考。（2分）（4）安全性研究：進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、長期毒性試驗(yàn)、特殊毒性試驗(yàn)（如致畸、致癌、致突變?cè)囼?yàn)）等，評(píng)估抗體藥物的安全性，預(yù)測可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)，為臨床試驗(yàn)的安全性監(jiān)測提供指導(dǎo)。（2分）臨床前研究的意義在于全面評(píng)估抗體藥物的可行性和潛在風(fēng)險(xiǎn)，為后續(xù)的臨床試驗(yàn)提供科學(xué)依據(jù)，確保臨床試驗(yàn)的安全性和有效性，減少研發(fā)失敗的風(fēng)險(xiǎn)。五、論述題（20分）隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，抗體藥物在疾病治療領(lǐng)域發(fā)揮著越來越重要的作用。請(qǐng)結(jié)合當(dāng)前的技術(shù)進(jìn)展，論述抗體藥物研發(fā)的新趨勢和面臨的挑戰(zhàn)。答案：抗體藥物研發(fā)的新趨勢：（1）雙特異性及多特異性抗體研發(fā)：能夠同時(shí)結(jié)合兩種或多種不同抗原表位，拓展了抗體藥物的作用機(jī)制，如可同時(shí)靶向腫瘤細(xì)胞和免疫細(xì)胞，增強(qiáng)抗腫瘤效果；或同時(shí)阻斷多個(gè)信號(hào)通路，提高治療效果，代表藥物如Amivantamab等。（4分）（2）抗體偶聯(lián)藥物（ADC）的優(yōu)化：通過連接子將細(xì)胞毒性藥物與抗體偶聯(lián)，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的靶向殺傷。新的研發(fā)方向包括開發(fā)更高效、穩(wěn)定的連接子，選擇更具活性的細(xì)胞毒性藥物，以及優(yōu)化抗體與藥物的比例，提高ADC藥物的療效和安全性，如Enhertu在乳腺癌治療中展現(xiàn)出優(yōu)異療效。（4分）（3）基于新型靶點(diǎn)的抗體研發(fā)：隨著對(duì)疾病發(fā)病機(jī)制研究的深入，發(fā)現(xiàn)了許多新的潛在治療靶點(diǎn)，如腫瘤免疫檢查點(diǎn)分子之外的新型免疫調(diào)節(jié)靶點(diǎn)、罕見病相關(guān)靶點(diǎn)等，針對(duì)這些靶點(diǎn)的抗體藥物研發(fā)為疾病治療帶來新希望，如針對(duì)SARS-CoV-2的中和抗體用于新冠治療。（4分）（4）抗體的人源化及全人源化技術(shù)改進(jìn)：通過基因工程技術(shù)進(jìn)一步降低抗體的免疫原性，提高抗體藥物在人體內(nèi)的耐受性和療效，如噬菌體展示技術(shù)和轉(zhuǎn)基因小鼠技術(shù)用于制備全人源抗體。（3分）面臨的挑戰(zhàn)：（1）研發(fā)成本高：抗體藥物研發(fā)涉及復(fù)雜的技術(shù)和多個(gè)環(huán)節(jié)，從靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)到臨床試驗(yàn)再到上市，需要投入大量的資金和時(shí)間，研發(fā)失敗風(fēng)險(xiǎn)高，增加了研發(fā)成本。（2分）（2）免疫原性問題：盡管人源化及全人源化技術(shù)不斷發(fā)展，但仍有部分抗體藥物在人體內(nèi)可能引發(fā)免疫反應(yīng)，導(dǎo)致療效降低甚至出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)，預(yù)測和評(píng)估抗體的免疫原性仍是難題。（2分）（3）