1、.動(dòng)物細(xì)胞工程測(cè)試問題1使用植物成體體細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)(c)必須使用液體徽章。b都需要孵化器c都必須在無(wú)菌狀態(tài)下進(jìn)行d能反映細(xì)胞的所有功能。分析：動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)主要是獲得細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，植物體細(xì)胞的體外培養(yǎng)反映了全能性。植物細(xì)胞是固體培養(yǎng)基。動(dòng)物體細(xì)胞培養(yǎng)需要二氧化碳培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)從動(dòng)物身體中取出相關(guān)組織，將其分散到單個(gè)細(xì)胞中，然后放入適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中，使這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液成分：葡萄糖、氨基酸、生長(zhǎng)促進(jìn)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液特征：液體培養(yǎng)基中含有動(dòng)物血清。4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必須符合以下條件(1)營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)豐富的微量元

2、素、無(wú)機(jī)鹽、碳水化合物、氨基酸、生長(zhǎng)因子、血清等。(2)適當(dāng)溫度：36.50.5；適當(dāng)?shù)膒h: 7.2至7.4。(3)無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境：培養(yǎng)液要無(wú)菌處理。在培養(yǎng)過程中，為了防止污染，一般在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。另外，要定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞本身的危害。(4)氣體環(huán)境：空氣95% 5%CO2。O2是細(xì)胞代謝必不可少的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH值。5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程：獲取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼小動(dòng)物的器官或組織)切割胰蛋白酶或膠原酶分散的單細(xì)胞處理制造細(xì)胞懸浮轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶，進(jìn)行原代培養(yǎng)帶瓶壁的細(xì)胞再利用胰蛋白酶或膠原酶處理，分散到個(gè)別細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行傳代培養(yǎng)。以下對(duì)2

3、細(xì)胞工程的敘述是錯(cuò)誤的(d)A.電刺激可以誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合B.酶處理去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞C.小鼠骨髓瘤細(xì)胞和抗原免疫的小鼠b淋巴細(xì)胞融合能制造單克隆抗體D.某些植物的甲和兩個(gè)品種的體細(xì)胞雜交和甲兩個(gè)品種的雜交后代的染色體數(shù)目相同分析：正確誘導(dǎo)a原生質(zhì)體融合的方法有物理法(離心振動(dòng)電刺激)化學(xué)法(聚乙二醇peg)生物法(滅活病毒)。b要正確去除植物細(xì)胞壁，需要纖維素酶和果膠酶，將動(dòng)物組織分散到單個(gè)細(xì)胞中，需要對(duì)胰蛋白酶或膠原酶進(jìn)行一定時(shí)間的處理。c正確的小鼠骨髓瘤細(xì)胞和抗原免疫的小鼠b淋巴細(xì)胞融合產(chǎn)生無(wú)限增殖和特定抗體。d錯(cuò)誤，甲植物細(xì)胞為2N，乙植物

4、體細(xì)胞為2M，甲體細(xì)胞為2N 2M假設(shè)異交染色體數(shù)目；a和b品種的雜交染色體數(shù)為N M。3用于制造單克隆抗體的細(xì)胞工程技術(shù)包括(a)細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞融合胚胎移植核移植A.b .c .d .分析：?jiǎn)慰寺】贵w的制備過程是人工誘導(dǎo)經(jīng)過免疫的b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，然后篩選并培養(yǎng)出產(chǎn)生特定抗體的異種雜交瘤細(xì)胞，然后獲得單克隆抗體。使用4細(xì)胞工程方法，以SARS病毒衣殼蛋白作為抗原，制造單克隆抗體。以下說明正確(d)A.用精制的核涂層蛋白質(zhì)反復(fù)注入鼠標(biāo)后產(chǎn)生的血清抗體是單克隆抗體B.體外培養(yǎng)單個(gè)漿細(xì)胞，可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體C.混合等量的血漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，peg誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞都是

5、異種雜交瘤細(xì)胞D.使用此單克隆抗體和SARS病毒衣殼蛋白特異性結(jié)合，可以診斷病毒感染者分析：a錯(cuò)誤的b淋巴細(xì)胞只分泌一種特定抗體。從血清中分離出的抗體低產(chǎn)量、低純度、特異性低。b錯(cuò)誤的單克隆抗體由血漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞合成并分泌。c單克隆抗體的錯(cuò)誤制造過程篩選：篩選通過選擇培養(yǎng)基篩選未融合的b淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和BB融合、腫瘤融合細(xì)胞，篩選b腫瘤融合細(xì)胞。篩選是通過細(xì)胞培養(yǎng)將產(chǎn)生特定抗體的b種細(xì)胞檢測(cè)為相應(yīng)抗原的方法。從身體上提取免疫的b淋巴細(xì)胞時(shí)，會(huì)產(chǎn)生很多種不同的種類，形成各種異種雜交瘤細(xì)胞，因此必須篩選出產(chǎn)生特定抗體的異種雜交瘤細(xì)胞。5使用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體

6、在下一個(gè)實(shí)驗(yàn)階段是錯(cuò)誤的()A.將抗原注入鼠標(biāo)，確保能產(chǎn)生抗體的b淋巴細(xì)胞B.用纖維素酶處理b淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞C.使用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑，促進(jìn)可產(chǎn)生抗體的b淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞的融合D.篩選異種雜交瘤細(xì)胞，選擇能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體分析：動(dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁，因此不需要纖維素酶來去除細(xì)胞壁6一個(gè)研究小組在進(jìn)行藥物測(cè)試時(shí)，用動(dòng)物肝細(xì)胞作為材料，測(cè)定了藥物對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。可培養(yǎng)的細(xì)胞是甲，乙，甲細(xì)胞是肝臟腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞是正常肝細(xì)胞。請(qǐng)回答以下有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：(1)將數(shù)量一樣的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞放入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件相同。有一段時(shí)間，觀察到

7、甲細(xì)胞的數(shù)量比乙細(xì)胞的數(shù)量_ _ _ _ _ _多。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，通常在合成培養(yǎng)基中添加適量的血清，因?yàn)檠蹇梢匝a(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)_ _ _ _ _ _ _ _ _。細(xì)胞培養(yǎng)必須在含有5% CO2的恒溫培養(yǎng)基中進(jìn)行，這種CO2起到培養(yǎng)液pH _ _ _的作用。(3)在兩個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)過程中，如果b細(xì)胞復(fù)蓋瓶壁，_ _就會(huì)停止生長(zhǎng)_ _ _ _ _ _ _ _。藥物測(cè)試需要大量細(xì)胞，兩個(gè)細(xì)胞經(jīng)常轉(zhuǎn)移。甲細(xì)胞比乙細(xì)胞能傳遞_ _ _ _多_ _ _ _ _個(gè)或更多。用動(dòng)物的肝組織塊制造肝細(xì)胞懸浮液需要_胰蛋白酶_ _ _ _ _消化處理。(4)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，為了防止細(xì)菌污染，可以

8、向培養(yǎng)液中添加適當(dāng)?shù)腳 _抗生素(5)癌細(xì)胞的x過表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，a、b、a組的細(xì)胞培養(yǎng)液中_ _ Y _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _，7回答以下有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)的問題(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中。如果附著細(xì)胞分裂從細(xì)胞表面生長(zhǎng)到_ _相互接觸_ _ _ _ _ _ _，細(xì)胞就會(huì)停止分裂和增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的_ _接觸抑制_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _在瓶子壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是_ _單層_ _ _ _ _ _ _ _ _ _。貼在墻上的細(xì)胞需要酶處理，可用的酶是_ _ _ _胰蛋白酶_ _ _ _ _

9、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)隨著細(xì)胞轉(zhuǎn)移次數(shù)的增加，大部分細(xì)胞分裂中斷，_老化，甚至死亡_ _ _ _ _ _ _現(xiàn)象出現(xiàn)。但是，由于遺傳物質(zhì)的變化，能夠連續(xù)增殖的細(xì)胞極少，因此成為_ _不死_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _細(xì)胞(3)活性分子染料觀察細(xì)胞染色時(shí)死亡的細(xì)胞染色，活細(xì)胞不染色，因?yàn)開死細(xì)胞膜失去了選擇性可接受性，大分子染料可以進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)，因此被染色。(_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _)。(4)要確定哪些毒物可以改變細(xì)胞染色體的

10、數(shù)量，最好用顯微鏡觀察細(xì)胞分為_ _ _ _ _ _ _階段的細(xì)胞。(5)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在_ _低溫_ _ _ _ _ _條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵诖藯l件下，細(xì)胞_ _酶_ _ _ _ _ _的活性下降，細(xì)胞_新陳代謝_ _ _ _ _ _ _ _ _ _的速度下降。(6)將細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織移植到患者身上后發(fā)生排斥現(xiàn)象，因?yàn)檫@是用_ _抗原_ _ _ _ _ _ _攻擊移植的皮膚組織。8圖顯示了單克隆抗體制備過程的示意圖。(1)淋巴細(xì)胞可以與骨髓瘤細(xì)胞融合為一個(gè)細(xì)胞，兩個(gè)細(xì)胞膜也“融合”，細(xì)胞膜上有一定的流動(dòng)性在此過程中，經(jīng)常將_聚乙二醇_ _ _ _ _ _用作誘導(dǎo)劑，異種雜交細(xì)胞

11、的繁殖進(jìn)行有絲分裂。這種細(xì)胞的特征(遺傳性狀)是_ _ _廣泛增殖和產(chǎn)生特定抗體_ _ _。(2)篩選雜交細(xì)胞的方法是在_ _培養(yǎng)液中加入甲氨蝶呤，進(jìn)行增殖的細(xì)胞_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(3)雜交細(xì)胞的體外培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基有何不同？_液體培養(yǎng)基中含有葡萄糖和動(dòng)物血清_ _ _ _。(4)單克隆抗體注入身體后，自動(dòng)追蹤抗原(病原體或致癌細(xì)胞等)，在不攻擊任何正常細(xì)胞的情況下結(jié)合，稱為“生物導(dǎo)彈”，是利用_ _ _抗原和抗體之間結(jié)合的高度特異性_ _ _。(5)在細(xì)胞工程中，單克隆抗體的制造過程

12、包括_動(dòng)物細(xì)胞融合_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)9現(xiàn)有的甲和乙有兩種可能有毒的化學(xué)物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)室研究人員想培養(yǎng)動(dòng)物的細(xì)胞，看看它們是否有毒，比較兩種毒性的強(qiáng)弱。請(qǐng)作為一名研究生參與這項(xiàng)研究，填寫以下相關(guān)問題。(1)實(shí)驗(yàn)原理：_ _有毒物質(zhì)能誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生染色體變異_ _ _ _ _ _ _ _ _ _。這個(gè)變種細(xì)胞可以根據(jù)整個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞的百分比(以下q值)來判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。(2)材料器具：活的小鼠胚胎、胰蛋白酶液、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、動(dòng)物細(xì)胞固定液、適當(dāng)濃度的龍膽石溶液、適當(dāng)濃度的化學(xué)物質(zhì)a溶液、適當(dāng)濃度的化學(xué)物質(zhì)b溶液、蒸餾水、滴管、碟子、剪刀、錐

13、蟲病、溫度調(diào)節(jié)器、溫度調(diào)節(jié)器(3)實(shí)驗(yàn)階段：.細(xì)胞懸浮液的制備。將老鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中，切碎，放在錐形瓶里，添加胰蛋白酶溶液，將胚胎組織分離為單個(gè)細(xì)胞，然后放入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸浮體。.細(xì)胞培養(yǎng)。取a、b、C3的干凈培養(yǎng)瓶，_殺菌，使等量的細(xì)胞懸浮_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _；在兩個(gè)培養(yǎng)瓶中各放入等量的甲和乙溶液，在c瓶中放入等量的蒸餾水搖晃。將3個(gè)培養(yǎng)瓶放在37 的恒溫箱里培養(yǎng)。三.創(chuàng)建臨時(shí)鑲件。細(xì)胞增殖到8代左右時(shí)，從溫度調(diào)節(jié)器中同時(shí)取出3個(gè)培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶溶液處理，加入動(dòng)物細(xì)胞固定液，快速殺死細(xì)胞，固定細(xì)胞分裂相。靜置一段時(shí)間，在

14、培養(yǎng)瓶底部分別吸收細(xì)胞懸浮液后，將與培養(yǎng)瓶編號(hào)相同的幻燈片放在中央，用_龍膽類的適當(dāng)濃度染色_ _ _ _ _ _，3 5min，然后蓋上封面幻燈片。.顯微鏡檢查和統(tǒng)計(jì)。將臨時(shí)薄膜放在顯微鏡下，從低倍率鏡開始，用高倍率鏡找到_有絲分裂中的細(xì)胞，并與_C_(4)結(jié)果分析和結(jié)論： a、b、c三個(gè)培養(yǎng)瓶的q值為QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _實(shí)驗(yàn)中c培養(yǎng)瓶有_ _ _對(duì)照_ _ _ _ _ _ _作用，c瓶的q值說明_動(dòng)物細(xì)胞正常培養(yǎng)狀態(tài)下染色體的變異頻率很低。10以下兩幅圖分別是單克隆抗體制造過程和克隆綿羊培養(yǎng)過程的示意圖，

15、并回答了以下問題：(1)在圖甲和圖乙所示的過程中，必須使用的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)是_ _動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)圖甲中在小鼠體內(nèi)注入病原體后，處理_ _ _吞噬細(xì)胞_ _ _ _ _ _ _ _細(xì)胞后，免疫細(xì)胞才能識(shí)別。過程經(jīng)常由_ _ _ _滅火的病毒_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _來完成。過程與體外培養(yǎng)相比，_ _ _不需要特定培養(yǎng)基，嚴(yán)格的外部環(huán)境條件_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)單克隆抗體攻擊癌細(xì)胞，主要利用_特定_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(4)在圖解過程中，經(jīng)常選擇_ _ _ _ _ _ _ _ _ m 的_ _ _ _ _ _ _ _氣卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，原因是_ _ m期卵母細(xì)胞體積大，易于操作，核的全能如果不考慮環(huán)境影響，復(fù)制量的特性是否都等于白面量？_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _不是。原因是_卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)也能調(diào)節(jié)一定的性狀_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _