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文檔簡介
1、2.2.1動物細胞培養(yǎng)和核移植技術,選擇3現代生命科學專題2細胞工程2.2動物細胞工程,教育目標,重點難點,問題回顧,教育課程,知識結構,教育反饋,課后練習,教育參考,教育目標,動物細胞培養(yǎng)的過程,條件和應用。簡述了通過動物體細胞核移植技術克隆動物的過程和應用前景。主要動物細胞培養(yǎng)過程和條件。用動物的體細胞核移植技術克隆動物的過程。難點在于用動物的體細胞核移植技術克隆動物的過程。、主要困難、植物細胞工程常用的技術手段是什么?那么,動物細胞常用的技術手段是什么呢?回憶,想象,植物組織培養(yǎng),植物細胞雜交,問題回顧,動物細胞工程學科:動物細胞培養(yǎng),動物細胞細胞核移植,動物細胞融合,單克隆抗體生產等,
2、動物細胞培養(yǎng)技術是其他動物細胞工程學科技術的基礎,課程,培訓課程,細胞株:原代細胞一般在10歲左右細胞生長停滯,大部分細胞衰老死亡,少數細胞存活到4050歲左右。這種傳代細胞是細胞系。細胞株:細胞株傳到50多歲后,又出現細胞生長停滯狀態(tài),只有部分細胞由于遺傳物質的變化,在培養(yǎng)條件下可以無限地繼承。這種傳代細胞是細胞系。細胞株和細胞株的差異:細胞株的遺傳物質變化具有癌細胞的特征,不能抑制接觸,易于世代培養(yǎng)。概念,培養(yǎng)的第一代細胞和10代以內的細胞稱為原代細胞培養(yǎng)。傳代培養(yǎng):將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出,制作細胞懸浮液,分兩個以上的培養(yǎng)瓶進行繼續(xù)培養(yǎng),稱為傳代培養(yǎng)。概念,培養(yǎng)基,1,無菌,無毒環(huán)境(添
3、加一定量的抗生素)3,溫度和PH 36.5 0.5度;PH為7.2-7.4。4.氣體環(huán)境:O2和CO2(95%空氣和5% CO2),合成培養(yǎng)基中缺乏的物質,動物細胞培養(yǎng)條件,(1)蛋白質生物產品生產:疫苗,干擾素,單克隆抗體等。(2)為了皮膚移植,大量獲得自己的皮膚細胞。(3)用于檢測有毒物質(4)用于生理、病理、藥理等方面的研究,為治療和預防疾病提供理論依據,動物細胞培養(yǎng)技術的應用,2,為什么選擇動物胚胎或幼體的器官或組織作為動物細胞培養(yǎng)材料?1,動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么?什么比植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基更獨特?3,為什么在培養(yǎng)前要將組織細胞分散為單個細胞?4,動物細胞培養(yǎng)像綠色植物組織培養(yǎng)一
4、樣,最終能培養(yǎng)成新的個體嗎?主要成分:葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等。獨特之處有1,液體培養(yǎng)基2,成分有動物血清等。這些組織或器官的細胞生命力旺盛,分裂能力強,快速繁殖,培養(yǎng)無病毒植物等,培養(yǎng)目的,葡萄糖,動物血清,甘蔗,植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質,細胞增殖,原理,動物細胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng)核仍然是全能的:因為核包含維持物種遺傳性所需的所有基因,并且沒有因細胞分化而失去基因,所以高度分化細胞的核仍然是全能的。再想想,動物體細胞核移植技術,動物細胞核移植:將動物一個細胞的細胞核移植到已經消除細胞核的卵母細胞中,重新組裝,發(fā)展成新的胚胎,牙齒新胚胎最終
5、發(fā)展成動物個體。通過核移植獲得的動物??寺游铮河洃?,供體細胞(細胞核用),細胞培養(yǎng),體細胞,卵巢卵母細胞(M中期:供應摘要: 1)核移植和胚胎移植2。以卵細胞為受體細胞的原因是:牙齒最大的細胞,所以容易操作,發(fā)育可以直接表達形態(tài),同時為細胞核的多能性表達提供物質基礎3。嚴格地說,新個體具有卵母細胞的細胞質,因此兩個茄子親本的性狀、核移植過程、核移植過程克隆動物的研究意義,1??寺游镒鳛樯锓磻魃a醫(yī)用蛋白質。2。動物品種改良3。治療人類疾病,4作為捐贈者。保護瀕危動物,體細胞核移植技術的問題,1。很多克隆動物體型過大,出現異常肥胖、發(fā)育困難、免疫不平衡等遺傳和生理缺陷2。成功率很低,克隆
6、動物食品的安全性問題。知識結構,動物細胞培養(yǎng)和核移植技術,動物細胞培養(yǎng),細胞培養(yǎng)的應用和概念,細胞培養(yǎng)過程,細胞培養(yǎng)條件,細胞培養(yǎng)技術的應用,動物體細胞核移植技術和克隆動物,核移植技術和克隆動物的概念,體細胞核移植技術的過程,體細胞核1。在動物細胞培養(yǎng)過程中,遺傳物質發(fā)生變化的細胞()A細胞株b細胞株c原代細胞D傳代細胞,2,動物細胞工程技術的基礎是- () a .動物細胞融合b .單克隆抗體c .胚胎移植D .動物細胞培養(yǎng),A,D,3 d B .動物細胞培養(yǎng)無需在無菌狀態(tài)下進行。c .動物細胞可以代代培養(yǎng),但植物細胞不能培養(yǎng)。d .動物細胞可以大量培養(yǎng),但植物細胞只能培養(yǎng)植物。a、教育反饋、
7、1。動物細胞培養(yǎng)要經過脫分化嗎?為什么?2.用體細胞核移植方法生產的克隆動物對體細胞供應體動物進行了100%的克隆嗎?為什么?課后練習,教育參考,1 .在動物細胞傳代培養(yǎng)時,用胰蛋白酶分散細胞,說明細胞間物質主要是什么成分。胃蛋白酶可以嗎?細胞之間的成分主要是蛋白質。適合胃蛋白酶的PH值約為2,PH6牙齒,胃蛋白酶就會失去活性。相反,適合胰腺蛋白質作用的環(huán)境PH為7.2 - 8.4,適合大部分動物細胞培養(yǎng)的PH為7.2 - 7.4,胃蛋白酶在牙齒環(huán)境中沒有活性。胰蛋白酶在牙齒環(huán)境中活性高,因此胰蛋白酶適合細胞培養(yǎng)時消化。胰蛋白酶真的不能消化細胞嗎?為什么?胰蛋白酶不僅能消化細胞間蛋白質,而且長
8、時間的作用也會消化細胞膜蛋白,對細胞造成損傷,所以要好好調節(jié)胰蛋白酶的消化時間。3.單細胞培養(yǎng):1957年,科學家使用胰蛋白酶消化處理和液體培養(yǎng)基應用方法進行了單細胞培養(yǎng)。單層培養(yǎng)法的出現對細胞培養(yǎng)的發(fā)展起到了很大的促進作用。4。為什么培養(yǎng)動物細胞時通常要添加血清?血清中含有蛋白質、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質是白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細胞合成蛋白質的基本成分,有些動物細胞不能合成,必須在培養(yǎng)液中提供。激素促進胰島素,生長激素等細胞的生長,增殖,附著。因此,細胞培養(yǎng)必須使細胞順利生長和繁殖,一般要添加10%-20%的血清。5.無血清培養(yǎng):在科學研究中,有時需要明確定義培養(yǎng)液的成分,血清中含有很多未知的成分,會影響研究結果,因此可以在細胞培養(yǎng)中使用無血清培養(yǎng)。無血清培養(yǎng)基是在基本培養(yǎng)基中添加
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