1、第十章 巴比妥及苯并二氮雜卓類 鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析,一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì) 二、鑒別試驗 三、特殊雜質(zhì)檢查 四、含量測定,第一節(jié) 巴比妥類藥物的分析,一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)（The structure and properties）,（一）基本結(jié)構(gòu),環(huán)狀丙二酰脲類化合物,1. 環(huán)狀丙二酰脲(決定其共性) 2. 取代基部分(區(qū)別各種巴比妥類藥物),結(jié)構(gòu) 分兩部分,典型巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu),戊巴比妥,硫噴妥鈉,（二）主要性質(zhì),性狀白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，具有一定熔點。 溶解度微溶或極微溶于水，易溶于乙醇等有機溶劑，鈉鹽易溶于水，難溶于有機溶劑。,一 級 電 離,二級電離,烯醇互變,1. 弱酸性,結(jié)構(gòu)中

2、含有1，3-二酰亞胺基團，能使其分子發(fā)生酮 式-烯醇式互變異構(gòu)，在水溶液中發(fā)生二級電離。,本類藥物具有弱酸性（pKa值為7.38.4）,可與強堿反應生成水溶性的鈉鹽。,由弱酸與強堿形成的巴比妥鈉鹽，其水溶液呈堿性，加酸酸化后，則析出結(jié)晶性的游離巴比妥類藥物，可用有機溶劑將其提取出來。此性質(zhì)可用于本類藥物的分離、鑒別、檢查和含量測定。,主要是酰亞胺基團的性質(zhì)，與堿溶液共沸就可以水解生成氨氣，可使紅色石蕊試紙變藍。,2. 水解反應,(1)巴比妥類藥物的水解,(2) 鈉鹽的水解,水解的速度與溫度和pH值有關。室溫和pH10以下時水解較慢，pH11以上隨著堿度的增加水解速度也隨之加快。,巴比妥類鈉鹽注

3、射液不能預先配制進行加熱滅菌，須制成粉針劑，臨用時溶解。,PH值對苯巴比妥鈉分解率的影響,3.與重金屬離子的反應（丙二酰脲或酰亞胺）,可溶性一銀鹽,二銀鹽白色沉淀,(1)與Ag+的反應,水,吡啶,離子化,有色配位化合物,+,(2)與Cu2+的反應,孤對電子生成配位體,巴比妥類 銅吡啶,顯色,Co(Ac)2 、Co(NO3)2、CoO,異丙胺,無水甲醇或乙醇,(3)與Co2+的反應,(4)與Hg2+的反應,白色,汞鹽：Hg（NO3）或HgCl2,加乙醇，其反應產(chǎn)物先變紫色后變藍色,棕紅色,4. 與香草醛的反應,戊巴比妥,主要特點：溶液的pH值和取代基會對紫外光譜產(chǎn)生影響。,5. UV特征,一 級

4、 電 離,二級電離,烯醇互變,A. H2SO4溶液 （0.05mol/L） B. pH9.9緩沖液 C. NaOH溶液 （0.1mol/L）,240nm,255nm,240nm,240nm,255nm,硫代巴比妥的紫外吸收光譜A.HCl液(0.1mol/L)B.NaOH液(0.1mol/L),（1）藥物本身的晶型 巴比妥：長方形； 苯巴比妥：花瓣狀。,藥物本身晶形,6. 顯微結(jié)晶,（2）反應產(chǎn)物的晶型 巴比妥+硫酸銅-吡啶試液 十字形紫色結(jié)晶 苯巴比妥+硫酸銅-吡啶試液 淺紫色、不規(guī) 則結(jié)晶 其他不能形成結(jié)晶,反應產(chǎn)物晶形,二、鑒別試驗（Identification）,（一） 丙二酰脲反應 （

5、二） 特征基團反應 （三） 特征熔點行為 （四） IR,1.銀鹽反應 2.銅鹽反應,（一） 丙二酰脲類反應,1.硫元素的反應,硫代巴比妥類與巴比妥類的區(qū)別,白色,黑色,（二）特征基團反應,I2,褪色,Br2,KMnO4,2.利用不飽和取代基的鑒別試驗,3.利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗,硝化反應,黃色,與硫酸-亞硝酸鈉的反應 苯巴比妥硫酸-亞硝酸鈉 橙黃色橙紅色 與甲醛-硫酸的反應 苯巴比妥+甲醛-硫酸 玫瑰紅色產(chǎn)物。,區(qū)分苯巴比妥與不含芳環(huán)取代的巴比妥類藥物。,巴比妥類藥物直接測定熔點 巴比妥類的鈉鹽酸 游離巴比妥類藥物 過濾 洗滌 干燥 測熔點,（三） 特征熔點行為,ChP中苯巴比妥鈉的鑒別：

6、取本品約0.5g 加水溶解 加過量稀HCl 白色結(jié)晶性 過濾 用水洗凈沉淀 干燥，mp應為174178。,105,（四）紅外分光光度法,四、特殊雜質(zhì)檢查,什么是特殊雜質(zhì)？,（Detection of specific impurities）,苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查,1.酸度（指示劑法）,中間體乙基化不完全時，與尿素縮合產(chǎn)生的雜質(zhì),苯基丙二酰脲,酸性較強,檢查方法 取本品0.20g，加水10ml，煮沸攪拌1min，放冷，濾過后，取濾液5ml，加甲基橙指示液1滴，不得顯紅色,2.中性或堿性物質(zhì)（提取重量法） 由中間體()形成的酰胺、酰脲或分解產(chǎn)物等雜質(zhì)，不溶于NaOH但溶于乙醚；而苯巴比妥具有酸性

7、，溶于NaOH ，故采用提取重量法測定其含量。,3.溶液的澄清度,控制苯巴比妥酸雜質(zhì)。 雜質(zhì)在乙醇中溶解度小于苯巴比妥。,取本品1.0g，加乙醇5ml，加熱回流3min，溶液 應澄清,4. 有關物質(zhì) HPLC法,四、含量測定（Assay）,銀量法 溴量法 巴比妥類藥物的含 酸堿滴定法 量測定方法 UV法 提取重量法 CE法 HPLC法、GC法,基于巴比妥類藥物在合適的堿性溶液中，可與銀離子定量成鹽，Ch.P用銀量法測定苯巴比妥、異戊巴比妥及其制劑的含量。 優(yōu)點：操作簡便，專屬性較強。 缺點：受溫度影響較大；近終點時生成二銀鹽速度較慢。,（一）銀量法 (Argentometry),反應摩爾比：1

8、:1 溶劑系統(tǒng)：甲醇3無水碳酸鈉 終點指示：電位法指示（Ag玻璃電極系統(tǒng)）,凡在5位取代基含有不飽和鍵的巴比妥類藥物，可采用溴量法測定其含量。,（定量過量）,Br2 + 2KI 2KBr + I2,（剩余）,I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6,（二）溴量法,司可巴比妥鈉,注意事項： （1）操作中要防止溴和碘的逸失。 （2）需要做空白試驗。,（三）酸堿滴定法(Acid-base titration method),水-乙醇混合溶劑中滴定 膠束水溶液中滴定 非水滴定法,1.水-乙醇混合溶劑,易吸收CO2使淡藍色褪去，需做空白，或采用電位法,膠束有增溶作用，能改變巴比妥類藥物的

9、解離平衡，使其酸性增強。常用有： 溴化十六烷基三甲基芐銨CTMA 氯化四癸基二甲基芐銨 TDBA,指示劑法或電位法,2. 在膠束水溶液中滴定,本類藥物在非水溶液中的酸性增強，用堿性標準溶液滴定時，終點較為明顯。 溶劑：二甲基甲酰胺、甲醇、氯仿、丙酮、無水乙醇、苯、吡啶、甲醇-苯（15：85）、乙醇-氯仿（1：10） ； 滴定劑：甲醇鉀（鈉）的甲醇（或乙醇）溶液、氫氧化四丁基銨的氯苯溶液等； 指示劑：麝香草酚藍，電位法（玻璃-甘汞電極）,3. 非水溶液滴定法,（四） 紫外分光光度法,直接測定的UV法 提取分離后的UV法,在堿性介質(zhì)中電離為具有紫外吸收特征的結(jié)構(gòu),（1） 吸收系數(shù)法,1. 直接測定

10、的UV法,（2） 對照品比較法,目的:消除干擾物質(zhì)對測定的影響。 本類藥物具有弱酸性，在氯仿等有機溶劑中易溶，其鈉鹽在水中易溶。,2. 提取分離后的UV法,樣品,溶解,酸化,CHCl3提取,水 CHCl3,PH7.2-7.5 緩沖液,OH-,水 CHCl3,水 CHCl3 ,測定A(max),一、基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì) （一）典型藥物的結(jié)構(gòu),第二節(jié) 苯并二氮雜卓類藥物的分析,地西泮 （Diazepam）,奧沙西泮 (Oxazepam),氯氮 (Chlordiazepoxide),三唑侖 （Triazolam）,（二）主要性質(zhì),1.弱堿性 2.強酸中可水解 3. UV 4.多為游離堿，不溶于水,(一

11、) 化學鑒別 1. 沉淀反應 氯氮 橙紅色 鹽酸氟西泮 KBiI4 橙紅色 氯硝西泮 橙紅色放置后變深,二、鑒別試驗 化學法、光譜法、色譜法,2. 硫酸熒光反應 本類藥物溶于硫酸/稀硫酸在紫外光(365nm)下顯不同顏色熒光。,3. 水解后呈芳伯胺反應,氯氮,橙紅色,奧沙西泮,有機氯化合物，氧瓶燃燒法破壞，生成HCl，以5% NaOH溶液吸收，硝酸酸化，顯氯化物反應。Ch.P鑒別地西泮。,4. 分解產(chǎn)物的反應,藥物名稱 溶劑 濃度 max E1%1cm （g/ml） (nm) 地西泮 0.5%硫酸甲醇 10 284 440-468 奧沙西泮 乙醇 10 229,3152 氯硝西泮 0.5%硫酸

12、乙醇 10 2522,3072 氯氮卓 0.1mol/L鹽酸 7 245,308 15 308 309-329 三唑侖 乙醇 5 221,（二）UV和IR,IR:用于大多數(shù)1，4苯并二氮雜卓類藥物的鑒別,HPLC TLC,（三）色譜法,非水溶液滴定法 分光光度法,四 含量測定,適用范圍：pKb8的有機堿及其鹽。 只要選擇合適的溶劑、滴定劑和終點指示的方法，可使pKb為813 的弱堿性藥物采用本法滴定。 pKb為810時，冰醋酸； pKb為1012時，冰醋酸+醋酐； pKb12，醋酐。,（一）非水溶液滴定法,滴定液：高氯酸 終點指示方法 電位法、指示劑法 結(jié)晶紫:紫藍紫藍綠綠黃 堿性區(qū) 酸性區(qū),對照品