1、,自身免疫病 及其自身抗體的檢測,一.概述,自身免疫是指機(jī)體免疫系統(tǒng)對自身物質(zhì)產(chǎn)生抗體或免疫效應(yīng)細(xì)胞而引起的免疫應(yīng)答. 自身抗體是能與機(jī)體正常組織成分或改變了的組織成分起反應(yīng)的抗體.,正常人血清中可有多種微量的自身抗體或致敏淋巴細(xì)胞.它能清除體內(nèi)衰老細(xì)胞而起到免疫穩(wěn)定的效應(yīng).,只有在自身免疫反應(yīng)超出生理限度或持續(xù)過久,損傷了自身組織器官并引起病變或臨床癥狀時,才能導(dǎo)致自身免疫病(Autoimmune disease,AID)的發(fā)生.,二.自身免疫病的分類,器官特異性:病變局限于某一器官或組織,可以檢出對該器官組織成分特異性自身抗體. 非器官特異性:指侵犯多種器官或系統(tǒng)的一組疾病.可檢出對多種器

2、官或組織成分的自身抗體.如SLE,RA.,表1 常見自身免疫病分類,類別 病 名 自 身 抗 原 _ 器官特異性 慢性甲狀腺炎 甲狀腺球蛋白,微粒體 甲亢 甲狀腺細(xì)胞表面TSH受體 阿狄森氏病 腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 青少年型胰島素依賴性糖尿病 胰島細(xì)胞 萎縮性胃炎 胃壁細(xì)胞 潰瘍性結(jié)腸炎 結(jié)腸上皮細(xì)胞 原發(fā)性膽汁性肝硬化 膽小管細(xì)胞,線粒體 (抗線粒體抗體) 重癥肌無力 乙酰膽堿受體,自身免疫性溶血性貧血 RBC 特發(fā)性血小板減少性紫癜 血小板 非器官特異性 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA) 變性IgG,RANA 干躁綜合征(SS) SSA,SSB,唾液腺管 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE) 胞核成分 (DNA,DN

3、P,RNP,SM) 抗Sm抗體是酸性糖蛋白，是SLE的標(biāo)記抗體。 胞漿成分(線粒體,微粒體) RBC,血小板 混合結(jié)締組織病(MCTD) 細(xì)胞核(RNP) 抗n RNP抗體 _,三.自身免疫病的發(fā)病機(jī)制,自身成分具有抗原性,自身免疫耐受性的破壞,發(fā)生持久和過度的自身免疫 應(yīng)答,導(dǎo)致自身免疫的病理過程而致病.,(一) 自身抗原的形成,1.自身組織抗原性質(zhì)的改變 理化和生物因素通過多種方式改變自身組織的抗原性質(zhì),導(dǎo)致自身免疫. 2.隱蔽抗原的釋放 某些自身抗原與免疫系統(tǒng)隔離,或在胚胎期尚未出現(xiàn),所以不能建立起免疫耐受.當(dāng)出生后,由于外傷,感染等原因,使隱蔽抗原釋放入血,就可能產(chǎn)生自身免疫應(yīng)答. 3

4、.異嗜性抗原引起的交叉免疫反應(yīng),(二) 免疫系統(tǒng)發(fā)育或調(diào)節(jié)功能異常,AID與免疫缺陷病常合并發(fā)生. 1.胸腺發(fā)育和功能異常 2.機(jī)體免疫調(diào)節(jié)機(jī)制紊亂 (1).T細(xì)胞旁路的激活 (2).Ts細(xì)胞功能低下 (3).免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的異常 (4).多克隆B細(xì)胞激活,(三) 病毒感染,(四) 遺傳因素的作用,四.風(fēng)濕病與自身免疫病,風(fēng)濕病學(xué)是一門以內(nèi)科學(xué)和臨床免疫學(xué)為基礎(chǔ)的新興學(xué)科. 風(fēng)濕性疾病(Rheumatic Diseases)包括所有不同原因以及不明原因引起的骨,關(guān)節(jié),肌病. 狹義:主要指自身免疫性結(jié)締組織病. 如: RA; SLE; SS; PSS; DM/PM; MCTD,廣義:涉及所有骨,關(guān)

5、節(jié),肌肉疼痛和炎癥的疾病.,如:感染性: 萊姆氏病(Lymes Disease) 代謝性: 痛風(fēng) 內(nèi)分泌性:甲旁亢 遺傳性:粘液多糖病 退化性:骨關(guān)節(jié)炎 生態(tài)環(huán)境性:大骨節(jié)病,WHO公布的10種主要的風(fēng)濕病是:,1. RA 6.脊椎關(guān)節(jié)病 2. SLE 7.下背部痛 3. PSS 8.骨關(guān)節(jié)炎 4. SS 9.軟組織風(fēng)濕 病(DM/PM) 5. 萊姆氏病 10.痛風(fēng),五.自身免疫病的實(shí)驗(yàn)診斷,(一) 類風(fēng)濕因子(RF) RF是一種抗變性的IgG的自身抗體,有 IgG,IgA,IgM,IgE型. IgM-RF是RF的主要類型. RF主要見于RA.還見于多種疾病及部分正常人. RF對RA不是特異的

6、.RF陽性不能作為診斷RA的唯一標(biāo)準(zhǔn). RF陰性不能排除RA的診斷. 檢測方法:乳膠凝集試驗(yàn);ELISA;速率散射比濁法等.,(二) 抗核抗體(ANA),概論: 在自身免疫性疾病中,細(xì)胞核常成為自身免疫反應(yīng)的靶子. 包括: 細(xì)胞核的核膜 核內(nèi)的染色質(zhì) 非組蛋白 核糖核蛋白粒子 ANA分類: ANA是一組抗體,包括近30種成分.目前臨床開展的大約有10種左右.,表2. 抗核抗體分類 _ 分類 抗 核 抗 體 _ 1.抗核膜抗體 1)抗核孔復(fù)合物抗體 2)抗層素(Lamin)抗體 2.抗染色質(zhì)(包括 1)抗雙鏈DNA抗體 2)抗單鏈DNA抗體 3)抗組蛋白抗體 結(jié)合在染色質(zhì)上 4)抗高遷移率非組蛋

7、白抗體 5)抗著絲 點(diǎn)抗體 6)抗Ku抗體 的非組蛋白)抗體 7)抗Scl-70抗體 8)抗RNA聚合酶-1抗體 9)抗NOR-90K抗體 3.抗核糖核蛋白 1)抗SM抗體 2)抗U1RNP抗體 3)抗U3RNP抗體 粒子(包括部分胞 4)抗SSA/Ro抗體 5)抗SSB/La抗體 6)抗核糖體抗體 漿核糖核蛋白粒 7)抗Jo-1抗體 8)抗PL-7抗體 9)抗PL-12抗體 子)抗體 10)抗OJ抗體 11)抗EJ抗體 12)抗U2RNP抗體 13)抗Th/To抗體 14)抗SRP抗體 4.抗其它核成分抗體 1)抗PM-Scl抗體 2)抗PCNA抗體 3)抗Mi-2抗體 _,臨床常用ANA及

8、意義,1.抗層素抗體(抗Lamin抗體) 層素是一組與核膜內(nèi)層構(gòu)成核層的蛋白質(zhì),在核分裂時能使核膜溶解.主要 見于同時存在三種臨床表現(xiàn)的自身免疫病,即 1)肝炎2)白細(xì)胞減少,抗磷脂抗體 陽性3)皮膚白細(xì)胞裂解性血管炎或腦血管炎.此外也見于少數(shù)SLE患者. 檢測方法:IF;表現(xiàn)為核膜染色.,2.抗dsDNA抗體,一般僅見于SLE,主要反應(yīng)疾病的活動程度.SLE陽性率40%左右,是SLE的 血清標(biāo)記抗體. 檢測方法:IF;ELISA;放免;金標(biāo)法等.,3.抗ssDNA抗體,可存在于多種AID中.SLE;MCTD;SS;RA;PSS;DM/PM;藥物性狼瘡等疾病.缺乏特異性. 檢測方法:ELISA

9、;血凝等.,4.抗組蛋白抗體,主要的組蛋白有H1;H2A;H2B;H3和H4. 主要見于藥物性狼瘡,陽性率95%以上.也可見于SLE(70%),幼年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(30%)等. 檢測方法:ELISA;IF;血凝法等.,5.抗著絲點(diǎn)抗體,著絲點(diǎn)是紡錘絲在染色體上的附著點(diǎn).一般采用HEp-2細(xì)胞作底物.主要見于硬皮病的CREST綜合征(鈣質(zhì)沉著,雷諾氏現(xiàn)象,食管運(yùn)動障礙,指(趾)硬皮病和毛細(xì)血管擴(kuò)張). 檢測方法:IF,6.抗Scl-70抗體,Scl-70抗原實(shí)際上是DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶1.主要見于硬皮病.是其血清標(biāo)記抗體. 檢測方法:雙相免疫擴(kuò)散;對流免疫電泳;免疫印跡;ELISA等.,抗核糖核蛋白

10、粒子抗體,細(xì)胞內(nèi)含有各種不同的核糖核酸(RNA)分子,包括:核糖體RNA(rRNA),轉(zhuǎn)運(yùn)RNA(tRNA),信使RNA(mRNA),mRNA的前體,不均一的細(xì)胞核RNA(hnRNA),以及各種小分子RNA. RNA與各自專一的蛋白質(zhì)組成核糖核蛋白粒子(Particlse). 小分子核糖核蛋白粒子又分為小分子細(xì)胞核核糖核蛋白(SnRNP),小分子細(xì)胞漿核糖核蛋白(ScRNP).,7.抗Sm抗體,作用的抗原是U族小分子細(xì)胞核核糖核蛋白粒子(USnRNP),分子量大小從11kd-29kd不等,是SLE的血清標(biāo)記抗體. 檢測方法:同前.,8.抗RNP(U1RNP)抗體,抗原為U1SnRNP.主要見于

11、MCTD,也可見于SLE,PSS,RA,SS等多種AID.,9.抗SSA/Ro抗體,抗原是ScRNP.主要見于SS.也可見于其它AID,包括SLE,RA,PSS.在一些正常 人,病毒感染特別是EBV感染也可陽性. IgG類抗SSA抗體通過胎盤進(jìn)入胎兒后,可引起新生兒狼瘡綜合征,患兒出現(xiàn) 典型的SLE皮損. 抗SSA抗體與胎兒心臟的傳導(dǎo)系統(tǒng)結(jié)合,可造成先天性心臟傳導(dǎo)阻滯.,10.抗SSB/La抗體,抗原屬SnRNP.常與抗SSA抗體同時存在。主要見于SS,是SS的血清標(biāo)記抗體.也可見于其它AID.,11.抗核糖體或抗rRNP抗體,核糖體RNP抗原是由38kd,16kd和15kd 磷酸化蛋白組成.

12、主要見于SLE,陽性率 10%左右,是SLE的又一血清標(biāo)記抗體. 檢測方法:免疫印跡,IF,ELISA,雙擴(kuò)散,12.抗Jo-1抗體,抗原為組氨酰-tRNA合成酶,酶蛋白分子量為55kd.是PM/DM的血清標(biāo)記抗體.抗Jo-1抗體在PM中陽性率25%. 檢測方法:同前,13.抗PM/Scl抗體,又稱PM-1抗體.抗原位于核仁和胞漿,是分子量從20kd至110kd的11種蛋白質(zhì)的復(fù)合物. 主要見于具有PM和PSS特征的重疊綜合征患者(8%).,ANA的檢測方法,1.LE細(xì)胞檢查:敏感性特異性較差,目前已逐漸淘汰. 2.IF: 這是目前檢測ANA的最常見方法,也是經(jīng)典的方法.一般是以鼠肝組織 切片

13、作為反應(yīng)基質(zhì).目前國內(nèi)也已用培養(yǎng)的HEp-2細(xì)胞(人喉癌上皮細(xì)胞)作為底物.,核染色模型:,1) 周邊型 主要由抗dsDNA的抗體所引起. 主要見于SLE. 核膜型與此型相似,是由抗核膜抗體所引起. 2) 均質(zhì)型 是由抗DNP抗體所引起.主要見于SLE,藥物性狼瘡. 3) 顆粒型或斑點(diǎn)型 是由抗ENA抗體所引起.主要見于SLE,MCTD,PSS,SS等. 4) 核仁型 主要見于硬皮病. 核糖體型 主要見于SLE. 5) 著絲點(diǎn)型 主要見于硬皮病及CREST綜合征.,3.ID或CIE 主要用于檢測抗ENA抗體.所用抗原:兔胸腺;小牛胸腺;人脾;豬脾;組織培養(yǎng)細(xì) 胞等提取物. 4.同位素(Farr

14、氏法)檢測 主要用于檢測抗dsDNA抗體. 5.ELISA:可用于抗dsDNA;抗ssDNA;抗組蛋白抗體;及抗Sm;抗RNP;抗SSA;抗SSB等. 6.免疫印跡技術(shù) 主要用于ENA抗體的檢測.一般可檢測7種以上的抗體.,抗核抗體譜,ANA在不同的疾病中呈現(xiàn)不同的組合.不同的疾病有自己的ANA譜.有的抗 體僅見于某一疾病;有的抗體可見于多種疾病,但陽性率有顯著差別.ANA的這一 特征,有助于AID的診斷和鑒別診斷.,表3.系統(tǒng)性紅斑狼瘡的自身抗體,_ 抗體反應(yīng)性 陽性率(%) 抗 原 性 質(zhì) _ 雙鏈DNA 40 雙鏈DNA 變性DNA 70 單鏈DNA 組蛋白 70 所有組蛋白亞基:H1,

15、H2A,H2B,H3和H4 Sm 30 B/B D,E,F和G蛋白,與snRNAs,U1,U2, U4-U6和U5形成復(fù)合物 核RNP(U1RNP) 32 蛋白A,C,和70kD蛋白,與snRNAU1形成 復(fù)合物 SS-A/Ro 35 60kD和52kD蛋白與RNAs,Y1,Y3,Y4和Y5 形成復(fù)合物 SS-B/La 15 48kD磷酸化蛋白,與RNA聚合酶III轉(zhuǎn)錄 產(chǎn)物形成復(fù)合物,Ku 10 70kD和80kD的蛋白二聚體,直接與DNA結(jié) 合 核糖體(r)RNP 10 與核糖體大亞基相關(guān)的38kD,16kD和15kD (P蛋白) 磷酸化蛋白 Ki/SL 6 32kD蛋白,功能不明 PCN

16、A 3 36kD蛋白,是DNA聚合酶的輔助蛋白 _,表4.幾種自身免疫病中的抗核抗體譜,_ 疾病 抗體所作用的抗原 陽性率(%) _ 1.SLE 見上表 2.藥物性狼瘡 單鏈DNA 80 組蛋白(H2A-H2B) 95 3.MCTD 單鏈DNA 10-20 U1RNP 95 4.SS SS-A/Ro 60 SS-B/La 40 單鏈DNA 10-20 5.PSS Scl-70 43-70(彌漫型) 著絲點(diǎn) 80(CREST) U3核仁RNP 8 RNA聚合酶-1 4 NOR-90 少見 Th/To 少見 層素 少見 單鏈DNA 10-20,6.PM/DM Jo-1(組氨酰tRNA合成酶) 25

17、(PM) PL-7(蘇氨酰tRNA合成酶) 4 PL-12(丙氨酰tRNA合成酶) 少見 OJ(異亮氨酰tRNA合成酶) 少見 EJ-2(甘氨酰tRNA合成酶) 少見 Mi-2 8(PM) 15-20(DM) 信號識別粒子(SRP) 4(DM) PM-Scl 8 Ku 5 單鏈DNA 10-20 7.幼年型類風(fēng) 組蛋白 30 濕性關(guān)節(jié)炎 高遷移率非組蛋白 30 ( HMG1/HMG2) _,(三) 其它自身抗體,1.抗線粒體抗體(Antimitochondrial Antibodies,AMA) 主要針對線粒體抗原. 主要見于原發(fā)性膽汁性肝硬化病人,陽性率74-94%.偶見于其它肝病和硬皮病患

18、者. 檢測方法:IF,采用鼠腎/胃冰凍切片. ELISA,2.抗平滑肌抗體(Antismooth Muscle Antibodies,ASMA),ASMA的出現(xiàn)與肝細(xì)胞損害有關(guān).主要見于急性肝炎;慢活肝及其它肝病. 檢測方法:IF,采用鼠胃冰凍切片.,3.抗胃壁細(xì)胞抗體(Antiparietal cell Antibodies,APCA),APCA是一種具有器官特異性而無種族特異性的自身抗體. 主要見于:惡性貧血;萎縮性胃炎等.某些甲狀腺疾病,糖尿病. 檢測方法:IF;采用鼠胃切片.,4.抗甲狀腺球蛋白抗體(Antithyroglobulin Antibodies,ATGA) 抗甲狀腺微粒體抗

19、體(Antithyroid microsomal Antibodies,ATMA),TG是一種水溶性糖蛋白,參與甲狀腺激素的儲存和合成. TM是一種甲狀腺過氧化物酶(TPO). 主要見于:慢性甲狀腺炎;原發(fā)性粘液性水腫;毒性甲狀性腫;甲低;甲狀腺腫瘤;糖尿病;部分正常人. 檢測方法:IF;ELISA;放免;血凝等.,5.抗橫紋肌抗體(antistriated muscle antibodies) 抗骨骼肌抗體(antiskeletal muscle antibodies),主要見于重癥肌無力(MG)和胸腺瘤病人,也可見于LE肌無力綜合征,小細(xì) 胞肺癌,用青霉胺治療的RA病人,患GVHD的骨髓移

20、植病人. 檢測方法:IF,采用大鼠骨骼肌冰凍切片.,6.抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibodies,ACA),ACA能夠干擾磷脂依賴性凝血過程,對抗凝作用的蛋白有抑制作用; 抑制內(nèi)皮細(xì)胞釋放前列腺素;通過多種免疫損傷機(jī)制破壞內(nèi)皮細(xì)胞與血小板。 ACA與多種疾病的發(fā)生有密切關(guān)系.,與ACA相關(guān)的疾病主要有:,1)血栓形成, 2)血小板減少癥; 3)習(xí)慣性流產(chǎn); 4)溶血性貧血; 5)肢端頑固性潰瘍 6)中風(fēng) 7)一過性腦缺血 8)心肌壞死 9)特發(fā)性血栓栓塞性肺靜脈高壓10)SLE及各種結(jié)締組織病 檢測方法:ELISA,7、抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體測定,原理取正常人外周血粒細(xì)

21、胞制備抗原片，加待檢血清和熒光標(biāo)記抗人IgG反應(yīng)，如血清中含有抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（Antineutrophil Cytoplasmic Antibodies，ANCA），就會和胞漿中的抗原反應(yīng)產(chǎn)生胞漿型或核周型熒光染色，據(jù)此可判斷ANCA的存在。 方法間接免疫熒光法。,適應(yīng)癥懷疑患有Wegener肉芽腫病或系統(tǒng)性血管炎的病人；特別是伴有腎病、呼吸疾病或其他類型血管炎引起多器官損害的病人。,臨床意義ANCA陽性，分為兩種熒光類型，一種是胞漿型，稱為CANCA，一種是核周型，稱為PANCA。CANCA陽性一般見于wegener肉芽腫病，特別是腎和受累的病人。CANCA是針對蛋白酶3的抗體。PAN

22、CA陽性見于系統(tǒng)性血管炎病人。PANCA是針對髓過氧化物酶（MPO）的抗體。在WG病人中，CANCA陽性率在活動期可達(dá)80，且有較高的抗體滴度。在緩解期抗體陽性率低，且滴度下降，或完全消失。,注意事項(xiàng)ANCA 陽性也可見于如Good Pastures綜合征和SLE病人。WG的診斷不能單純依賴ANCA的結(jié)果，還要結(jié)合其他治療表現(xiàn)，試驗(yàn)室檢查和組織病理學(xué)檢查才能確定。ANCA滴度不能完全反應(yīng)疾病的活動以及對治療的反應(yīng)。PANCA陽性不是特異性的抗MPO抗體，也可以是抗粒細(xì)胞胞漿中其他酶的抗體，如彈性蛋白酶，組織蛋白酶G等。,8、抗核周因子(APF),原理及方法核周因子存在于頰粘膜上皮細(xì)胞核周胞漿內(nèi)

23、，為不溶性蛋白質(zhì)，是上皮細(xì)胞的中等纖維結(jié)合蛋白或其前體。APF主要為IgG，也有IgM及IgA。APF與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有明顯的相關(guān)性。采用人頰粘膜上皮細(xì)胞涂片，使用簡接免疫熒光法可測定APF抗體。,臨床意義,1、APF可出現(xiàn)在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎早期，甚至在發(fā)病之前。在早期RF陰性的RA病人中可有53.3%呈APF陽性。APF陽性RF陰性的RA病人往往預(yù)后較差。APF不僅有助于早期診斷，也有助于判斷預(yù)后。抗核周因子與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病情活動性指標(biāo)呈正相關(guān)。,2、抗核周因子與抗角蛋白抗體高度相關(guān)，可識別同一抗原，但與抗RA33/36抗體無關(guān)，同RF不重疊。抗核周因子結(jié)合其它三種抗體的檢測可使診斷敏感性提高

24、到92.7。,9、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎相關(guān)核抗原（RANA）抗體,RANA抗體是一種與EB病毒感染有關(guān)的酸性可溶性蛋白，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的陽性率和滴度明顯高于其它結(jié)締組織病、EB病毒有關(guān)的鼻咽癌、Burkit淋巴瘤以及EB病毒感染的正常人。提示RANA抗體與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病及病情進(jìn)展有關(guān)。,臨床意義：,1、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的RANA抗體陽性率為7094，平均血清滴度明顯高于正常人和其它結(jié)締組織病。RANA患者抗體與RF無相關(guān)性，其陽性率隨類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病程延長而增加。,2、血清RF陰性的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中，抗RANA抗體的陽性率仍達(dá)38.5。因此，抗RANA抗體對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷有一定意義。,10?？菇?/p>

25、蛋白抗體（AKA）,1979年Young等以大鼠食管中T1/3段的橫切面組織為底物，用間接免疫熒光法檢測RA患者血清時發(fā)現(xiàn)一種與大鼠食管角質(zhì)層成份起反應(yīng)的抗體，稱之為抗角蛋白抗體。,臨床意義：,1、角質(zhì)層陽性熒光圖型分為：角質(zhì)層型：是RA特異性熒光圖形，特異性達(dá)99，敏感性為23。、彌漫型。、棘細(xì)胞層型：對RA診斷無特異性。,2、AKA角質(zhì)層型陽性與RF、抗RA33/RA36抗體無關(guān)。因此，該抗體的檢測可對RF陰性或抗RA33/RA36抗體陰性的RA患者提供診斷指標(biāo)?？菇堑鞍卓贵w與疾病嚴(yán)重程度和活動性相關(guān)，在RA早期甚到臨床表現(xiàn)之前即可出現(xiàn)。因此，對RA早期診斷和預(yù)后判斷很有意義。,11?？筍

26、a抗體,Sa抗原存在于正常人體組織中?？筍a抗體是RA較特異的自身抗體。RF陽性和陰性的RA患者抗Sa抗體均可為陽性。因此，作為一種新的特異性抗體，抗Sa抗體可作為RF的補(bǔ)充，對RF陰性RA患者的診斷有一定價值。,臨床意義：,1、抗Sa抗體在RA中陽性率為35、SS為3.0%、SLE為4.3%，其它風(fēng)濕病極少見。該抗體對RA診斷的特異性為98.7%。,2、抗Sa抗體在RA的頭幾個月即可測出，且抗體滴度隨疾病活動度和治療而波動，提示Sa抗體測定在早期診斷、指導(dǎo)治療中的作用。,3、抗Sa抗體陽性或陰性與RA患者的年齡、病程關(guān)系并不顯著，但抗Sa抗體陽性者晨僵、關(guān)節(jié)受累明顯重于陰性者。而且，抗Sa抗

27、體陽性者的血沉增高，X線、期發(fā)生率亦明顯高于抗Sa抗體陰性者。由此提示，抗Sa抗體陽性者病程發(fā)展可能較抗SA抗體陰性者快，炎癥亦較重，可采取更為積極的治療。,12。抗RA33/36抗體,RA33抗體是Hassfeld等在1989年從Hela細(xì)胞核提取的一種抗核抗體。其靶抗原為3436kd的nRNP?？筊A33抗體可見于早期類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者。,臨床意義：,1、抗RA36抗體僅在RA患者中出現(xiàn)。一般認(rèn)為RA36抗體對RA的診斷有較高參考意義。,2、抗RA33抗體可與抗RNP抗體具有交叉性。特異性不強(qiáng)，但抗RA33抗體幾乎總與抗RA36抗體同時出現(xiàn)，單獨(dú)出現(xiàn)機(jī)會極少。兩者同時出現(xiàn)對RA診斷有更高的特

28、異性。另外RF在RA早期往往陰性，而抗RA33抗體在RA早期即可出現(xiàn)，且陽性率與確診RA患者陽性率相同，約3035，對RA早期診斷有一定意義。,其它有關(guān)檢查,一、紅細(xì)胞沉降率（ESR） （一）、原理與方法 血沉是血液加抗凝劑后置于特制血沉管中垂直豎立測定1小時的紅細(xì)胞下沉的距離數(shù)，如血漿內(nèi)存在的不對稱的分子，如纖維蛋白原、球蛋白、球蛋白及球蛋白等，它們可促進(jìn)紅細(xì)胞形成緡錢狀，從而加速紅細(xì)胞的沉降率。 常用方法為魏氏法，目前也有自動血沉測定儀,（二）、正常值,男性015mm1h 女性020mm1h （三）、臨床意義 血沉是測定各種風(fēng)濕病和炎癥性疾病的最簡便而又重要的檢測手段，血沉增快可見于急性風(fēng)

29、濕熱。急性感染、活動性結(jié)核病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、皮肌炎（DM）、嚴(yán)重貧血等。,血沉減慢見于低纖維蛋白血癥。真性紅細(xì)胞增多癥，鐮形紅細(xì)胞增多癥、過敏性疾病等。,定期反復(fù)檢查血沉，可有助于推測疾病的發(fā)展或逐步痊愈，對某些疾病的鑒別有一定幫助。如關(guān)節(jié)炎與骨關(guān)節(jié)病的鑒別。,二、抗鏈球菌溶血素“O”試驗(yàn)（ASO）,（一）、原理和方法 鏈球菌溶血素“O”是一種溶血毒素，具有抗原性，能溶解紅細(xì)胞。常用方法為溶血法，其指示細(xì)胞為兔或人的O型紅細(xì)胞。人體感染溶血性鏈球菌后能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，即ASO。此外，還有膠乳凝集試驗(yàn)、速率散射比濁法等。,（二）、臨床意義,ASO效價增高，表明

30、病人在近期 曾感染溶血性鏈球菌。常用以協(xié)助診斷風(fēng)濕熱。效價逐步增高，對活動性風(fēng)濕熱或腎炎的診斷具有較大意義。一般鏈球菌感染后一周ASO即可升高。35周達(dá)高峰，第2周開始下降，612月回復(fù)到感染前水平。少數(shù)非溶血性鏈球菌疾病，如病毒性肝炎、腎病綜合征，結(jié)締組織病、感染性心內(nèi)膜炎、多發(fā)性骨髓瘤、結(jié)核病等，ASO亦可升高。,三、C反應(yīng)蛋白（CRP）,（一）、原理和方法 CRP是一種急性時相蛋白，能與肺炎球菌C粘多糖發(fā)生沉淀反應(yīng)，故稱C反應(yīng)蛋白。常用方法為單相擴(kuò)散、乳膠凝集、速率散射比濁法等。,(二）、正常值,一般正常值8ug/ml。 8mg/L (三）、臨床意義 血中CRP升高常見于急性風(fēng)濕熱和活動

31、性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，以及其它關(guān)節(jié)炎 性疾病。此外，幾乎所有急性細(xì)菌性感染和肺結(jié)核 ，某些腫瘤及各種類型的組 織壞死，如急性心肌梗塞等均可見CRP升高。但病毒性感染一般CRP不升高，因此可作為病毒性感染和細(xì)菌性感染的鑒別指標(biāo)。,四、HLAB27檢測 （一）、原理與方法 HLAB27抗原為人類MHC類抗原B位點(diǎn)的表達(dá)產(chǎn)物?？煞譃閹追N亞型。HLAB27的檢測可用已知HLAB27抗血清，加被檢者淋巴細(xì)胞混合，然后加入補(bǔ)體，如果特異性抗血清與淋巴細(xì)胞膜相應(yīng)的HLA抗原結(jié)合，可在顯微鏡下識別。如有50以上的細(xì)胞著色，這種細(xì)胞被認(rèn)為具有相應(yīng)的HLAB27抗原，判為陽性。反之則為陰性，這是經(jīng)典的方法。目前也有應(yīng)用

32、分子生物學(xué)方法、單克隆抗體方法檢測HLAB27抗原，準(zhǔn)確、簡便。,（二）、臨床意義 HLAB27陽性者最多見于強(qiáng)直性脊柱炎（As），陽性率90。HLAB27陽性對As的早期診斷有幫助。另外也可見于銀屑病性關(guān)節(jié)炎、Reiter綜合征、腸病性關(guān)節(jié)炎、 幼年類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（JRA）及沙門菌感染后關(guān)節(jié)炎等。其它風(fēng)濕病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA），下背痛等HLAB27陽性率不高。,五、T淋巴細(xì)胞亞群測定 原理根據(jù)T細(xì)胞表面分化抗原(CD)不同，可將其分為若干亞群。T細(xì)胞各亞群的相互協(xié)調(diào)，穩(wěn)定地調(diào)節(jié)著機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng)。應(yīng)用抗CD抗原的單克隆抗體，如抗CD3、抗CD4、抗CD8等，對外周血單個核細(xì)胞進(jìn)行檢測，依

33、據(jù)各單抗的陽性率，判定各T細(xì)胞亞群，并算出CD4/CD8的比值。,方法 常用方法有免疫熒光法、免疫酶法、APAAP法、流式細(xì)胞儀法等。,正常值 CD3 60-80%; CD4 50-60%; CD8 20-30%。CD4/CD8 1.5-2.0。,臨床意義,在自身免疫病中，常表現(xiàn)CD8細(xì)胞的數(shù)量及功能低下，有時也有CD4增高，CD4+/CD8+比值升高。免疫缺陷病人CD4/CD8+比值減少，如AIDS病人，CD4顯著減少，常出現(xiàn)CD4/CD8比值倒置。,六、循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)檢測 (Circulating immuno complex，CIC),原理方法有許多，常用的為PEG沉淀法。PEG可引起蛋白沉淀，蛋白質(zhì)分子愈大沉淀所需PEG濃度愈小。C