1、第七章 苯乙胺類擬腎上腺素藥物的分析,基本要求,一、掌握苯乙胺類擬腎上腺類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)；主要苯乙胺類擬腎上腺素藥物的鑒別、檢查和含量測定的原理與特點(diǎn) 。 二、熟悉主要苯乙胺類擬腎上腺素藥物雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)、危害、檢查方法與含量限度 三、了解影響苯乙胺類擬腎上腺素藥物穩(wěn)定性的主要因素、體內(nèi)樣品與臨床監(jiān)測方法,第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與性質(zhì),一、基本結(jié)構(gòu)與典型藥物,R1CHCHNHR2 HX OH R3,*,擬腎上腺素類,*,鹽酸克侖特羅,無酚羥基,鹽酸麻黃堿,弱堿性,酚羥基 特性,芳伯氨基 特性,紫外吸收,光學(xué)活性,化學(xué)性質(zhì),烴氨基側(cè)鏈為仲胺氮，顯弱堿性 鄰苯二酚/酚羥基，F(xiàn)eCl3反應(yīng)，易氧化 手性碳原子，

2、具有旋光性 鹽酸克侖特羅 苯環(huán),二、主要理化性質(zhì),一、與鐵鹽的反應(yīng),Ar-OHFeCl3,絡(luò)合顯色 多為綠色,紫色/紫紅色, 堿液,詳見P224,第二節(jié) 鑒別試驗(yàn),二、與甲醛硫酸反應(yīng) 在此試劑中形成醌式結(jié)構(gòu)而顯色,具有Ar-OH，易被氧化劑I2, H2O2, K3Fe(CN)6氧化而顯色,三、還原性反應(yīng),酸性下：,重酒石酸去甲腎上腺素,pH3.56酒石酸氫鉀飽和溶液,腎上腺素 鹽酸異丙腎上腺素 重酒石酸去甲腎上腺素,I2 5,Na2S2O3,深紅棕,紫色,無色/微紅/淡紫,互相區(qū)分,四、 雙縮脲反應(yīng) 是鑒別芳環(huán)氨基醇的特殊反應(yīng)；可用于鹽酸麻黃 堿，鹽酸去氧腎上腺素鑒別,鹽酸麻黃堿,藍(lán)紫色,乙醚

3、,+CuSO4 + NaOH,醚層 (紫紅色),鹽酸去氧腎上腺素紫色 無色,五、吸收光譜特征,例如：鹽酸異丙腎上腺素 0.05mg/ml max = 280nm A =0.50 詳見 P226,一、酮體檢查 本類藥物在生產(chǎn)過程中多采用酮體氫化制得， 若氫化不完全，易引入酮體雜質(zhì)。,第三節(jié) 特殊雜質(zhì)與檢查,腎上腺素酮,220 260 300nm,腎上腺素及腎上腺素酮的紫外吸收曲線,max310nm,310nm處，腎上腺素?zé)o吸收，酮體有吸收,采用UV法檢查： 利用酮體在310nm有吸收，本類藥物無吸收。 例如： 腎上腺素 配2.0mg/ml =310nm A0.05 鹽酸去氧腎上腺素 配2.0mg

4、/ml =310nm A0.20 重酒石酸去甲腎上腺素 配2.0mg/ml =310nm A0.05,二、有關(guān)物質(zhì)的檢查,鹽酸去氧腎上腺素、硫酸沙丁胺醇TLC 鹽酸苯乙雙胍 PC 其他HPLC,第四節(jié) 含量測定,非水溶劑的種類： 酸性溶劑：有機(jī)弱堿在酸性溶劑中可顯著地增強(qiáng) 相對堿度，如冰醋酸 堿性溶劑：有機(jī)弱酸在堿性溶劑中可顯著地增強(qiáng)相對酸度，如二甲基甲酰胺 兩性溶劑：具有酸、堿性能，如methanol 惰性溶劑：沒有酸、堿性的溶劑，丙酮、氯仿,弱堿性,(一) 基本原理,當(dāng)HA酸性較強(qiáng)時，反應(yīng)不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。,BH+A-,+,HClO4,BH+ClO4

5、,+,HA,游離堿類鹽,被置換出的弱酸,因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測定條件,(二) 一般方法,供試品,+,冰醋酸,10ml-30ml,若供試品為氫鹵酸鹽再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml-5ml,結(jié) 果,高氯酸滴定液,以空白試驗(yàn)校正,(三) 問題討論 1.適用范圍:pKb8的有機(jī)弱堿及其鹽類的含量測定 pKb為813的弱堿性雜環(huán)類藥物，可采用本法 采用合適的溶劑、滴定劑和終點(diǎn)指示的方法 藥物pKb為810時， 選冰醋酸作為溶劑 為1012時，選冰醋酸與醋酐的混合溶液 12時，應(yīng)用醋酐作為溶劑,比醋酸合質(zhì)子的酸性更強(qiáng)，可增強(qiáng)藥物的堿性,2(CH3CO)2O,(CH3CO)3O+ + CH3COO-

6、,醋酐合乙酰氧離子,在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突躍顯著增大，使一些堿性極弱的雜環(huán)類藥物獲得滿意測定結(jié)果。,2.酸根的影響 冰醋酸中的酸性:HClO4HBrH2SO4HClHSO4-HNO3 當(dāng)被置換出的酸的酸性較強(qiáng)，則此置換反應(yīng)無法定量完成。鹽酸鹽的酸性較強(qiáng)，因此滴定前預(yù)先加入醋酸汞與氫鹵酸生成在冰醋酸中難解離的鹵化汞，從而消除氫鹵酸對滴定反應(yīng)的不良影響。,3.滴定劑的穩(wěn)定性 溶劑冰醋酸具有揮發(fā)性，膨脹系數(shù)較大，溫度和貯存條件都影響滴定劑的濃度。若滴定樣品與標(biāo)定HClO4溶液時的溫度不一致，溫差未超過10時，應(yīng)將高氯酸滴定液的濃度用公式加以校正,0.0011：冰醋酸的體積膨脹系數(shù),

7、溫差超過10時，應(yīng)重新標(biāo)定,4.終點(diǎn)指示方法 常用電位法和指示劑法。 電位法：玻璃電極為指示電極 飽和甘汞電極為參比電極 指示劑：結(jié)晶紫（crystal violet，CV） 堿性 酸性 紫、藍(lán)、藍(lán)綠、綠、黃綠、黃,在滴定不同強(qiáng)度的堿時，終點(diǎn)顏色變化不同。 較強(qiáng)的堿應(yīng)以藍(lán)色或天藍(lán)色為終點(diǎn)； 較弱的堿應(yīng)以黃綠色或黃色為終點(diǎn)。 最好以電位滴定法作對照，以確定終點(diǎn)的顏色。同時應(yīng)作空白試驗(yàn)以減少滴定終點(diǎn)誤差。,N能鍵合多個質(zhì)子，表現(xiàn)為多元堿,非水滴定法測定有機(jī)堿含量的優(yōu)點(diǎn) 1在水中難以溶解或易發(fā)生水解的有機(jī)堿及其鹽類，都可按非水法測定 2由于有機(jī)溶劑的電離常數(shù)低，用于少量樣品的滴定也有明顯的終點(diǎn) 3方

8、法簡便、快速，樣品取量少，結(jié)果也較準(zhǔn)確,本類藥物的原料藥多采用此法。 1.重酒石酸去甲腎上腺素的測定 相當(dāng)于B的有機(jī)酸鹽，可直接滴定 2.鹽酸異丙腎上腺素的測定 相當(dāng)于B的鹽酸鹽，不能直接滴定，需加Hg(Ac)2 處理后滴定 3.硫酸沙丁胺醇的測定 相當(dāng)于B的H2SO4鹽，可直接滴定至其硫酸氫鹽，加醋酐提高堿性,二、溴量法 適用：重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素,基本原理：具苯酚結(jié)構(gòu)，酚羥基的鄰對位H為活潑H，能與過量的溴定量發(fā)生溴代反應(yīng),剩余,定、過量,3,結(jié)果用空白試驗(yàn)進(jìn)行校正,三、 UV與比色法 1.UV：結(jié)構(gòu)中苯環(huán)具有紫外吸收 2.比色法： 利用藥物分子結(jié)構(gòu)中的Ar-NH2重氮化偶合顯色，如：鹽酸克侖特羅栓 利用藥物分子結(jié)構(gòu)中的Ar-OH與Fe2絡(luò)合顯色，進(jìn)行比色測定，如：鹽酸異丙腎上腺素注射液、鹽酸多巴胺注射液 四、HPLC 腎上腺素注射液、重酒石酸去甲腎上腺素注射液等,動物組織中鹽酸克侖特羅的GC-MS測定,2009,瘦肉精事件,2011年，央視315特別行動“健美豬”真相曝光雙匯子公司收購含“瘦肉精”豬肉,第五節(jié) 體內(nèi)藥物分析,鹽酸克侖特羅 平喘藥 非獸藥 非飼料添加劑,使用劑量是人用藥劑量的10倍以上，才能達(dá)到提高瘦肉率的效果。 中毒：肌肉顫動、心悸、心律失常、心動過速,檢測方法,GC-MS,HPLC,HPLC-MS/MS,色譜高效快速 分離+質(zhì)譜高靈 敏度定