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1、腸道病原菌的分離與鑒定三,腸道病原菌的分離鑒定(3) 細(xì)菌的藥敏實驗結(jié)果觀察 厭氧菌培養(yǎng)法及厭氧菌生長狀態(tài) 小白鼠感染肺炎球菌實驗結(jié)果觀察 細(xì)菌致病性試驗,雙糖鐵培養(yǎng)基的制備,成分:脲 胨、乳 糖、蛋白胨、葡萄糖、硫酸亞鐵、氯化鈉、硫代硫酸鈉、瓊脂、蒸餾水、酚紅水溶液 制法:加熱溶解校正pH為7.2,然后加入0.4酚紅水溶液,分裝試管,高壓滅菌,使成為底層較深的斜面。 用途:初步鑒別腸道致病菌用,可以觀察葡萄糖、乳糖的發(fā)酵,并可觀察有無H2S產(chǎn)生及細(xì)菌有無動力。,原理,該培養(yǎng)基中只加少量的葡萄糖與較多量的乳糖。細(xì)菌分解糖類產(chǎn)酸可使培養(yǎng)基局部指示劑改變顏色。當(dāng)分解葡萄糖的細(xì)菌在斜面上生長時,產(chǎn)生
2、的酸少,又在有O2的情況下氧化,生成CO2和H2O,失去改變局部酸堿度的作用,所以培養(yǎng)基斜面部分不變色。但當(dāng)細(xì)菌分解乳糖時產(chǎn)生酸量較多,故培養(yǎng)基斜面部分可變色。細(xì)菌在高層中生長時,因處于無O2狀態(tài),產(chǎn)生的酸不分解,故使高層部分培養(yǎng)基指示劑變色。硫酸亞鐵可與產(chǎn)生的H2S作用,生成FeS使培養(yǎng)基變黑。硫代硫酸鈉是一種還原劑,防止培養(yǎng)基中氧化物與H2S作用而影響FeS的生成。,生化反應(yīng)結(jié)果觀察,血清學(xué)鑒定,(1)沙門氏菌屬 取一載玻片與沙門氏菌屬、群、型血清做玻片凝集試驗。 取可疑培養(yǎng)物,先與A-E群沙門氏菌多價O血清做凝集試驗,陽性者認(rèn)為該菌屬于沙門氏菌屬。 用沙門氏菌屬各群特有的單價O因子血清做凝集反應(yīng),可判定其屬于沙門氏菌屬何群。 用該群內(nèi)各菌所特有的H因子血清作玻片凝集反應(yīng),可最后判定為何種菌。,主要沙門氏菌抗原結(jié)構(gòu)表,厭氧培養(yǎng)法,材料:厭氧罐、厭氧氣袋、鋼絲絨、厭氧手套箱、干燥皿、焦性沒食子酸等。 方法:厭氧菌的培養(yǎng)方法種類較多,總體上可以分為三大類:物理法、化學(xué)法和生物耗氧法。 1、物理法:厭氧罐培養(yǎng)法、厭氧氣袋
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