2025年大學(xué)分子生物學(xué)（DNA提?。┢谀y試卷

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______一、單項選擇題（總共10題，每題3分，每題只有一個正確答案，請將正確答案填寫在括號內(nèi)）1.在DNA提取過程中，下列哪種試劑常用于破壞細(xì)胞膜？（）A.蛋白酶KB.氯仿C.SDSD.乙醇2.以下關(guān)于DNA純度的檢測方法，正確的是（）。A.紫外分光光度法檢測A260/A280比值B.凝膠電泳檢測條帶亮度C.雙縮脲法檢測蛋白質(zhì)含量D.考馬斯亮藍(lán)法檢測核酸濃度3.提取植物DNA時，常用的去除多糖的方法是（）。A.離心B.乙醇沉淀C.透析D.加入CTAB4.在DNA提取過程中，加入RNase的目的是（）。A.去除蛋白質(zhì)B.降解RNAC.沉淀DNAD.抑制DNase活性5.以下哪種細(xì)胞類型提取DNA時需要特別注意去除線粒體DNA的干擾？（）A.植物細(xì)胞B.動物細(xì)胞C.細(xì)菌細(xì)胞D.真菌細(xì)胞6.DNA提取過程中，酚-氯仿抽提的作用是（）。A.沉淀蛋白質(zhì)B.去除雜質(zhì)C.使DNA變性D.分離DNA和RNA7.檢測DNA濃度時，常用的波長是（）。A.230nmB.260nmC.280nmD.340nm8.提取動物組織DNA時，常用的裂解液成分不包括（）。A.Tris-HClB.EDTAC.SDSD.NaCl9.在DNA提取實驗中，用于沉淀DNA的常用試劑是（）。A.異丙醇B.乙醇C.丙酮D.甲醇10.以下關(guān)于DNA提取的操作步驟，正確的順序是（）。①細(xì)胞裂解②沉淀DNA③去除雜質(zhì)④溶解DNAA.①②③④B.①③②④C.①④③②D.①③④②二、多項選擇題（總共5題，每題5分，每題有兩個或兩個以上正確答案，請將正確答案填寫在括號內(nèi)，多選、少選或錯選均不得分）1.下列哪些試劑可用于DNA提取過程中的蛋白質(zhì)去除？（）A.蛋白酶KB.氯仿C.乙醇D.酚2.提取高質(zhì)量DNA時，需要注意的因素有（）。A.樣本的新鮮度B.操作過程中的溫度控制C.試劑的純度D.離心的轉(zhuǎn)速和時間3.以下哪些方法可用于檢測DNA的完整性？（）A.瓊脂糖凝膠電泳B.脈沖場凝膠電泳C.高效液相色譜D.毛細(xì)管電泳4.在DNA提取過程中，可能會導(dǎo)致DNA降解的因素有（）。A.操作時間過長B.溫度過高C.DNase污染D.試劑不純5.提取植物DNA時，常用的方法有（）。A.CTAB法B.SDS法C.堿裂解法D.酚-氯仿抽提法三、判斷題（總共10題，每題2分，請判斷下列說法的正誤，正確的打“√”，錯誤的打“×”）1.DNA提取過程中，蛋白酶K的作用是降解RNA。（）2.紫外分光光度法檢測A260/A280比值大于1.8時，說明DNA純度較高。（）3.提取動物DNA時，可直接用蒸餾水裂解細(xì)胞。（）4.乙醇沉淀DNA時，溫度越低，沉淀效果越好。（）5.在DNA提取實驗中，氯仿的作用是使蛋白質(zhì)變性沉淀。（）6.提取植物DNA時，加入CTAB的目的是去除多糖。（）7.DNA提取過程中，離心的主要目的是沉淀DNA。（）8.檢測DNA濃度時，A260/A230比值應(yīng)大于2.0。（）9.提取細(xì)菌DNA時，需要先去除細(xì)胞壁。（）10.DNA提取后，可直接用于PCR反應(yīng)，無需進(jìn)一步純化。（）四、簡答題（總共3題，每題10分，請簡要回答下列問題）1.簡述DNA提取的基本原理。2.請列舉至少三種在DNA提取過程中可能遇到的問題及解決方法。3.比較CTAB法和SDS法提取植物DNA的優(yōu)缺點。五、實驗設(shè)計題（總共1題，每題20分，請設(shè)計一個DNA提取的實驗方案）請設(shè)計一個從動物肝臟組織中提取DNA的實驗方案，包括實驗材料、試劑、主要操作步驟及注意事項。答案：一、單項選擇題1.C2.A3.C4.B5.B6.B7.B8.D9.B10.B二、多項選擇題1.ABD2.ABCD3.ABD4.ABCD5.ABD三、判斷題1.×2.√3.×4.×5.√6.×7.×8.√9.√10.×四、簡答題1.DNA提取的基本原理是利用細(xì)胞裂解液破壞細(xì)胞膜和核膜，釋放出DNA。然后通過蛋白酶K降解蛋白質(zhì)，酚-氯仿抽提去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，再利用乙醇沉淀DNA，最后將沉淀的DNA溶解于適當(dāng)?shù)木彌_液中。2.可能遇到的問題及解決方法：-DNA降解：控制操作時間和溫度，避免DNase污染，加入蛋白酶K充分降解蛋白質(zhì)。-雜質(zhì)去除不完全：增加酚-氯仿抽提次數(shù)，或采用其他純化方法。-DNA產(chǎn)量低：確保樣本質(zhì)量，優(yōu)化裂解條件，延長沉淀時間。3.CTAB法優(yōu)點：能有效去除多糖等雜質(zhì)，適用于多種植物材料；缺點：操作步驟相對繁瑣。SDS法優(yōu)點：操作簡單，提取效率較高；缺點：對多糖含量高的材料效果不佳，易產(chǎn)生雜質(zhì)。五、實驗設(shè)計題實驗材料：動物肝臟組織、液氮、細(xì)胞裂解液、蛋白酶K、酚、氯仿、異丙醇、70%乙醇、TE緩沖液等。試劑：細(xì)胞裂解液（含Tris-HCl、EDTA、SDS等）、蛋白酶K、酚、氯仿、異丙醇、70%乙醇、TE緩沖液。主要操作步驟：1.取新鮮動物肝臟組織，剪碎后置于液氮中研磨成粉末。2.加入適量細(xì)胞裂解液，混勻，置于55℃水浴中保溫1-2小時，期間不時混勻。3.加入蛋白酶K，繼續(xù)保溫1-2小時。4.酚-氯仿抽提：將裂解液轉(zhuǎn)移至離心管中，加入等體積酚，輕輕顛倒混勻，離心分層，取上清；再加入等體積氯仿，重復(fù)操作一次。5.異丙醇沉淀：取上清，加入0.6倍體積異丙醇，顛倒混勻，-20℃放置30