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乳用馬分子標(biāo)記輔助選育技術(shù)規(guī)程2015-12-01實(shí)施2015-12-01實(shí)施新疆維吾爾自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)GB/T1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫(xiě)》要求編寫(xiě)。本標(biāo)準(zhǔn)由新疆維吾爾自治區(qū)畜牧廳提出。本標(biāo)準(zhǔn)由新疆維吾爾自治區(qū)畜牧廳歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)負(fù)責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉武軍、于茜、邵勇鋼、王瓊、莫合塔爾·夏甫開(kāi)提、努孜古麗·圖爾蓀、耿明、王軍、何美升、劉玲玲。1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了乳用馬產(chǎn)奶量性能PRLR基因的儀器設(shè)備及試劑、溶液配制、引物序列及PCR儀、微波爐、高壓滅菌鍋。3.2試劑Tris堿，硼酸，EDTA-Na?H?O,DL2000DNAMarker,50bpplus2溶液配制方法參考《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》。PRLR1:5'-TTTCATGCGTTATCPRLR2:5'-GAAGGGCTTAGTTA6操作技術(shù)規(guī)程6.1基因組提取基因組DNA提取等技術(shù)均參照《分子克隆試驗(yàn)指南》。6.2PCR擴(kuò)增度退火30s,72℃延伸1min,進(jìn)入35個(gè)循環(huán)；72℃延伸10min后4℃保存，產(chǎn)物用2%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。取目的片段擴(kuò)增條帶清晰明亮且無(wú)雜帶的P利用8%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物，經(jīng)銀染后顯色，用凝膠成像儀將凝膠成像。對(duì)比基因型示意圖，判定基因型?；蛐蜑锳A的為乳用馬產(chǎn)奶性能基因(PRLR)純合體，AB基因型為乳用馬產(chǎn)奶性能基因(PRLR)雜合體，BB基因型為乳用馬產(chǎn)奶性能基因

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