1、第九章 種子健康測定,種子健康測定（seed health testing）的目的是測定種子樣品的健康狀況，并由此推測一批種子的健康狀況。通常種子健康狀況是以種子帶病和種子蟲害率表示。,第一節(jié) 種子健康測定的意義 第二節(jié) 種子病害測定 第三節(jié) 種子蟲害測定 第四節(jié) 種子健康測定的程序,第一節(jié) 種子健康測定的意義,1. 了解種子的健康狀況，確定種子的利用價值 2. 防止危害性病蟲的傳播 健康測定的內(nèi)容：病害，蟲害,第二節(jié)種子病害測定,常用的病害測定方法有 1)肉眼檢驗、 2)過篩檢驗、 3)洗滌檢驗、 4)濾紙培養(yǎng)檢驗、 5)瓊脂培養(yǎng)檢驗、 6)離體胚檢驗、 7)漏斗法檢驗,一、肉眼檢驗 借助肉

2、眼或低倍放大鏡進(jìn)行檢驗。 適用于有較大病原體或種子外表有明顯癥狀的病害。如小麥線蟲病蟲癭、腥黑穗病菌癭、小麥赤霉病、水稻稻瘟病、玉米粒腐病、甘薯黑斑病、馬鈴薯晚疫病等。 檢驗方法是從送驗樣品中分出一半種子作試樣，放在白紙或玻璃板上，檢出病原體或病粒，稱其重或計其粒數(shù)，按下列公式計算感染病害百分率。 病害感染率=病?；虿≡w的數(shù)量（g）/試驗樣品的重量（g）100%,二、過篩檢驗 適用于較大病原體，其形狀、大小與種子不同，可用篩子分離。如菌癭、病核、蟲癭及赤霉病粒等。 檢驗方法是從送驗樣品中分出一半種子作試樣，用規(guī)定孔徑的篩子過篩，不同作物種子所用篩孔不同取篩子按孔徑大小疊好（孔徑上層大，下層小

3、），將試樣倒人上層篩內(nèi)，篩理2min，最好用電動篩選器進(jìn)行。然后將各層篩上物倒入白瓷盆內(nèi)，攤成薄層用肉眼或1015倍擴(kuò)大鏡檢查。將底層的細(xì)小篩出物倒于黑底玻板上，用5060倍雙目擴(kuò)大鏡檢查，揀出病原體并稱重，計算病原體含量百分率。,三、洗滌檢驗（洗滌+顯微鏡檢測） 多用于種子表面帶病而肉眼看不見的種子病害，如麥類腥、黑穗病、稻粒黑粉病、稻干尖線蟲病、棉花、紅麻炭疽病等。 從送驗樣品中分取試樣兩份，每份3g，分別倒人小三角瓶內(nèi)，注入蒸餾水10ml，加以劇烈振蕩（用定時振蕩器），光滑種子振蕩10min，粗糙種子振蕩10min，將懸浮液倒入離心管內(nèi)，用每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心5min，吸去上清液，留

4、1ml懸浮液于管底，稍加振蕩，立即用清潔細(xì)玻棒將懸浮液分別滴在510片載玻皮上，蓋上蓋玻片，逐片用放大40500倍的顯微鏡檢查，每片檢查10個視野，記載病原體種類及每視野的孢子數(shù)，并計算每粒種子孢子負(fù)荷量。,四、濾紙培養(yǎng)檢驗 適用的病害有稻瘟病、稻胡麻葉斑病、麥類斑點病、雪腐病、鏞刀菌、小麥穎枯病、大豆莢枯病、各種作物炭疽病等?？筛鶕?jù)種子上的特有癥狀或種子上的分生孢子和菌絲體鑒別。 （）稻瘟病取試樣400粒，置于23層濕潤濾紙上，培養(yǎng)皿直徑9cm，每皿置25粒種子，在22晝夜光照12h條件下培養(yǎng)7天檢查。在1250倍放大鏡下檢查每粒種子上的分生孢子。稻瘟病則在穎殼土產(chǎn)生小形的不明顯的灰至綠色分

5、生孢子，著生在密集而纖細(xì)的分生孢子梗上，它通常很少覆蓋整粒種子。如有懷疑可用200倍顯微鏡檢查核實，典型的生分孢子為倒梨形、透明、基部具短齒、分二隔，常有尖銳的頂端。 （二）菜豆炭疽病取試樣400粒，預(yù)先用1有效氯的次氯酸鈉浸種10min，然后將每50粒種子置于3545cm的雙層濕濾紙上，再用一層濕濾紙覆蓋，紙巾縱向折疊二次，并用聚乙烯薄膜覆蓋，于20黑暗培養(yǎng)7天。檢查時剝?nèi)シN皮，觀察子葉邊緣清晰的黑色斑點，用25倍立體顯微鏡觀察，記錄有分生孢子盤的種子數(shù)，在分生孢子盤上長有具隔膜的黑色剛毛。,五、瓊脂培養(yǎng)檢驗 適用于潛伏在種子內(nèi)部的病原菌，如玉米干腐病、小麥斑點病、亞麻灰霉病、豌豆褐斑病等。

6、 （）豌豆褐斑病取試樣400粒，用次氯酸鈉消毒。在培養(yǎng)皿內(nèi)放人麥芽或馬鈴薯葡萄糖瓊脂，每皿置10粒種子，于20黑暗培養(yǎng)7天，用肉眼檢查種子外蓋滿的大量白色菌絲體。對有懷疑的菌落可用25倍擴(kuò)大鏡下觀察，根據(jù)菌落邊緣的波狀菌絲體確定。 （二）亞麻灰理病取試樣400粒。培養(yǎng)皿內(nèi)放人含有2瓊脂和1麥芽汁的麥芽瓊脂，每皿放10粒種子，于20黑暗培養(yǎng)7天。于第5天和第7天用肉眼觀察幼根，其上存在軟腐，并為大量灰色菌絲體覆蓋。如有懷疑可用200倍顯微鏡檢查，根據(jù)有分隔的帶狀菌絲和分生孢子梗的簇生分枝來確定。,六、漏斗法檢驗 此法專用于水稻干尖線蟲病。水稻干尖線蟲病只在葉尖上形成尾巴狀物，而不形成蟲癭，種子帶

7、病時不易看出，可用漏斗法檢查。 檢驗方法：將一漏斗夾在支架上，于漏斗上放一鋼絲網(wǎng)或紗布，漏斗下部裝有膠管及夾子。取一定量的水稻種子剪碎，放人銅絲網(wǎng)或紗布中然后加水于漏斗內(nèi)，使樣品浸于水中，冬季應(yīng)將漏斗及樣品置于28恒溫箱內(nèi)，經(jīng)24h后，用離心管裝在漏斗管下端，打開夾子，取出底部少量溶液（此處濃度最高，含線蟲最多），進(jìn)行離心，用顯微鏡檢查有無線蟲及其含量。,對不同的病害，用不同的方法： 1. 對較大的病原體 過篩 肉眼 2. 對種子外表有明顯癥狀的 肉眼 3. 表面帶菌但看不見的 洗滌 濾紙培養(yǎng) 4. 種子內(nèi)部的病原菌 瓊脂培養(yǎng) 5. 胚內(nèi)病菌 離體胚培養(yǎng),第三節(jié) 種子蟲害測定,常用的蟲害測定方

8、法有肉眼檢驗、過篩檢驗、剖粒檢驗、染色檢驗和比重檢驗。,一、肉眼檢驗 害蟲自由活動在種子堆中或種子受害蟲損傷后有明顯特征的適用。 從送驗樣品種分出一半種子作試樣，把種子倒在預(yù)先用酒精擦凈的瓷盤內(nèi)或玻璃桌上。冬季則須將種子放在1825加溫2030min，使害蟲恢復(fù)活動，進(jìn)行逐粒觀察，將害蟲及受害種子揀出，然后計算蟲害種子百分率及每千克種子中害蟲的頭數(shù)。,二、過篩檢驗 凡是成蟲或幼蟲散布在種子中間的害蟲適用。 三、剖粒檢驗 凡是隱藏在種子內(nèi)部的害蟲，如蠶豆象、豌豆象等適用。,四、染色檢驗 應(yīng)用染料或化學(xué)試劑處理種子，使被蟲害種子的孔口更明顯，易于鑒別。 （）高錳酸鉀染色法 檢查米象、谷蠹為害的孔口

9、。先將送驗樣品中的雜質(zhì)除去稱取試樣15g，倒入銅絲篩中，浸于30水中l(wèi)min，再移到1高錳酸鉀溶液中，浸4560s，立即取出用清水洗滌，馬上倒在白色吸水紙上，用擴(kuò)大鏡檢查，被害種子表面有直徑為0.5cm突起的黑色斑點。如再用過氧化氫和硫酸混合液（100ml的1硫酸加1ml 3過氧化氫）洗滌則黑色斑點更為明顯，結(jié)合剖粒檢驗查出害蟲頭數(shù)，并換算成每千克種子中的種子害蟲頭數(shù)。,（二）碘或碘化鉀染色法 凡豆象為害的種子適用。 從送驗樣品中取試樣50g，放于銅絲篩中或用紗布包好，浸于1碘化鉀或2碘酒中，經(jīng)11.5min取出移于盛有0.5氫氧化鈉的溶液中，浸30s立即檢查。豆粒表面有12mm直徑的黑色圓形斑點的，為豆象感染過的種子，結(jié)合剖粒檢驗，計算每千克種子的害蟲頭數(shù)。,五、比重檢驗 凡被米象、谷騷、豆象和麥蛾為害過的種子比重輕，可浮于一定濃度的液面上。 取試樣100g，倒人飽和食鹽溶液中（在20條件下，100ml水中溶人35g食鹽），充分?jǐn)嚢?015s，放置2min，將浮在上層的種子取出，結(jié)合剖粒檢驗，計算出每千克種子害蟲頭數(shù)。,對不同的蟲害： 1.對活動在種子堆內(nèi)的害蟲 肉眼 過篩 2.對蟲損傷后有明顯癥狀的 肉眼 3.對蟲損傷后癥狀不明顯的 染色 4.對種子內(nèi)的害蟲 比重，剖粒，X射線,第四節(jié) 種子健康測定的程序（病害）,一、未經(jīng)培養(yǎng)的種子樣檢驗 1.