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1、實(shí)驗(yàn)五 細(xì)菌的芽孢染色法,主講教師：雒曉芳,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)并掌握芽孢染色法 初步了解芽孢桿菌的形態(tài)特征,實(shí)驗(yàn)原理,芽孢：芽孢又叫內(nèi)生孢子，是某些細(xì)菌生長(zhǎng)到一定階段（環(huán)境中缺乏營(yíng)養(yǎng)及有害代謝產(chǎn)物積累過(guò)多時(shí)），在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形厚壁、含水量極低、抗逆性極強(qiáng)的休眠體。 芽孢的存在和特點(diǎn)是細(xì)菌分類(lèi)與鑒定的重要形態(tài)學(xué)指標(biāo)； 是衡量各種消毒滅菌手段的重要指標(biāo)。,芽孢染色法是利用細(xì)菌的芽孢和菌體對(duì)染料的親合力不同的原理，用不同染料進(jìn)行著色，使芽孢和菌體呈不同的顏色而便于區(qū)別。 芽孢壁厚、透性低，著色、脫色均較困難，因此，當(dāng)先用一弱堿性染料，如孔雀綠或堿性品紅在加熱條件下進(jìn)行染色時(shí)，此染料不僅可以進(jìn)

2、入菌體，而且也可以進(jìn)入芽孢，進(jìn)入菌體的染料可經(jīng)水洗脫色，而進(jìn)入芽孢的染料則難以透出，若再用復(fù)染液（如沙黃）或襯托溶液（如黑色素溶液）處理，則菌體和芽孢易于區(qū)分。,實(shí)驗(yàn)器材,菌種：枯草芽孢桿菌 染色劑：5孔雀綠水溶液，0.5番紅水溶液 器材： 接種環(huán)，酒精燈，載玻片， 擦鏡紙、顯微鏡等。,操作步驟,1、涂片：將培養(yǎng)24小時(shí)左右的枯草 芽孢桿菌，作涂片、干燥、固定。 用接種環(huán)挑取試管底部菌種于潔凈載玻片上，涂成薄膜，然后將涂片通過(guò)火焰3次溫?zé)峁潭ā?細(xì)菌涂片的制備過(guò)程,孔雀綠染色 加熱(5-10min) 水洗脫色 染液切勿干涸 番紅復(fù)染 (35min) 水洗 鏡檢 芽孢呈綠色，芽孢囊及營(yíng)養(yǎng)體為紅色,注意事項(xiàng),1菌液要濃； 2選用適當(dāng)菌齡的菌種； 3加熱染色時(shí)必須維持在染液微冒蒸汽狀態(tài),實(shí)驗(yàn)結(jié)果,游離芽孢,芽孢,菌體,枯草芽孢桿菌,巨大芽孢桿菌,六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告,1繪圖 枯草芽孢桿菌的芽孢形狀、 大小、 著生位置及染色結(jié)果

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