第56講動(dòng)物細(xì)胞工程

素

理解應(yīng)用結(jié)構(gòu)與功能觀理解動(dòng)物細(xì)胞1：程的生命社

養(yǎng)結(jié)合生產(chǎn)生活實(shí)踐,

能力原理和操作觀念會(huì)忸新應(yīng)|

與分析動(dòng)物細(xì)胞工程

貴|用能力|

能的應(yīng)用，關(guān)注倫理與

解決問i構(gòu)建各種動(dòng)物細(xì)胞工程操作流程模型,分工科學(xué)任

力人體健康

題能力：析操作注意事項(xiàng)：思維

L鎖定要點(diǎn)?互動(dòng)探究高效復(fù)習(xí)落實(shí)基礎(chǔ)知識(shí)

考點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

夯基自主梳理

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念：從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這

些細(xì)胞一生長和增殖的技術(shù),

2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件

營養(yǎng)條件：糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生

一素、促生長因子、微量元素等營養(yǎng)物質(zhì).

此外通常還需［I］蠅等一些天然成分

①②培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)

無菌、無行滅菌處理；

培J

一毒的環(huán)境［②在無菌環(huán)境卜操作；

養(yǎng)

.③定期更換培養(yǎng)液,清除代謝物

條

適宜的溫度、pH和滲透壓：哺乳動(dòng)物的細(xì)

件一胞培養(yǎng)溫度多以（36.5士。.5）七為宜,多數(shù)動(dòng)

物細(xì)胞生存的適宜pH為匣］7.2~7.1

%%的空氣：其中。2為細(xì)胞代

適宜的

謝所必需的

氣休環(huán)境

5%的CO2：園維持培養(yǎng)液的pH

3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程

取動(dòng)物組織塊

機(jī)械法in胰蛋白晦、

②膠原蛋白薛

分散成叵］單個(gè)細(xì)胞

加入培養(yǎng)液

制成困細(xì)胞懸液

［裝瓶

國原代培養(yǎng)

|細(xì)胞密度過|

回懸浮生長白海由貼壁生長

物積累、營養(yǎng)下■接觸

/物質(zhì)缺乏等抑制

囹分裂受阻或停止

［分瓶

回傳代培養(yǎng)

4.干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用

（1）功能：干細(xì)胞是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞,與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)密切相關(guān)。

（2）來源：早期胚胎、骨髓和臍帶血等。

（3）分類：包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。

來源：江早期胚胎

胚胎干細(xì)胞

特點(diǎn)：具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的

（ES細(xì)胞）

E］任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一

步形成機(jī)體的⑶所rr組織和器‘戶;

甚至個(gè)體的潛能

來源：即成體組織或器'日內(nèi)的干

細(xì)胞，包括骨髓中的造血干細(xì)胞、

神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)「細(xì)胞和睪丸

中的精原干細(xì)胞等

成體干細(xì)胞一

特點(diǎn)：一般認(rèn)為.成體干細(xì)胞具有

⑸組織特異性，只能分化成⑹掛

定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完

整個(gè)體的能力

□概念檢測(cè)

I.（選擇性必修3P45思考?討論）幼齡動(dòng)物的細(xì)胞比老齡動(dòng)物的細(xì)胞更容易進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。Z）

2.（選擇性必修3P44旁欄思考）進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常用胃蛋白酶將其分散成單個(gè)細(xì)胞。（X）

3.（選擇性必修3P44正文）體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一類能懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖，另一類需要貼附于某些基質(zhì)表

面才能生長增殖。3

4.（選擇性必修3P45正文）人們通常將動(dòng)物組織經(jīng)蛋白晦處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱

為傳代培養(yǎng)。（4）

5.（選擇性必修3P46正文）干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。（4）

6.（選擇性必修3P43從社會(huì)中來）用燒傷病人自體皮膚的單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)出的皮膚進(jìn)行自體移植可避免免疫排斥反

應(yīng)。N）

突破未能提升

【探究】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件和過程

結(jié)合下面動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程，探究以下問題:

取動(dòng),組織塊

剪碎組織

H用胰蛋白酶、膠原蛋

A白醐等處理分散成單

&個(gè)細(xì)胞

制成細(xì)胞懸液

轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中一」______________

進(jìn)行原代培養(yǎng)0^*一

貼滿瓶壁的細(xì)胞用胰蛋白酶處理

分散成單個(gè)細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液

轉(zhuǎn)入培養(yǎng)

液中進(jìn)行

傳代培芥

放入二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)取材時(shí)，一般是取胚胎組織或幼齡動(dòng)物的組織或器官，請(qǐng)解釋原因。

提示：胚胎組織或幼齡動(dòng)物的組織或器官分裂、增殖旺盛。

（2）進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白的分散細(xì)胞，說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白的可以嗎？為

什么？

提示：蛋白質(zhì)。不可以。多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2?7.4,胃蛋白酶（適宜pH約為2）在此環(huán)境中沒有

活性，而胰蛋白酶或膠原蛋白罅在此環(huán)境中活性較高，因此胰蛋白酶或膠原蛋白酶適用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的處理。

（3）培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)到什么時(shí)候就不再分裂增殖？

提示：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞停止分裂增殖。

【歸納總結(jié)】

I.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的比較

項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)

理論基礎(chǔ)細(xì)胞增殖植物細(xì)胞的全能性

無菌；用機(jī)械的方法或質(zhì)蛋白酶、膠原蛋白酶等處理，使組織分

培養(yǎng)前處理無菌、離體

散成單個(gè)細(xì)胞

取財(cái)動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織植物幼嫩的部位或花藥等

培養(yǎng)基性質(zhì)

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)

水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素

培養(yǎng)基成分糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等

和瓊脂等

產(chǎn)生大量細(xì)胞，不形成新個(gè)體可產(chǎn)生新個(gè)體

快速繁殖、作物脫毒、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化

人造皮膚的構(gòu)建、動(dòng)物分泌蛋白的規(guī)?；a(chǎn)

生產(chǎn)和單倍體育種等

①都需人工條件下的無菌操作；②都需要適宜的溫度、pH等條件：③都進(jìn)行有絲分裂，都不涉及減

相同點(diǎn)數(shù)分裂

2.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）及其應(yīng)用

必夕轉(zhuǎn)入相

取成纖維關(guān)因子

X病細(xì)胞等

胰島細(xì)胞神經(jīng)元血細(xì)胞

肝細(xì)胞心肌細(xì)胞腸上皮細(xì)胞

夯基自主梳理

1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)

c

一概念：使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一

個(gè)細(xì)胞的技術(shù)

動(dòng)一方法：PEG做合法、電做合法和滅活病毒

物透導(dǎo)法等

細(xì)

一結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)：細(xì)胞膜的流動(dòng)性

胞

加一結(jié)果：形成具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳

信息的雜交細(xì)胞

合

技f①突破了有性雜交方法的局限，使

遠(yuǎn)緣雜交成為可能；②成為研究細(xì)

木一意義《胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和培育生

物新品種等的市要手段,為制造單

I;［克隆抗體開辟了新途徑

【教材拾遺】（選擇性必修3P48相關(guān)信息）滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能

夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使密胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，

細(xì)胞發(fā)生觸合。

2.單克隆抗體及其應(yīng)用

（1）制備原理

①B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)：一種B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體.

②骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn)：能在體外大利姻殖°

③雜交質(zhì)加他的特點(diǎn)：既能嗜廿用殖,又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的圻定抗體。

（2）制備過程

用［U特定的抗原灼小取進(jìn)用特定的困選原培養(yǎng)基進(jìn)行篩

行免疫.并從該小鼠的脾選:在該培養(yǎng)班上冏未融合的

中得到能產(chǎn)生特定抗體親本細(xì)胞和融介的具有⑹同種

的MB淋巴細(xì)胞隹的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有融合

的?雜交瘤細(xì)胞才能生長

多種途多半交細(xì)胞

注射特

定的抗原

.⑥夠??

培養(yǎng)骨

骨惻瘤細(xì)胞將骨髓瘤細(xì)胞與

眥瘤細(xì)胞

B淋巴細(xì)胞融合

雜交瘤細(xì)胞（既能

迅速因大量增殘,

又能產(chǎn)生回抗雨

對(duì)上述經(jīng)選擇培

將抗體

養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞

固陽性的雜交

進(jìn)行皿克降化培

曲緬庖在體外

從周細(xì)胞培養(yǎng)液養(yǎng)和回抗體檢

條件下大規(guī)模

或小鼠國腹水中測(cè)?經(jīng)多次篩選.

獲取大量的單培養(yǎng)?或注射就可長得足夠數(shù)

到小鼠腹腔內(nèi)

克隆抗體量的能分泌圜齒

增殖

,'而抗體的細(xì)胞

k

體外培養(yǎng)

單克隆抗球、、

注射到小鼠腹腔內(nèi)抗體檢測(cè)出陽

性的雜交瘤細(xì)

胞（分泌的抗體

能與1B特定抗

原結(jié)合）

（3）單克隆抗體的特點(diǎn)和應(yīng)用

【思考】抗體一藥物偶聯(lián)物（ADC）的抗體和藥物各具有什么作用？

提示：抗體主要發(fā)揮靶向運(yùn)輸作用，通過特異性結(jié)合靶細(xì)胞表面的抗原，將藥物輸送到靶細(xì)胞；藥物發(fā)揮治療效

應(yīng)，如殺傷靶細(xì)胞。

口概念檢測(cè)

1.（選擇性必修3P48相關(guān)信息）滅活是用物理或化學(xué)手段殺滅細(xì)菌或病毒，使其各種結(jié)構(gòu)都失去相應(yīng)的功能。

（X）

2.（選擇性必修3P37、P48正文）滅活的病毒能促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合，但不能促進(jìn)植物細(xì)胞融合。（4）

3.（選擇性必修3P48?49圖2-16）在選擇性培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞會(huì)死亡，融合的三種細(xì)胞類型（只考慮

兩個(gè)細(xì)胞間融合）都能生長。（X）

4.（選擇性必修3P48?49圖2-16）多種B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞題合篩選后，還需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，才

能獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。（力

5.（選擇性必修3P50正文）單克隆抗體能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大

量制備，（Y）

6.（選擇性必修3P50思考?討論）抗體一藥物偶聯(lián)物通常由抗體、接頭、藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成。（V）

7.（選擇性必修3P50思考?討論）抗體一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆

抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷.

突破未能提升

【探究】單克隆抗體

如圖為單克隆抗體制備流程（順序已被打亂），請(qǐng)據(jù)圖分析:

Q0

已免疫的注射?雜交瘤體外培養(yǎng)能產(chǎn)生特定

B淋巴細(xì)胞細(xì)胞抗體的雜交瘤細(xì)胞

ACD

培養(yǎng)來取的單克降產(chǎn)生特定抗把產(chǎn)生特定抗體

骨髓瘤細(xì)胞抗體體的雜交瘤的雜交痛細(xì)胞注

細(xì)胞入小鼠腹腔

EFGH

（1）圖中B注射的物質(zhì)是什么？其目的是什么？

提示：注射特定抗原；目的是刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答，從而產(chǎn)生相應(yīng)B淋巴細(xì)胞。

（2）在獲取C細(xì)胞的過程中，篩選淘汰了哪些細(xì)胞?

提示：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞（“B-B”細(xì)胞、“瘤一瘤”細(xì)胞）都會(huì)被淘大，只有融合的

雜交搐細(xì)胞（“B—瘤”細(xì)胞）才能生長。

（3）C細(xì)胞有什么特點(diǎn)？

提示：既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定的抗體。

（4）請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來。

提小:

（5）單克隆抗體被廣泛用作診斷試劑的原因是什么？

提示：?jiǎn)慰寺】贵w能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備。

【歸納總結(jié)】

1.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較

［植物體細(xì)胞雜交）（比較項(xiàng)可慟物細(xì)胞硼合］

VVV

細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、

細(xì)胞的全能性一細(xì)胞增殖

1

融合

除去細(xì)胞壁一使細(xì)胞分散開

「前處理1

纖維素施和國“藥］胰蛋白酶、膠原

〔相關(guān)㈣一蛋白酶

果膠酣

物理法:電融合

法、離心法等;化PEG融合法、電融

學(xué)法:聚乙二醇一合法、滅活病毒誘

（PEG）融合法、導(dǎo)法等

高Ca"—高pH融I

合法等

朵種植株X一雜交細(xì)胞

培育植物新品主要用于制備單

種等克隆抗體

突破遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，打破了生殖隔

離，擴(kuò)展r雜交的親本組合

2.單克隆抗體制備過程中兩次篩選的原因、方法及目的

項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選

篩選誘導(dǎo)融合后會(huì)得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性

原因合的細(xì)胞培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞

項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選

用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種

用多孔培養(yǎng)皿（96孔板）培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交

篩選細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞（“B—B”細(xì)胞、“瘤

瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選

方法一痛”細(xì)胞）都會(huì)死亡，只有雜交瘤細(xì)胞

得到能產(chǎn)生所需特異性抗體的細(xì)胞群

（“B—瘤”細(xì)胞）才能生長

篩選

得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞

目的

應(yīng)用典題演練

1.（2024?江蘇南京高三?聯(lián)考）細(xì)胞a和細(xì)胞b經(jīng)過細(xì)胞融合形成細(xì)胞d,如下圖所示，下列說法正確的是（）

^>43也

細(xì)胞融合

A.若d為雜交瘤細(xì)胞，則經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選后，可用于生產(chǎn)單克隆抗體

B.若d為動(dòng)物細(xì)胞受精卵，則形成d的過程涉及細(xì)胞膜的選擇透過性

C.若d形成無性雜種植株，則直接用PEG誘導(dǎo)a、b細(xì)胞融合為c

D.若d形成無性雜種植株，則其涉及的變異類型屬于染色體變異

解析：D經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選得到的雜交瘤細(xì)胞經(jīng)多次單一抗體篩選才可用于生產(chǎn)單克隆抗體，A錯(cuò)誤；若d為動(dòng)

物細(xì)胞受精卵，形成受精卵過程，涉及細(xì)胞膜的流動(dòng)性，B錯(cuò)誤；若d形成無性雜種植株，則采月了細(xì)胞工程中的

植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，則將a、b兩植物細(xì)胞先經(jīng)纖維素晦和果膠罅處理獲取原生質(zhì)體，再經(jīng)PEG處理后可得到d

細(xì)胞，C錯(cuò)誤；若d形成無性雜種植株，則其涉及的變異類型屬于染色體變異中的染色體數(shù)目變異，D正確。

2.在醫(yī)藥領(lǐng)域，單克隆抗體藥物占有非常重要的地位。2023年，全球銷售額排名前十的藥物中，單克隆抗體藥物

占比過半。下圖是“早早孕診斷試劑盒”抗人絨毛膜促性腺激素（HCG）單克隆抗體制備流程示意圖，下列說法

正確的是（）

注射

HCG-'小鼠一甲

融合r選擇培養(yǎng)-

一》乙----------**丙一

骨髓瘤細(xì)胞

-M士g2大規(guī)模十檢測(cè)

抗HCG單克隆抗體*；.—丁^----

培養(yǎng)

A.給小鼠注射HCG的FI的是讓小鼠產(chǎn)生HCG抗體及相應(yīng)的記憶細(xì)胞

B.圖中乙選擇培養(yǎng)到的丙都能迅速大量增殖，并產(chǎn)生HCG抗體

C.丁經(jīng)體外細(xì)胞培養(yǎng)后可從細(xì)胞培養(yǎng)液中分離到HCG單克隆抗體

D.圖示過程應(yīng)用的原理包括動(dòng)物細(xì)胞膜的流動(dòng)性和動(dòng)物細(xì)胞核的全能性

解析：C給小鼠注射HCG的目的是讓小鼠產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，A錯(cuò)誤；圖中乙選擇培養(yǎng)到的丙是雜交瘤細(xì)

胞，未經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，產(chǎn)生的抗體不一定是HCG抗體，B錯(cuò)誤；抗體是分泌蛋白，丁經(jīng)體外細(xì)胞培養(yǎng)

后可從細(xì)胞培養(yǎng)液中分離到HCG單克隆抗體，C正確；圖示過程應(yīng)用的原理包括動(dòng)物細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增

殖，D錯(cuò)誤。

知識(shí)柘展

單克隆抗體的制備不用漿細(xì)胞，而是用B淋巴細(xì)胞的原因

與骨髓瘤細(xì)胞融合的是混雜細(xì)胞（技術(shù)上是脾臟細(xì)胞經(jīng)密度梯度離心分離所得，實(shí)際上成分很復(fù)雜，但含有

活化的B細(xì)胞及少量漿細(xì)胞），為什么不用漿細(xì)胞來制備單克隆抗體呢？是因?yàn)闈{細(xì)胞的分離純化太麻煩、成本

商O

考點(diǎn)三動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

夯基自主梳理

1.概念、原理及類型

(

動(dòng)將動(dòng)物?個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)

物胞中,使這個(gè)幣:新組合的細(xì)胞發(fā)行成新胚胎.

細(xì)繼而發(fā)育成幽個(gè)體的技術(shù)用核移植的方

胞法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物

核

--原理-動(dòng)物細(xì)胞核的全能性

移

植

L胚胎細(xì)胞核移植

技L分類1

困匚體細(xì)胞核移植

2.體細(xì)胞核移植的過程

3.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景及存在的問題

畜牧業(yè)加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育

①作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)醫(yī)用蛋白；

醫(yī)藥

②一轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物的細(xì)胞、組織或器官可用于異種移植；

衛(wèi)生

③人核移植胚胎干細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)分化形成相應(yīng)的細(xì)胞、組織或器官，可用于器官移植

前景①研究克隆動(dòng)物可使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過程:②克隆一批遺傳背景相同的動(dòng)

科學(xué)

物，可以通過它們之間的對(duì)比來分析致病基因；③克隆特定疾病模型的動(dòng)物，為研究致病

研究

機(jī)制不開發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助

保護(hù)瀕

增加瀕危物種的存活數(shù)量

危物種

問題①成功率.非常低；②絕大多數(shù)克隆動(dòng)物存在健康問題,表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷

【教材拾遺】（選擇性必修3P54相關(guān)信息）目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操餒法。也

有人采用搬度霞心、斃外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下

去核或使其中的處限變&。

口概念檢測(cè)

1.（選擇性必修3P52正文）動(dòng)物體細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞必須是卵細(xì)胞。（義）

2.（選擇性必修3P52相關(guān)信息）減數(shù)分裂II中期（MH期）卵母細(xì)胞中的“核”其實(shí)是紡錘體一染色體復(fù)合物。

（4）

3.（選擇性必修3P53圖2-18）重構(gòu)胚的激活可用Ca2‘載體、蛋白醉合成抑制劑等方法。2

4.（選擇性必修3P53相關(guān)信息）重構(gòu)胚是天然形成的胚胎，具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。（X）

5.（選擇性必修3P54相關(guān)信息）動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。（0

6.（選擇性必修3P52正文）克隆動(dòng)物具備兩個(gè)親本的遺傳特性，因此克隆動(dòng)物的制備屬于有性繁殖。（義）

突破未能提升

【探究】動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

克隆羊一一多莉的產(chǎn)生過程如下：

母羊A一乳腺細(xì)胞、取核，重組r早期

母羊B一卵母細(xì)胞后水細(xì)胞-胚胎一

克隆羊,發(fā)■帶.胚胎

“多莉”c移植

（1）結(jié)合動(dòng)物細(xì)胞核移植的過程，分析為什么體細(xì)胞核移植較胚胎細(xì)胞核移植更困難。

提示：由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易；而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困

難。因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度就明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。

（2）從多莉的產(chǎn)生過程可以看出多莉有三個(gè)親本，探究多莉的性狀表現(xiàn)與三個(gè)親本的關(guān)系并分析原因。

提示：①與母羊A的關(guān)系：大多數(shù)性狀與母羊A相同，因核基因型與母羊A一樣。

②與母羊B的關(guān)系：受質(zhì)基因控制的性狀與母羊B相同，因細(xì)胞質(zhì)中的基因來自母羊B。

③與母羊C的關(guān)系：性狀與母羊C無關(guān)，因母羊C沒有為新個(gè)體提供遺傳物質(zhì)。

（3）動(dòng)物體細(xì)胞核移植屬于有性生殖還是無性生殖？并分析原因。

提示：無性生殖。動(dòng)物體細(xì)胞核移植最終得到的個(gè)體的細(xì)胞核中遺傳物質(zhì)完全來自一個(gè)個(gè)體，不是精卵受精得到

的，因此屬于無性生殖。

（4）據(jù)圖分析，該技術(shù)涉及了哪些技術(shù)操作？

提示：該技術(shù)涉及動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、胚胎移植等操作。

（5）動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)的理論基礎(chǔ)（原理）是什么？

提示：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。

（6）受體細(xì)胞為什么選用卵母細(xì)胞？

提示：因?yàn)槁涯讣?xì)胞體積大，易操作；去核時(shí)易于同時(shí)吸走第一極體；卵母細(xì)胞中含有激發(fā)細(xì)胞核全能性的物

質(zhì)。

【歸納總結(jié)】

1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物體細(xì)胞核移植的比較

項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物體細(xì)胞核移植

原理細(xì)胞增殖動(dòng)物體細(xì)胞核的全能性

得到大量細(xì)脆

目的克隆動(dòng)物

或細(xì)胞產(chǎn)物

從卵巢中取

供體出卵母細(xì)胞

體細(xì)胞1（MII期

動(dòng)物組織塊［細(xì)胞培養(yǎng)去產(chǎn)

剪碎、腴妥［白酶等處理抄伊注入4去核卵

單個(gè)細(xì)胞體細(xì)

母細(xì)胞

［加培養(yǎng)液胞核

細(xì)胞

細(xì)胞懸液、融合

|放入培養(yǎng)瓶

重組細(xì)胞

過程

原代培養(yǎng)

（細(xì)胞貼壁生長）重構(gòu)胚

［接觸抑制胚胎

,,移植

膠蛋白薛處理，

分瓶繼續(xù)培養(yǎng)代孕雌

性個(gè)體

I［生出

傳代培養(yǎng)

與供體遺傳物