2025年免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)范考核模擬試題答案及解析一、單項(xiàng)選擇題1.免疫熒光技術(shù)中，常用的熒光素是（）A.異硫氰酸熒光素B.四甲基異硫氰酸羅丹明C.藻紅蛋白D.以上都是2.下列哪種方法可用于檢測細(xì)胞表面抗原（）A.免疫沉淀法B.免疫印跡法C.流式細(xì)胞術(shù)D.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，常用的酶是（）A.辣根過氧化物酶B.堿性磷酸酶C.葡萄糖氧化酶D.脲酶4.免疫比濁法測定的是（）A.抗原抗體復(fù)合物的濁度B.抗原的濃度C.抗體的濃度D.以上都不是5.下列哪種免疫測定方法屬于均相免疫測定（）A.放射免疫測定B.酶免疫測定C.熒光免疫測定D.免疫散射比濁測定6.免疫組化技術(shù)中，常用的標(biāo)記物是（）A.放射性核素B.酶C.熒光素D.以上都是7.下列哪種方法可用于檢測細(xì)胞因子（）A.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)B.流式細(xì)胞術(shù)C.免疫印跡法D.以上都是8.免疫沉淀法的原理是（）A.抗原與抗體特異性結(jié)合B.抗原與抗體非特異性結(jié)合C.抗體與標(biāo)記物特異性結(jié)合D.抗體與標(biāo)記物非特異性結(jié)合9.免疫印跡法的主要步驟不包括（）A.樣品制備B.電泳分離C.轉(zhuǎn)膜D.顯色10.流式細(xì)胞術(shù)可用于（）A.細(xì)胞計(jì)數(shù)B.細(xì)胞分型C.細(xì)胞功能分析D.以上都是二、多項(xiàng)選擇題1.免疫熒光技術(shù)的特點(diǎn)包括（）A.特異性高B.靈敏度高C.可定位D.操作簡單2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的類型有（）A.雙抗體夾心法B.間接法C.競爭法D.捕獲法3.免疫比濁法的影響因素有（）A.抗原抗體比例B.反應(yīng)溫度C.反應(yīng)時間D.電解質(zhì)濃度4.免疫組化技術(shù)的應(yīng)用范圍包括（）A.腫瘤診斷B.病理研究C.免疫疾病診斷D.細(xì)胞培養(yǎng)5.檢測細(xì)胞因子的方法有（）A.生物學(xué)活性測定法B.免疫學(xué)測定法C.分子生物學(xué)測定法D.以上都是6.免疫沉淀法可用于（）A.抗原鑒定B.抗體鑒定C.抗原抗體復(fù)合物的分離D.以上都是7.免疫印跡法可用于（）A.蛋白質(zhì)的定性分析B.蛋白質(zhì)的定量分析C.蛋白質(zhì)的表達(dá)水平檢測D.蛋白質(zhì)的相互作用研究8.流式細(xì)胞術(shù)的優(yōu)點(diǎn)包括（）A.快速B.準(zhǔn)確C.可多參數(shù)分析D.可進(jìn)行細(xì)胞分選三、填空題1.免疫熒光技術(shù)中，常用的熒光顯微鏡有_____和_____。2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，常用的固相載體有_____和_____。3.免疫比濁法分為_____和_____兩種類型。4.免疫組化技術(shù)中，常用的切片方法有_____和_____。5.檢測細(xì)胞因子的生物學(xué)活性測定法包括_____和_____。6.免疫沉淀法常用的沉淀劑有_____和_____。7.免疫印跡法中，常用的顯色方法有_____和_____。8.流式細(xì)胞術(shù)可檢測的細(xì)胞參數(shù)包括_____、_____和_____。四、判斷題（√/×）1.免疫熒光技術(shù)只能用于檢測細(xì)胞表面抗原。（）2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，酶標(biāo)記物的活性越高，檢測的靈敏度就越高。（）3.免疫比濁法中，抗原抗體復(fù)合物的濁度與抗原抗體的濃度成正比。（）4.免疫組化技術(shù)可以用于檢測組織中的所有蛋白質(zhì)。（）5.檢測細(xì)胞因子的免疫學(xué)測定法只能檢測細(xì)胞因子的含量，不能檢測其活性。（）6.免疫沉淀法只能用于檢測可溶性抗原。（）7.免疫印跡法中，轉(zhuǎn)膜的目的是將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相載體上。（）8.流式細(xì)胞術(shù)可以對單個細(xì)胞進(jìn)行分析。（）五、簡答題1.簡述免疫熒光技術(shù)的基本原理。2.簡述酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的操作步驟。六、案例分析患者，男性，45歲，因反復(fù)咳嗽、咳痰、喘息10年，加重1周入院?；颊?0年前開始出現(xiàn)咳嗽、咳痰，多為白色泡沫樣痰，每年發(fā)作3個月以上，冬季加重。近1周來，咳嗽、咳痰加重，伴有喘息，夜間不能平臥。查體：T36.5℃，P100次/分，R25次/分，BP120/80mmHg。神志清楚，端坐呼吸，口唇發(fā)紺，桶狀胸，雙肺叩診過清音，雙肺呼吸音減弱，可聞及廣泛哮鳴音，心率100次/分，律齊，各瓣膜聽診區(qū)未聞及雜音。血常規(guī)：WBC10.0×10?/L，N0.75，L0.25。胸部X線片：雙肺紋理增多、紊亂，透亮度增加。問題1：該患者的初步診斷是什么？問題2：為明確診斷，還需要進(jìn)一步做哪些檢查？試卷答案一、單項(xiàng)選擇題（答案）1.答案：D解析：免疫熒光技術(shù)中常用的熒光素有異硫氰酸熒光素、四甲基異硫氰酸羅丹明、藻紅蛋白等。2.答案：C解析：流式細(xì)胞術(shù)可用于檢測細(xì)胞表面抗原，通過熒光標(biāo)記的抗體與細(xì)胞表面抗原結(jié)合，然后用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。3.答案：A解析：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中常用的酶是辣根過氧化物酶，其具有活性高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。4.答案：A解析：免疫比濁法測定的是抗原抗體復(fù)合物的濁度，通過檢測濁度的變化來反映抗原抗體的反應(yīng)程度。5.答案：D解析：免疫散射比濁測定屬于均相免疫測定，其不需要分離結(jié)合和游離的標(biāo)記物，操作簡單、快速。6.答案：D解析：免疫組化技術(shù)中常用的標(biāo)記物有放射性核素、酶、熒光素等，根據(jù)不同的檢測目的和要求選擇合適的標(biāo)記物。7.答案：D解析：檢測細(xì)胞因子的方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)、免疫印跡法等，不同的方法具有不同的特點(diǎn)和適用范圍。8.答案：A解析：免疫沉淀法的原理是抗原與抗體特異性結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，然后通過離心等方法將其沉淀下來。9.答案：D解析：免疫印跡法的主要步驟包括樣品制備、電泳分離、轉(zhuǎn)膜、免疫反應(yīng)和顯色等，不包括顯色。10.答案：D解析：流式細(xì)胞術(shù)可用于細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞分型、細(xì)胞功能分析等，是一種非常重要的細(xì)胞分析技術(shù)。二、多項(xiàng)選擇題（答案）1.答案：ABC解析：免疫熒光技術(shù)的特點(diǎn)包括特異性高、靈敏度高、可定位等，但其操作相對復(fù)雜，需要專業(yè)的設(shè)備和技術(shù)人員。2.答案：ABCD解析：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的類型有雙抗體夾心法、間接法、競爭法、捕獲法等，不同的類型適用于不同的檢測目的和樣本類型。3.答案：ABCD解析：免疫比濁法的影響因素包括抗原抗體比例、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間、電解質(zhì)濃度等，這些因素都會影響抗原抗體復(fù)合物的形成和濁度的變化。4.答案：ABC解析：免疫組化技術(shù)的應(yīng)用范圍包括腫瘤診斷、病理研究、免疫疾病診斷等，但其不能用于細(xì)胞培養(yǎng)。5.答案：D解析：檢測細(xì)胞因子的方法有生物學(xué)活性測定法、免疫學(xué)測定法、分子生物學(xué)測定法等，這些方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，可根據(jù)實(shí)際情況選擇合適的方法。6.答案：D解析：免疫沉淀法可用于抗原鑒定、抗體鑒定、抗原抗體復(fù)合物的分離等，是一種非常重要的免疫檢測技術(shù)。7.答案：ABCD解析：免疫印跡法可用于蛋白質(zhì)的定性分析、定量分析、表達(dá)水平檢測、相互作用研究等，是一種非常常用的蛋白質(zhì)分析技術(shù)。8.答案：ABCD解析：流式細(xì)胞術(shù)的優(yōu)點(diǎn)包括快速、準(zhǔn)確、可多參數(shù)分析、可進(jìn)行細(xì)胞分選等，是一種非常強(qiáng)大的細(xì)胞分析技術(shù)。三、填空題（答案）1.答案：普通熒光顯微鏡；激光共聚焦顯微鏡解析：免疫熒光技術(shù)中常用的熒光顯微鏡有普通熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡，激光共聚焦顯微鏡具有更高的分辨率和靈敏度。2.答案：聚苯乙烯微孔板；硝酸纖維素膜解析：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中常用的固相載體有聚苯乙烯微孔板和硝酸纖維素膜，聚苯乙烯微孔板具有操作方便、成本低等優(yōu)點(diǎn)，硝酸纖維素膜具有吸附能力強(qiáng)、特異性高等優(yōu)點(diǎn)。3.答案：透射比濁法；散射比濁法解析：免疫比濁法分為透射比濁法和散射比濁法兩種類型，透射比濁法是通過檢測透過抗原抗體復(fù)合物的光強(qiáng)度來反映濁度的變化，散射比濁法是通過檢測抗原抗體復(fù)合物散射的光強(qiáng)度來反映濁度的變化。4.答案：石蠟切片；冰凍切片解析：免疫組化技術(shù)中常用的切片方法有石蠟切片和冰凍切片，石蠟切片具有組織形態(tài)保存好、可長期保存等優(yōu)點(diǎn)，冰凍切片具有操作簡單、快速等優(yōu)點(diǎn)。5.答案：細(xì)胞增殖法；細(xì)胞毒法解析：檢測細(xì)胞因子的生物學(xué)活性測定法包括細(xì)胞增殖法和細(xì)胞毒法，細(xì)胞增殖法是通過檢測細(xì)胞因子對細(xì)胞增殖的影響來反映其活性，細(xì)胞毒法是通過檢測細(xì)胞因子對細(xì)胞的毒性作用來反映其活性。6.答案：聚乙二醇；硫酸銨解析：免疫沉淀法常用的沉淀劑有聚乙二醇和硫酸銨，聚乙二醇具有沉淀效果好、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，硫酸銨具有沉淀效率高、成本低等優(yōu)點(diǎn)。7.答案：化學(xué)發(fā)光法；顯色底物法解析：免疫印跡法中常用的顯色方法有化學(xué)發(fā)光法和顯色底物法，化學(xué)發(fā)光法具有靈敏度高、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)，顯色底物法具有操作簡單、成本低等優(yōu)點(diǎn)。8.答案：細(xì)胞大?。患?xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)；細(xì)胞表面抗原解析：流式細(xì)胞術(shù)可檢測的細(xì)胞參數(shù)包括細(xì)胞大小、細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)、細(xì)胞表面抗原等，通過對這些參數(shù)的分析可以了解細(xì)胞的生物學(xué)特性和功能狀態(tài)。四、判斷題（答案）1.答案：×解析：免疫熒光技術(shù)不僅可以用于檢測細(xì)胞表面抗原，還可以用于檢測細(xì)胞內(nèi)抗原。2.答案：√解析：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，酶標(biāo)記物的活性越高，其與底物的反應(yīng)就越靈敏，檢測的靈敏度也就越高。3.答案：×解析：免疫比濁法中，抗原抗體復(fù)合物的濁度與抗原抗體的濃度在一定范圍內(nèi)成正比，當(dāng)抗原抗體的濃度過高或過低時，濁度的變化不明顯。4.答案：×解析：免疫組化技術(shù)只能用于檢測組織中表達(dá)量較高的蛋白質(zhì)，對于表達(dá)量較低的蛋白質(zhì)可能無法檢測到。5.答案：√解析：檢測細(xì)胞因子的免疫學(xué)測定法主要是通過檢測細(xì)胞因子與抗體的結(jié)合來反映其含量，不能直接反映其活性。6.答案：×解析：免疫沉淀法不僅可以用于檢測可溶性抗原，還可以用于檢測細(xì)胞表面抗原和細(xì)胞內(nèi)抗原。7.答案：√解析：免疫印跡法中，轉(zhuǎn)膜的目的是將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相載體上，以便于后續(xù)的免疫反應(yīng)和檢測。8.答案：√解析：流式細(xì)胞術(shù)可以對單個細(xì)胞進(jìn)行分析，通過對細(xì)胞表面抗原、細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)等參數(shù)的檢測，可以了解細(xì)胞的生物學(xué)特性和功能狀態(tài)。五、簡答題（答案）1.答：免疫熒光技術(shù)的基本原理是將熒光素標(biāo)記在抗體上，然后用標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞中的抗原特異性結(jié)合，在熒光顯微鏡下觀察熒光的分布和強(qiáng)度，從而確定抗原的位置和含量。2.答：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的操作步驟包括：①包被：將抗原或抗體固定在固相載體上；②封閉：用無關(guān)蛋白質(zhì)封閉固相載體上未結(jié)合的位點(diǎn)；③加樣：加入待檢測的樣本和標(biāo)準(zhǔn)品；④孵育：使抗原或抗體與樣本中的相應(yīng)物質(zhì)特異性結(jié)合；⑤洗滌：去除未結(jié)合的物質(zhì)；⑥加酶標(biāo)記物：加入酶標(biāo)記的抗體或抗原；⑦孵育：使酶標(biāo)記物與抗原或抗體特異性結(jié)合；⑧洗滌：去除未結(jié)合的酶標(biāo)記物；⑨加底物：加入酶的底物，使酶催化底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)；⑩終止反應(yīng)：加入終止液，終止酶的反應(yīng)；?測定：用酶標(biāo)儀測定吸光度，根據(jù)