1、a，1，抗高血壓物質(zhì)檢查法DEPRESSOR SUBSTANCES，山東省藥物檢查所，a，2，內(nèi)容摘要，基本概念和原則2010年版增源內(nèi)容檢查法歐洲藥典抗高血壓物質(zhì)檢查法，a，3，基本概念和原則，檢查目的動物或微生物發(fā)酵萃取物和生產(chǎn)過程中可能混合這種物質(zhì)的原料，必須填寫抗生素、氨基酸、多肽等降壓物質(zhì)檢查項目。在動植物、微生物發(fā)酵提取物及生產(chǎn)過程中，應(yīng)在可能與組胺類或組胺混合的注射(靜脈)中制作抗高血壓藥物檢查項目?？股兀兴幾⑸?，氨基酸，多肽等。a，4，基本概念和原理，降壓藥檢驗法定義如下。根據(jù)組胺標(biāo)準(zhǔn)(s)和測試標(biāo)準(zhǔn)(t)對麻醉貓血壓下降的程度進行比較，判定檢測品中的抗高血壓藥是否滿足限度

2、。該法是通過觀察貓對組胺樣物質(zhì)的比較敏感的作用，通過靜脈注射特定劑量的捐贈者，對麻醉貓血壓的影響，判斷檢測品中包含的抗高血壓藥是否滿足限度。a，5，2010年版修訂增補，歷史進化1985年版從藥典開始，按照現(xiàn)行藥典(2005年版)方式，2005年版動物狗(5公斤以上)2010版修訂，a，6，2010版與2005版的差異，a，7，2010版，a，9，檢測法-材料，1血壓記錄裝置：生物功能實驗系統(tǒng)(多道生理記錄儀)，相應(yīng)的傳感器，血壓計(固定用)2動脈插管(細(xì)頸塑料管)，靜脈插管(10號或12號鈍針)，以及3 1毫升、2毫升、5毫升、10毫升注射器(4號半針)、玻璃容器：吸管、容量瓶等4種適當(dāng)準(zhǔn)確

3、度的平衡(以1萬分之一為準(zhǔn))、動物秤(秤)5試劑：試驗產(chǎn)品、組胺控制組檢驗法-對照組溶液配制，精密取磷酸組胺對照組適量，根據(jù)組胺溶出水，將每毫升1.0毫克的溶液裝入適當(dāng)?shù)娜萜?，維持活動經(jīng)驗證符合要求的情況下，可在3個月內(nèi)使用。 在制備對照組稀釋劑之前，對組胺調(diào)節(jié)溶液的量進行了精密測定，并以每毫升0.5ug的組胺溶液配制氯化鈉注射液。注：1對照組切割將玻璃屑用2折算0.362，1毫克磷酸組胺用滅菌水制造、儲存、使用時在室溫下去除，a，12，檢驗法-試驗用溶液，試驗用溶液，品種不同，按指定量適當(dāng)濃度的試驗用溶液配制。測試時，一般與試驗用溶液相比，稀釋劑的注射體積必須相同。注：試驗用溶液一般重量為0

4、.2ml/kg，應(yīng)等于注射用。例如，如果注射阿奇霉素，標(biāo)準(zhǔn)注射量為2000u/kg，則注射10000u/ml，0.2ml/kg，2000u/kg的檢查用和比較用可以調(diào)整為補充生理鹽水。a，13，檢驗法，健康資格，體重2公斤以上的貓，雌性不會懷孕。用適當(dāng)?shù)穆樽韯?如巴比妥)麻醉后，固定在保溫手術(shù)臺上，分離氣管，插入插管，使呼吸順暢，必要時可進行人工呼吸。在一側(cè)頸動脈插入連接壓力計的動脈導(dǎo)管，在管內(nèi)裝滿適當(dāng)?shù)目鼓海涗浹獕骸Ｆ渌线m的儀器也可以記錄血壓。為注射藥液，在一側(cè)大靜脈插入靜脈插管。實驗要注意保持動物的體溫。全部手術(shù)結(jié)束后，可以將托壓系統(tǒng)調(diào)整到與動物血壓相似的高度(通常為13.3 16.

5、0 kpa)，打開動脈夾，注射藥物，直到血壓穩(wěn)定。每個注射速度必須相同。每次注射后立即注射一定量的氯化鈉，相鄰兩次注射的間隔必須固定(3 5分鐘)，每次注射都要在之前反應(yīng)穩(wěn)定后進行。a，14，動物要求，健康資格，體重2公斤以上的貓，沒有女性懷孕。資料來源：市場上銷售的國內(nèi)貓一般3公斤以上，麻醉耐受，血壓穩(wěn)定未懷孕實驗中的保溫注意，a，15，檢查法-麻醉，一般麻醉劑和劑量戊巴比妥鈉：靜脈注射或腹腔注射30-40毫克/千克，一般30-40毫克/千克，a，16，檢查法-儀器連接，頸動脈-動脈插管-記錄表股靜脈-靜脈插管-給藥裝置，a，17，檢查法-動物性監(jiān)察官，在自己的靜脈中依次注射上對照組稀釋劑，

6、容量根據(jù)動物體重每公斤組胺注：0.5千克/ml的組胺濃度為0.1，0.2，0.3毫升/千克，a，18，檢查法-檢查用，每動物體重1千克的組胺0.1ug (ds)的劑量(dT)然后分別比較第一次和第三次、第二次和第四次劑量引起的反應(yīng)。DT引起的反應(yīng)值不大于ds引起的反應(yīng)值的一半。也就是說，試驗性降壓藥檢查被認(rèn)為符合規(guī)定。a，19，檢驗法-再檢驗，否則繼續(xù)按上述順序注入4組劑量，比較兩組中對dS，dT的最大反應(yīng)值。DT引起的反應(yīng)值不大于dS引起的反應(yīng)值，對試驗產(chǎn)品的降壓物質(zhì)檢查被認(rèn)為符合規(guī)定。DT引起的反應(yīng)值大于dS引起的反應(yīng)值。也就是說，試驗性降壓藥檢查被認(rèn)為不符合規(guī)定。否則要進行動物再測試。復(fù)

7、試結(jié)果表明，如果dT引起的反應(yīng)值大于dS引起的反應(yīng)值，即試驗性降壓藥檢查不符合規(guī)定。a，20，使用的動物可以通過敏感度檢查，按照規(guī)定繼續(xù)用于抗高血壓物質(zhì)檢查。a，21，初步記錄，組胺基準(zhǔn)溶液和稀釋劑準(zhǔn)備測試動物類型和性別，體重(許可證號)麻醉劑名稱，準(zhǔn)備和容量抗凝劑名稱和劑量記錄血壓儀名稱和模型動物基準(zhǔn)血壓，動物敏感度測量測試溶液和基準(zhǔn)稀釋劑注射體積測量和結(jié)果判斷完成地圖，a，22，組胺檢查根據(jù)處方、工序、用途和使用情況設(shè)置相應(yīng)的檢驗項目，然后進行適宜性研究。a、23、4。組胺檢測法是將特定濃度的試驗用產(chǎn)品和組胺調(diào)節(jié)劑依次注入分離的豚鼠回腸浴缸，分別觀察和比較收縮反應(yīng)寬度，判斷試驗用物質(zhì)是否符

8、合規(guī)定的方法之一。不合格的測試產(chǎn)品表明含有組胺和組胺物質(zhì)。臨床上可能會引起血壓下降或過敏反應(yīng)等嚴(yán)重的副作用。檢查方法見本附錄組胺檢查法，設(shè)置a，24，在確定界限之前，應(yīng)調(diào)查試驗品對抗組胺對照組引起的隔離豚鼠回腸收縮反應(yīng)的干擾(抑制或加強)，以獲取最大收縮干擾濃度。如果測試材料、生產(chǎn)工藝等可能影響測試結(jié)果的條件發(fā)生變化，則必須重新進行干涉測試。a，25、干涉測試按以下順序正確注射：組胺和基準(zhǔn)稀釋劑低容量、基準(zhǔn)稀釋劑低容量、測試和基準(zhǔn)稀釋劑高容量、基準(zhǔn)稀釋劑高容量、基準(zhǔn)稀釋劑高容量(dS T、dS、dSH T、dSH)、dS T和dSH引起的反應(yīng)值否則，該品種不適合設(shè)置組胺物質(zhì)檢查項目，建議設(shè)置抗

9、高血壓物質(zhì)檢查項目。a，26，限制除了特殊要求外，原則上與抗高血壓藥檢查限制一致，按臨床一次劑量的1/5 5倍和每公斤體重0.1g組胺劑量計算注射藥含組胺的檢查限制，其中K值為每公斤體重收到的組胺量測試劑量必須低于最大收縮干涉劑量?？拱﹦⑿难芗膊∷幍戎匕Y疾病要使用高限度。a，27，組胺檢測法，定義：組胺控制劑(s)和檢測劑(t)在豚鼠中收縮分離回腸的程度比較，判斷檢測產(chǎn)品中的組胺類限制是否符合規(guī)定。a，28，對照組溶液的制備，精密，磷酸組胺調(diào)節(jié)劑適量，用水溶解和定量稀釋劑每毫升制造1.0毫克溶液，將其分成適當(dāng)?shù)娜萜?，儲存? 8 ，并在3個月內(nèi)使用，確保收縮活性滿足要求。a，29，對照組稀

10、釋劑的制備，試驗當(dāng)天服用正確量的組胺調(diào)節(jié)溶液，用兩種濃度的稀釋劑(dSH，dS)注入氯化鈉，大劑量dSH不要將回腸收縮率達(dá)到極限，低劑量dS的反應(yīng)值可以重復(fù)為高用量的一半左右，調(diào)節(jié)量。一般組胺高低容量的最終濃度為10-6 10-8g/ml，注射體積0.2 1.0 ml為宜。a，30，試驗溶液配制，按品種抗量基準(zhǔn)稀釋液低容量(dS)以適當(dāng)濃度制備。測試時，一般測試用溶液和對比用稀釋劑的注射體積必須相同。a，31，回腸肌肉營養(yǎng)液準(zhǔn)備，a液體：試驗當(dāng)天氯化鈉160.0g，氯化鉀4.0g，氯化鈣(無水計算)2.0g，氯化鎂(無水計算)1.0g和磷酸氫鈉(包含12個結(jié)晶水)0.100b液體：硫酸阿托品，

11、碳酸氫鈉1.0g，葡萄糖(含一個結(jié)晶水)0.5g，加入適量注射液溶解，a溶液50.0ml，混合注入水1000ml。b液體使用前必須制造，并在24小時內(nèi)應(yīng)用。a，32，檢查法，取健康合格的成年豚鼠，雌雄均可，無懷孕，體重250-350g，24小時禁食，迅速處死，排出血液。立即解剖，取出回腸(選擇最敏感的遠(yuǎn)端腸)，注意不要因拉而損傷回腸，必要時小心地分離腸系膜。長度為2 3厘米，用注射器抽取上述溶液b，注意沖洗腸道部分的內(nèi)容物。將撐桿底部固定在分離機構(gòu)恒溫水箱裝置的浴缸底部，頂部用線連接到肌肉張力轉(zhuǎn)換器。在浴缸中預(yù)先放入一定量的b-液體(約10-30毫升)，通過95% O2和5% CO2的混合氣體

12、，保持恒溫(34-36c)，用適當(dāng)?shù)姆椒ㄓ涗浕啬c收縮曲線。使用杠桿時，長度應(yīng)能使章節(jié)段收縮約為20倍。根據(jù)靈敏度選擇要調(diào)整的1g預(yù)負(fù)荷。將會長放入浴缸后，要靜置15 30分鐘左右，才能注射藥液。每次注射藥液之前，用b溶液洗3次浴缸(最好不要排空浴缸，溢出)。相鄰兩種給藥的間隔必須固定(約2分鐘)，每次給藥前，前一種反應(yīng)穩(wěn)定后進行。如果dSH引起的反應(yīng)值大于dS引起的反應(yīng)值(例如dS、dT、dT、DS、dSH)，請使用您認(rèn)為測試結(jié)果有效的基準(zhǔn)稀釋劑和試驗溶液，并正確地注入浴缸。如果測試溶液發(fā)生回腸收縮，則分別計算dS，dT引起的反應(yīng)的平均值。如果DT反應(yīng)的平均值不大于dS反應(yīng)的平均值，則認(rèn)為測試對象組胺分類物質(zhì)檢查符合規(guī)定。如果DT反應(yīng)的平均值大于dS反應(yīng)的平均值，則被測試對象組胺類型檢查認(rèn)為不符合規(guī)定。如果試驗用產(chǎn)品沒有引起