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文檔簡介

1、毛細管區(qū)帶電泳,（capillary zone electrophoresis）,毛細管區(qū)帶電泳的定義,毛細管區(qū)帶電泳（capillary zone electrophoresis）： 也稱為毛細管區(qū)帶電泳自由溶液電泳，是毛細管電泳最基本，應(yīng)用最廣泛的一種分離模式。,毛細管區(qū)帶電泳的分離依據(jù)： 基于試樣組分質(zhì)荷比的差異。,毛細管區(qū)帶電泳的分離對象： 特別適合分離帶電化合物，包括無機陰離子、無機陽離子、有機酸、胺類化合物、氨基酸、蛋白質(zhì)等，不能分離中性化合物。,毛細管區(qū)帶電泳的分離原理,溶質(zhì)中具有不同質(zhì)荷比的帶電粒子在電滲流的作用下流出速度的差異，達到分離。 溶質(zhì)的流出順序：陽離子中性粒子陰離子

2、 質(zhì)荷比越大的粒子流出上網(wǎng)速度越快。,區(qū)帶電泳的操作條件,選擇緩沖溶液的類型,改變?nèi)芤旱碾x子強度,改變pH值,加入添加劑,緩沖溶液的選擇應(yīng)遵循的要求： （1）在所選的pH范圍內(nèi)有合適的緩沖容量。 （2）本底的響應(yīng)值低。 （3）自身的淌度要低，離子大而帶電小。 硼酸鹽、三羥甲基氨基甲烷等緩沖溶液，因緩沖容量大，背景干擾小，經(jīng)常被作為緩沖溶液使用。 緩沖溶液的pH決定了弱電離試樣的有效淌度，同時控制著電滲流的大小和方向，一般通過實驗來優(yōu)化最佳pH值。,緩沖溶液、離子強度、pH影響電滲流的大小和方向，決定區(qū)帶電泳的柱效、選擇性以及分離度和分離時間。,添加劑的種類及作用,1.中性鹽 加入高濃度的中性鹽，大量的陽離子爭奪毛細管壁的負電荷從而降低管壁對蛋白質(zhì)的吸附。,2.手性添加劑 手性冠醚、環(huán)糊精的加入可以實現(xiàn)對光學異構(gòu)體的手性拆分。,3.添加高分子非電解物質(zhì) 高分子添加劑的加入可以形成分子或者特殊的局部結(jié)構(gòu)，從而影響分離過程，如纖維素、聚乙烯醇、多糖等。,4.表面活性劑 表面活性劑具有增溶，吸附形成膠束的功能。低濃度的陽離子表面活性劑，能在毛細管壁形成單層或者雙層吸附，改變電滲流的大小甚至方向。必須說明的是，加入的表面活性劑的濃度必須小于其臨界膠束濃度。,毛細管區(qū)帶電泳的應(yīng)用,區(qū)帶電泳的應(yīng)用與發(fā)展, 新技術(shù)的應(yīng)用比如衍生化法使得區(qū)帶電泳能分離

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