檢驗(yàn)科標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）范本一、引言檢驗(yàn)科標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）是保障檢驗(yàn)質(zhì)量、規(guī)范操作流程、降低生物安全風(fēng)險(xiǎn)的核心文件，其制定與實(shí)施需貼合臨床需求、符合行業(yè)規(guī)范（如ISO____、CNAS相關(guān)要求），確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠、操作過(guò)程可追溯。本范本圍繞樣本管理、儀器操作、檢驗(yàn)流程、質(zhì)量控制等核心環(huán)節(jié)，提供實(shí)操性強(qiáng)的SOP框架，供醫(yī)療機(jī)構(gòu)參考優(yōu)化。二、樣本管理SOP（一）樣本采集1.靜脈血樣本選擇適配采血管（抗凝/血清管），確認(rèn)受檢者狀態(tài)（如血糖、血脂檢測(cè)需空腹）。消毒穿刺部位（75%乙醇，待干后穿刺），止血帶使用≤2分鐘，避免溶血/凝血。采血后輕柔顛倒抗凝管8~10次，標(biāo)注姓名、編號(hào)、采集時(shí)間，立即送檢（特殊項(xiàng)目如血?dú)庑?0分鐘內(nèi)檢測(cè)；無(wú)法及時(shí)送檢的血清樣本，4℃冷藏不超過(guò)4小時(shí)）。2.尿液樣本留取中段尿（清潔容器，避免污染），常規(guī)尿檢測(cè)量≥10mL，2小時(shí)內(nèi)送檢；尿培養(yǎng)需無(wú)菌容器，采集后立即冷藏或送檢，避免細(xì)菌繁殖。3.腦脊液/胸腹水樣本無(wú)菌操作采集，分裝至無(wú)菌管（生化、常規(guī)、培養(yǎng)管分開(kāi)），30分鐘內(nèi)送檢，室溫保存不超過(guò)2小時(shí)。（二）樣本接收與驗(yàn)收1.核對(duì)樣本標(biāo)識(shí)（姓名、編號(hào)、采集時(shí)間）與申請(qǐng)單一致，檢查樣本狀態(tài)（是否溶血、凝固、污染、量不足）。2.不合格樣本（如溶血血清、量不足尿液）需記錄原因，通知臨床重新采集，禁止強(qiáng)行檢測(cè)。（三）樣本處理與保存1.血清/血漿制備：室溫靜置30分鐘（血清管）或立即離心（抗凝管，3000rpm，10分鐘），分離后分裝至凍存管，標(biāo)注信息。2.長(zhǎng)期保存：-20℃（普通樣本）或-80℃（特殊樣本如核酸、酶類(lèi)），避免反復(fù)凍融；保存期限按項(xiàng)目要求（如HIV樣本保存5年，常規(guī)生化樣本保存1周）。三、儀器設(shè)備操作SOP（一）通用操作原則1.開(kāi)機(jī)前檢查：電源穩(wěn)定性、試劑/耗材余量、廢液桶容量，確認(rèn)儀器表面清潔無(wú)雜物。2.校準(zhǔn)與質(zhì)控：新試劑啟用、儀器維修后需校準(zhǔn)（使用廠家標(biāo)準(zhǔn)品）；每日檢測(cè)前運(yùn)行室內(nèi)質(zhì)控，結(jié)果在控后方可檢測(cè)樣本。（二）全自動(dòng)生化分析儀操作流程（以某品牌為例）1.開(kāi)機(jī)準(zhǔn)備：?jiǎn)?dòng)儀器，檢查試劑倉(cāng)溫度（2~8℃）、反應(yīng)杯狀態(tài)（無(wú)殘留/破損），加載當(dāng)日試劑（核對(duì)批號(hào)、有效期）。2.樣本上機(jī)：掃描樣本條碼，核對(duì)編號(hào)與申請(qǐng)單，加樣量200μL（血清/血漿），避免氣泡；選擇檢測(cè)項(xiàng)目（如ALT、GLU），設(shè)置反應(yīng)條件（37℃，30分鐘）。3.結(jié)果審核：檢測(cè)完成后，核對(duì)結(jié)果趨勢(shì)（如空腹血糖＞11.1mmol/L需結(jié)合臨床），異常結(jié)果（如膽紅素＞342μmol/L）需稀釋樣本重測(cè)，記錄復(fù)檢過(guò)程。4.關(guān)機(jī)維護(hù)：執(zhí)行儀器自帶清洗程序（如反應(yīng)杯、加樣針清洗），清理廢液，關(guān)閉電源，記錄當(dāng)日儀器日志（試劑消耗、故障提示）。（三）設(shè)備維護(hù)與校準(zhǔn)1.每日清潔：擦拭儀器表面、加樣針外壁，清理試劑殘留；每周深度維護(hù)（如反應(yīng)杯超聲清洗、光路校準(zhǔn)）。2.校準(zhǔn)周期：生化分析儀每月校準(zhǔn)（廠家標(biāo)準(zhǔn)品），血球儀每半年校準(zhǔn)（新鮮血或定值品）；校準(zhǔn)后記錄校準(zhǔn)液批號(hào)、結(jié)果，確保偏差＜2%。四、檢驗(yàn)項(xiàng)目操作SOP（典型項(xiàng)目示例）（一）血常規(guī)檢測(cè)（血球儀法）1.樣本準(zhǔn)備：EDTA-K?抗凝全血，室溫放置≤4小時(shí)，上機(jī)前顛倒混勻（避免血小板聚集）。2.檢測(cè)操作：加載樣本，選擇“血常規(guī)”模式，儀器自動(dòng)進(jìn)樣、計(jì)數(shù)（WBC、RBC、PLT等參數(shù)），記錄直方圖（異常圖形如血小板聚集需推片鏡檢）。3.鏡檢復(fù)核：當(dāng)PLT＜50×10?/L或＞500×10?/L時(shí)，推片瑞氏染色，人工計(jì)數(shù)血小板、分類(lèi)白細(xì)胞，與儀器結(jié)果比對(duì)，差異＞15%時(shí)重新檢測(cè)。（二）生化檢測(cè)（酶法/比色法）1.試劑準(zhǔn)備：復(fù)溶凍干試劑（按說(shuō)明書(shū)加蒸餾水，室溫靜置15分鐘），避免反復(fù)凍融。2.加樣順序：樣本+R?試劑（37℃孵育5分鐘）→加R?試劑（孵育10分鐘）→讀取吸光度，計(jì)算濃度（如GLU：己糖激酶法，吸光度變化與葡萄糖濃度成正比）。3.干擾處理：脂血樣本（TG＞5.6mmol/L）需高速離心（____rpm，10分鐘）后取上清檢測(cè)；黃疸樣本（TBIL＞342μmol/L）需稀釋后重測(cè)，校正吸光度干擾。（三）凝血功能檢測(cè)（凝固法）1.樣本要求：枸櫞酸鈉抗凝（9:1比例），采集后立即離心（3000rpm，10分鐘），分離血漿（避免血小板殘留）。2.檢測(cè)操作：預(yù)溫試劑（37℃，15分鐘），加血漿50μL+試劑（如PT試劑），記錄凝固時(shí)間（儀器自動(dòng)監(jiān)測(cè)光信號(hào)變化）。3.質(zhì)控要求：每批次試劑啟用時(shí)，用定值質(zhì)控品驗(yàn)證（PT偏差＜3秒，APTT偏差＜5秒），否則重新校準(zhǔn)。五、質(zhì)量控制SOP（一）室內(nèi)質(zhì)量控制1.質(zhì)控品選擇：同批號(hào)、水平1/2（覆蓋參考區(qū)間低、高值），與樣本同條件檢測(cè)。2.檢測(cè)頻率：每日檢測(cè)前（新項(xiàng)目/新試劑啟用時(shí)增加頻率），記錄結(jié)果并繪制Levey-Jennings圖。3.失控處理：結(jié)果超出±3s時(shí)，立即停止檢測(cè)，排查原因（試劑失效、儀器故障、質(zhì)控品污染），重新校準(zhǔn)后復(fù)測(cè)，記錄處理過(guò)程（如“2023.10.08，ALT質(zhì)控水平2超出+3s，原因：試劑R?過(guò)期，更換試劑后復(fù)測(cè)在控”）。（二）室間質(zhì)量評(píng)價(jià)1.樣本處理：收到質(zhì)評(píng)樣本后，按常規(guī)樣本檢測(cè)（避免特殊處理），記錄原始結(jié)果。2.結(jié)果上報(bào)：按時(shí)提交至質(zhì)評(píng)機(jī)構(gòu)，分析反饋結(jié)果（如“2023年第3季度，Hb質(zhì)評(píng)結(jié)果偏倚-2.5%，原因：血球儀校準(zhǔn)過(guò)期，重新校準(zhǔn)后第4季度偏倚＜1%”）。六、生物安全與廢棄物管理SOP（一）生物安全防護(hù)1.操作防護(hù)：佩戴醫(yī)用手套、口罩、護(hù)目鏡（處理傳染性樣本時(shí)），穿工作服，禁止在實(shí)驗(yàn)區(qū)飲食、化妝。2.應(yīng)急處理：樣本溢出時(shí)，用0.55%含氯消毒劑覆蓋30分鐘，清理后消毒地面；銳器傷時(shí)，立即擠出傷口血液，流動(dòng)水沖洗，75%乙醇消毒，報(bào)告科室并跟蹤隨訪。（二）醫(yī)療廢棄物處理1.分類(lèi)收集：感染性廢物（采血管、棉簽）→黃色垃圾袋；銳器（針頭、玻片）→銳器盒；化學(xué)廢物（廢試劑、校準(zhǔn)液）→防滲漏容器。2.處置流程：每日稱(chēng)重、登記（種類(lèi)、重量、日期），交由有資質(zhì)機(jī)構(gòu)處置，保存轉(zhuǎn)運(yùn)聯(lián)單≥3年。七、SOP文檔管理與持續(xù)改進(jìn)（一）記錄規(guī)范1.檢驗(yàn)記錄：包含樣本信息（采集時(shí)間、狀態(tài)）、儀器參數(shù)（校準(zhǔn)時(shí)間、試劑批號(hào)）、檢測(cè)結(jié)果（原始數(shù)據(jù)、審核人）、質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)（質(zhì)控圖、失控處理），電子記錄需雙備份（本地+云端）。2.保存期限：常規(guī)檢驗(yàn)記錄保存5年，傳染病相關(guān)記錄保存15年，按《醫(yī)療機(jī)構(gòu)病歷管理規(guī)定》執(zhí)行。（二）SOP修訂與培訓(xùn)1.修訂周期：每年評(píng)審SOP，根據(jù)新國(guó)標(biāo)（如GB/T____）、儀器說(shuō)明書(shū)更新內(nèi)容，修訂后由科室負(fù)責(zé)人審核、簽字生效。2.培訓(xùn)考核：新員工/新S