四川pcr上崗證考試題及答案

一、單項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR技術的主要發(fā)明人是（）A.KaryMullisB.JamesWatsonC.FrancisCrickD.RosalindFranklin答案：A2.以下哪種酶是PCR反應所必需的？（）A.限制性內切酶B.DNA連接酶C.TaqDNA聚合酶D.逆轉錄酶答案：C3.PCR反應的變性溫度一般是（）A.50-60℃B.70-80℃C.90-95℃D.100-110℃答案：C4.在PCR反應中，引物的作用是（）A.提供模板B.提供能量C.引導DNA合成的起始D.終止DNA合成答案：C5.進行PCR檢測時，防止污染的關鍵措施不包括（）A.分區(qū)操作B.頻繁更換手套C.共用試劑D.定期清潔儀器設備答案：C6.PCR產物的電泳檢測一般采用（）A.瓊脂糖凝膠電泳B.聚丙烯酰胺凝膠電泳C.淀粉凝膠電泳D.等電聚焦電泳答案：A7.以下關于PCR循環(huán)次數(shù)的說法正確的是（）A.循環(huán)次數(shù)越多越好B.循環(huán)次數(shù)一般為20-30次C.循環(huán)次數(shù)由模板量唯一決定D.循環(huán)次數(shù)與引物濃度無關答案：B8.對于低拷貝數(shù)的模板進行PCR檢測時，可采用（）技術提高檢測靈敏度。A.巢式PCRB.反向PCRC.不對稱PCRD.實時定量PCR答案：A9.PCR反應體系中，dNTP的作用是（）A.構建磷酸二酯鍵B.穩(wěn)定DNA結構C.提供模板D.與酶結合答案：A10.在熒光定量PCR中，用于檢測PCR產物的熒光信號的物質不包括（）A.SYBRGreenB.TaqMan探針C.溴化乙錠D.分子信標答案：C二、多項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應的基本要素包括（）A.模板DNAB.引物C.TaqDNA聚合酶D.dNTPE.緩沖液答案：ABCDE2.以下哪些因素可能影響PCR的特異性（）A.引物設計B.退火溫度C.模板純度D.酶的活性E.循環(huán)次數(shù)答案：ABCDE3.PCR技術在以下哪些領域有廣泛應用（）A.醫(yī)學診斷B.法醫(yī)學鑒定C.基因克隆D.分子進化研究E.食品檢測答案：ABCDE4.防止PCR污染的有效方法有（）A.物理隔離B.紫外照射C.使用dUTP-UDG系統(tǒng)D.嚴格的操作規(guī)程E.專用的實驗服和鞋套答案：ABCDE5.以下關于引物設計的原則正確的是（）A.長度一般為18-25bpB.避免引物自身形成二級結構C.引物間不能互補D.引物的GC含量在40%-60%E.要與模板完全匹配答案：ABCDE6.熒光定量PCR的優(yōu)點包括（）A.特異性強B.靈敏度高C.可實時監(jiān)測D.定量準確E.操作簡便答案：ABCDE7.在進行PCR實驗時，需要對以下哪些設備進行校準和維護（）A.熱循環(huán)儀B.離心機C.電泳儀D.移液器E.紫外分光光度計答案：ABCDE8.以下屬于PCR衍生技術的有（）A.巢式PCRB.多重PCRC.反向PCRD.數(shù)字PCRE.重組PCR答案：ABCDE9.影響PCR反應效率的因素有（）A.模板質量B.引物濃度C.酶量D.dNTP濃度E.反應體系的pH值答案：ABCDE10.PCR反應中，緩沖液的作用包括（）A.提供合適的pH環(huán)境B.提供離子強度C.穩(wěn)定酶的活性D.促進引物與模板結合E.參與DNA合成反應答案：ABC三、判斷題（每題2分，共10題）1.PCR可以對RNA進行直接擴增。（）答案：錯誤2.引物的濃度越高，PCR反應的特異性就越高。（）答案：錯誤3.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反應。（）答案：錯誤4.在PCR反應中，退火溫度越高，引物與模板結合越牢固。（）答案：錯誤5.PCR產物的大小只與模板有關。（）答案：錯誤6.只要有足夠的模板，PCR反應就一定能成功。（）答案：錯誤7.熒光定量PCR只能檢測DNA，不能檢測RNA。（）答案：錯誤8.進行PCR實驗時，不需要對實驗室環(huán)境進行特殊要求。（）答案：錯誤9.巢式PCR是為了提高PCR的特異性和靈敏度。（）答案：正確10.所有的PCR反應都需要進行電泳檢測。（）答案：錯誤四、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述PCR的基本原理。答案：PCR是一種體外擴增特定DNA片段的技術。以擬擴增的DNA分子為模板，以一對分別與模板互補的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復制的機制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成。通過多次循環(huán)（變性-退火-延伸），使目的DNA片段得到大量擴增。2.簡述在PCR實驗中如何避免假陽性結果。答案：要避免假陽性結果，可采取分區(qū)操作防止交叉污染；使用高質量試劑，避免試劑污染；規(guī)范實驗操作流程，如頻繁更換手套、勤消毒；使用UNG-dUTP防污染系統(tǒng)等。3.簡要說明引物在PCR反應中的重要性。答案：引物在PCR反應中至關重要。它能特異性地與模板DNA結合，引導TaqDNA聚合酶從引物的3'端開始合成新的DNA鏈，決定了擴增的起始位置，引物的特異性影響PCR反應的特異性，引物的質量和設計也會影響PCR的效率等。4.簡述熒光定量PCR中相對定量和絕對定量的區(qū)別。答案：相對定量是測定目的基因相對于內參基因的表達量變化，結果為倍數(shù)關系；而絕對定量是通過標準曲線對樣品中的目的基因進行精確的拷貝數(shù)測定，得出具體的數(shù)量。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論PCR技術在新冠疫情防控中的應用。答案：PCR技術在新冠疫情防控中作用巨大?？捎糜跈z測新冠病毒核酸，確定感染情況。對于病例的早期診斷、密切接觸者篩查、疫情監(jiān)測等方面是關鍵技術，有助于控制疫情傳播，指導防控策略的制定。2.如何提高PCR檢測的準確性？答案：提高準確性可從多方面著手。包括優(yōu)化引物設計，保證模板質量，嚴格控制反應條件如溫度、酶量、dNTP濃度等，防止污染，采用高靈敏度和特異性的檢測方法如熒光定量PCR，定期對儀器設備進行校準等。3.闡述PCR技術未來可能的發(fā)展方向。答案：未來PCR技術可能朝著更高靈敏度