第第頁β-葡萄糖苷酶分離純化及酶學性質(zhì)研究進展文獻綜述β-葡萄糖苷酶可來自植物、動物和微生物。因微生物生長快、酶的來源廣且分離簡單，因此有關微生物來源的β-葡萄糖苷酶的分離純化和酶學性質(zhì)研究受到了關注。王清海（2006）通過硫酸銨鹽析、DEAF-52陰離子交換層析和SephadexG-75凝膠層析，純化得到源自鏈霉菌的β-葡萄糖苷酶，該酶的大小為63.89kDa，最佳反應溫度為65℃，在70℃以下穩(wěn)定，最佳反應pH=5，在pH為4-6范圍內(nèi)穩(wěn)定，Ca2+、Mn2+可激活其活性，而Cu2+、Hg2+、Fe2+則可抑制其活性，以水楊苷為底物測得其Km=10.664mmol/L、Vmax=0.0525μmol·L-1·min-1。郝偉偉（2011）經(jīng)硫酸銨沉淀、SephadexG-100凝膠層析和DEAE-52陰離子交換層析，純化得到來源于米曲霉的β-葡萄糖苷酶，該酶的大小為90kDa，最適反應溫度為60℃，在30℃-50℃條件下穩(wěn)定，最適反應pH=5，pH穩(wěn)定范圍為4-6，Ag+、Zn2+、Co2+、Fe2+、Mn2+對其活性具有激活作用，而Cu2+、K+、Fe3+則具有抑制作用，其對水楊苷和纖維二糖的特異性較強，但不可水解羧甲基纖維素和微晶纖維素。以水楊苷為底物測得其Km=0.676mmol/L、Vmax=0.0206μmol·L-1·min-1，以纖維二糖為底物測得其Km=2.906mmol/L、Vmax=0.138μmol·L-1·min-1。Farahnaz等（2020）通過DEAE-52陰離子交換層析和Resource-S陽離子交換層析純化得到來自黑曲霉的β-葡萄糖苷酶，該酶的大小為115kDa，最佳反應溫度為50℃，在60℃以下穩(wěn)定，最佳反應pH=4.5，在pH為3-8條件下穩(wěn)定，20%的乙醇和甲醇對其活性無顯著影響。以水楊苷為底物測得其Km=19.7mmol/L、Vmax=1.199μmol·L-1·min-1。Watanabe等（2016）利用硫酸銨鹽析和ToyopearlSuperQ-650M離子交換色譜從米曲霉中分離純化得到β-葡萄糖苷酶，該酶的大小為89.2kDa，最適反應溫度為50℃，在60℃以下穩(wěn)定，最佳反應pH=4.5，在pH為2-8.5范圍內(nèi)穩(wěn)定，Ca2+、Fe3+、Mg2+和Mn2+可激活其活性，而Hg2+和Zn2+則可抑制其活性，10%的乙醇抑制了其38%的活性，10mmol/L的葡萄糖抑制了其66.9%的活性。其可水解龍膽二糖而對其他低聚糖和芳基類糖苷不發(fā)揮水解作用，以龍膽二糖為底物測得其Km=34.9mmol/L。Lucas等（2019）采用SephadexDEAE-A50柱層析、SephacrylS-200HR凝膠層析和TSKDEAE-5PW陰離子交換層析從絲孢菌Chalaraparadoxa中分離純化得到β-葡萄糖苷酶，該酶的大小為167kDa，最佳反應溫度為45℃，在50℃以下穩(wěn)定，最佳反應pH=4-5，pH溫度范圍為6-9，Ag2+和Hg2+對其活性具有抑制作用，而20%的乙醇將其活性激活了近三倍，其對纖維二糖和對硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷具有活性，但不水解乳糖、麥芽糖、蔗糖、纖維素底物或吡喃半乳糖苷，吡喃甘露糖苷或?qū)ο趸椒幽咎擒?，以對硝基苯?β-D-葡萄糖苷為底物測得其Km=0.52mmol/L，Vmax=294units/mg。植物源β-葡萄糖苷酶的純化研究也一直在進行之中，李蕊伽（2017）通過蘆薈葉皮的勻漿、硫酸銨鹽析、DEAE-Sepharosefastflow層析和Superdex-200prepgrade層析，從蘆薈葉皮中獲得β-葡萄糖苷酶，該酶的大小為69.7kDa，最適反應溫度為40℃，在50℃以下穩(wěn)定，最適反應pH=5，pH穩(wěn)定范圍為4-6，K+、Mn2+對其具有激活作用，而Cu2+、Ca2+、Co2+、Cd2+、Ca2+則具有抑制作用，30%及以下的乙醇對其有激活作用。以對硝基苯基-β-D-葡萄糖苷為底物測得其Km=2.21mmol/L、Vmax=1.381μmol·L-1·min-1。侯夢蘭（2018）通過硫酸銨鹽析DEAE-52離子交換層析和SephadexG-200凝膠層析從甜菊葉片純化得到β-葡萄糖苷酶，該酶的大小為55kDa，最佳反應溫度為30℃，在30℃-40℃穩(wěn)定，最佳反應pH=7，在pH為6-8范圍內(nèi)穩(wěn)定，F(xiàn)e2+、K+和Mn2+可激活其活性，而Cu2+、Co2+和Hg2+則抑制了該酶活性。Bietal（2019）利用DEAE-SepharoseCL-6B離子交換色譜、SepharoseCL-4B疏水層析色譜和SephadexG-75凝膠層析色譜純化得到來自黑梅種子的β-葡萄糖苷酶，該酶的大小為60kDa，最適反應溫度為55℃，在45℃以下穩(wěn)定，最適反應pH=5，pH穩(wěn)定范圍為5-8，Cu2+、Mn2+和Ca2+可激活其活性，而Hg2+、Ag+和Co2+則可抑制其活性，30%及以下的乙醇對其有激活作用。以對硝基苯基-β-D-葡萄糖苷為底物測得其Km=0.58mmol/L、Vmax=90.2μmol·mg-1·min-1。Kara等（2011）采用硫酸銨分段鹽析和Sepharose-4B-L疏水層析和葡聚糖SephadexG-100凝膠層析從橄欖果中分離純化得到β-葡萄糖苷酶，該酶的大小為65kDa，最佳反應溫度為42℃，最佳反應pH=5.5，F(xiàn)e2+可激活其活性，而Ag+、Ni2+、Cd2+、Pb2+和Cu2+可抑制其活性。以對硝基苯基-β-D-葡萄糖苷為底物測得其Km=2.22mmol/L，Vmax=370.4U/mg。β-葡萄糖苷酶主要分布在動物的內(nèi)臟，石艷等（2004）通過硫酸銨鹽析、DEAE-cellulose(DE-32)層析和SephadexG-200凝膠層析從海洋蠑螺的內(nèi)臟純化得到β-葡萄糖苷酶，其最佳反應溫度為45℃，在30℃以下穩(wěn)定，最佳反應pH=5.5，pH為4.5-7.0條件下穩(wěn)定，Mg2+可激活該酶活性，而Hg2+、Pb2+和Cu2+則可抑制其活性，以對硝基苯基-β-D-葡萄糖苷為底物測得其Km=0.076mmol/L、Vmax=3.0μmol·L-1·min-1；Ying等（2007）利用DEAE-SepharoseCL-6B離子交換色譜和ToyoperalButyl650C疏水層析色譜從中國白玉蝸牛中純化得到β-葡萄糖苷酶，該酶的大小為220kDa，最適反應溫度為50℃，在30℃-50℃條件下穩(wěn)定，最適反應pH=5，pH穩(wěn)定范圍為4-10。以對硝基苯基-β-D-葡萄糖苷為底物測得其Km=0.224mmol/L、Vmax=0.203mmol·mg-1·min-1。石賢愛等（2014）采用硫酸銨分段鹽析，DEAE-纖維素離子交換層析和葡聚糖SephadexG-100凝膠層析從南日鮑內(nèi)臟中純化得到β-葡萄糖苷酶，該酶的大小為90kDa，最適反應溫度為50℃，在40℃以下溫定，最適反應pH=5.0，pH穩(wěn)定范圍為5-6，Mn2+、Cu2+、Ba2+、Zn2+對其具有激活作用。而Al3+則對其具有抑制作用。以對硝基苯基-β-D-葡萄糖苷為底物測得其Km=4.803mmol/L，Vmax=4.151μmol·L·s。參考文獻卜瀟．葡萄酒中植物乳桿菌β-葡萄糖苷酶及其蘋果酸—乳酸發(fā)酵潛力研究．[碩士學位論文]．楊凌：西北農(nóng)林科技大學，2016楚春雪．嗜熱毛殼菌Chaetomiumthermophiliumβ-葡萄糖苷酶的分離純化及性質(zhì)研究．[碩士學位論文]．濟南：山東農(nóng)業(yè)大學，2004程仕偉，屈慧鴿，欒麗英，姜文廣，李記明．新疆霞多麗自然發(fā)酵醪中本土釀酒酵母的選育與發(fā)酵特性．中國食品學報，2017，17(08):119-125董梅．酒類酒球菌31MBRβ-D-葡萄糖苷酶的分離純化及酶學性質(zhì)研究．[碩士學位論文]．楊凌：西北農(nóng)林科技大學，2014丁小娟．嗜酸乳桿菌β-葡萄糖苷酶及其與槲皮素糖苷底物作用研究．[碩士學位論文]．貴陽：貴州大學，2019高曉航，李雪雁，孫春麗．賀蘭山東麓葡萄酒產(chǎn)區(qū)釀酒酵母的分離及其主要特性研究．食品與發(fā)酵工業(yè)，2016，42(006):62-66葛奉娟，王欲曉，周俊，張榮霞．重鉻酸鉀氧化比色法和氣相色譜法定量分析發(fā)酵液中乙醇的比較研究．徐州工程學院學報(自然科學版)，2011，26(2):64-68郭天賜，趙石磊，劉石生．苦杏仁β-葡萄糖苷酶水解豆?jié){中大豆異黃酮的工藝研究．食品研究與開發(fā)，2019(12)茍贇．橡膠籽β-葡萄糖苷酶水解苦丁茶葉黃酮糖苷的工藝探究．[碩士學位論文]．海口：海南大學，2020侯孟蘭，楊永恒，張婷，孫玉明，張永俠，原海燕，黃蘇珍，徐曉洋．甜菊葉片β-葡萄糖苷酶的提取及其性質(zhì)研究．中國農(nóng)學通報，2020，36(07):128-134黃敏菊．幾種α-葡萄糖苷酶抑制劑的協(xié)同抑制研究．[碩士學位論文]．廣州：中山大學，2004李慶華．高產(chǎn)β-葡萄糖普酶釀酒酵母的篩選及其發(fā)酵特性的研究．[碩士學位論文]．楊凌：西北農(nóng)林科技大學，2009郝偉偉．產(chǎn)β-葡萄苷酶真菌的篩選鑒定及其酶的分離純化和基因的克隆．[碩士學位論文]．成都：四川農(nóng)業(yè)大學，2011.李亞輝．酒類酒球菌SD-2a和31MBR的β-D-葡萄糖苷酶研究．[碩士學位論文]．楊凌：西北農(nóng)林科技大學，2013盧柯．荔枝及荔枝酒中特征香氣成分研究．[碩士學位論文]．楊凌：西北農(nóng)林科技大學，2014李新菊．非釀酒酵母的篩選及多樣性研究．[碩士學位論文]．新疆：石河子大學，2015劉浩．葡萄模擬發(fā)酵體系中香氣糖苷水解及發(fā)酵香氣成分生成的動力學特征．[碩士學位論文]．楊凌：西北農(nóng)林科技大學，2016李蕊伽．蘆薈葉皮β-葡萄糖苷酶的分離純化及酶學性質(zhì)和功能基團研究．[碩士學位論文]．重慶：西南大學，2017胡少鋒．苜蓿鏈霉菌內(nèi)切β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶表達及酶學性質(zhì)的研究．[碩士學位論文]．保定：河北農(nóng)業(yè)大學，2019李紫微，曹庸，苗建銀．大豆異黃酮及其苷元的研究進展．食品工業(yè)科技，2019，40(20):348-355呂天琪，杜超，曹小彥，王海鳴，錢和．鎖擲酵母破壁技術的研究．中國釀造，2017，036(012):88-91劉延鑫，李婉濤，劉冬梅，劉學芳，張鐘允，張振強，劉文第．紅巖草提取物對隱性乳房炎奶牛乳酶的影響、療效及安全性評價．中國畜牧獸醫(yī)，2013，40(06):165-168劉歡，李皓，陳長武，何文兵．β-葡萄糖苷酶對‘雙優(yōu)’干紅葡萄酒理化性質(zhì)和香氣物質(zhì)的影響．食品與發(fā)酵工業(yè)，2018，44(11):138-146.劉鑫楠，宗倩倩，李金鵬，