1、1,第三章 藥 物 的 雜 質(zhì) 檢 查,2,第三章 藥物的雜質(zhì)檢查法,第一節(jié) 概述 第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法 第三節(jié) 特殊雜質(zhì)的檢查方法,第三章,3,第一節(jié) 概述,一、藥物的純度要求 二、雜質(zhì)的來源與種類 三、雜質(zhì)的限量檢查,第三章,4,第三章,一藥物的純度要求,指藥物純凈的程度. 是反映 藥品質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo).,1）評(píng)價(jià)：綜合考慮藥物的外觀性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定. 綜合評(píng)定藥物的純度. 雜質(zhì)檢查 是藥物純度評(píng)價(jià)的一項(xiàng)重要內(nèi)容.,1.藥物的純度,5,第三章,2）藥物純度與試劑純度,共同點(diǎn)：均規(guī)定所含雜質(zhì)的種類和限量. 不同點(diǎn)： a.藥物純度又稱為藥用規(guī)格,主要從用藥 安全、有效

2、和對(duì)藥物穩(wěn)定性等方面考慮,只 有合格品和不合格品.,6,第三章,b.化學(xué)試劑的純度是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對(duì)使用的影響以及試劑的使用范圍和使用目的加以規(guī)定,它不考慮雜質(zhì)對(duì)生物體的生理作用及毒副作用. 化學(xué)試劑一般分為4個(gè)等級(jí)基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純或特種試劑(光譜純、色譜純、農(nóng)藥殘留檢測(cè)級(jí))、分析純和化學(xué)純,7,第三章,例如：硫酸鋇（BaSO4） 試劑規(guī)格 對(duì)可溶性鋇鹽不做檢查. 檢查：氯化物、鐵、灼燒失重等 藥用規(guī)格 如存在可溶性鋇鹽則導(dǎo)致 醫(yī)療事故. 檢查：酸溶性鋇鹽、重金屬、砷鹽等,化學(xué)試劑不能代替藥品使用,8,第三章,一藥物的純度要求,是指藥物中存在的無治療作用或影響藥物的穩(wěn)定性和療效,甚至

3、對(duì)人體健康有害的微量物質(zhì).,2.藥物的雜質(zhì),為保證藥品質(zhì)量,確保用藥安全、 有效,必須檢查雜質(zhì),控制藥物純度.,9,第三章,1）對(duì)人體有害的 如：砷鹽和重金屬 2）影響藥物穩(wěn)定性 如：水分（青霉素鉀鹽） 3）雖對(duì)人體無害也不影響藥物穩(wěn)定性，但可用于考核生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)控制是否正常指示性雜質(zhì)（信號(hào)雜質(zhì)） 如：Cl- SO42-,二雜質(zhì)的種類,10,第三章,二雜質(zhì)的種類,按來源可分為2類,一般雜質(zhì) 指在自然界中分布廣泛,在多種藥物的生產(chǎn)或貯存過程中容易引入的雜質(zhì).,特殊雜質(zhì) 指在該藥物的生產(chǎn)或貯存過程中,根據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件,有可能引入的雜質(zhì).,11,第三章,二雜質(zhì)的種類,按結(jié)構(gòu)可分為

4、2類,無機(jī)雜質(zhì) Cl-、S2-、CN-、As、重金屬.,有機(jī)雜質(zhì) 中間體、副產(chǎn)物、分解物、異構(gòu)體、殘留溶劑.,12,第三章,二雜質(zhì)的種類,按性質(zhì)可分為3類,信號(hào)雜質(zhì) 指本身一般無害,但其含量多少可反映藥物純度水平,指示生產(chǎn)工藝是否合理. 如：氯化物、硫酸鹽等.,有害雜質(zhì) 對(duì)人體有毒害的雜質(zhì).在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中嚴(yán)加控制,以保證用藥安全. 如：重金屬、砷鹽、氰化物、氟化物等.,13,第三章,二雜質(zhì)的種類,a 具有立體異構(gòu)體的藥物,其生物活性有很大差異; 如：腎上腺素為左旋體,其升壓作用是右旋體的12倍. b 異構(gòu)體中,其順式體與反式體的生物活性也不相同; 如：VA以全反式的生物活性為最高.,無效或低效雜

5、質(zhì),14,第三章,二雜質(zhì)的種類,c 藥物的晶型不同,其理化常數(shù), 溶解性穩(wěn)定性、體內(nèi)的吸收和療效也有差異. 如：驅(qū)蟲藥甲苯咪唑,有A、B、C三種晶型. 其中C晶型的驅(qū)蟲率90%,B晶型的驅(qū)蟲率4060%,A晶型的驅(qū)蟲 率小于20%.,15,第三章,二雜質(zhì)的種類,必須重視異構(gòu)體和多晶型對(duì)藥物有效性和安全性的影響. 控制藥物中低效、無效以及具有毒性的異構(gòu)體和多晶型, 在藥物純度研究中日益受到重視.,16,第三章,藥物中雜質(zhì)的來源與種類 有針對(duì)性地制訂雜質(zhì)檢查項(xiàng)目的方法和限度,二雜質(zhì)來源,藥物中可能存在的雜質(zhì) 決定雜質(zhì)檢查的項(xiàng)目,17,第三章,二雜質(zhì)來源,藥物生產(chǎn)過程引入,藥物貯存期間引入,18,第

6、三章,二雜質(zhì)來源,(4) 合成工藝中使用的設(shè)備、器皿可能 引入重金屬、以及使用溶劑,有機(jī)溶劑.,1 生產(chǎn)過程中引入,(1) 所用原料不純,(2) 合成工藝中未反應(yīng)完全的原料、 合成中間體、副產(chǎn)物等.,（3）從藥用植物中提取分離過程中引入,19,第三章,二雜質(zhì)來源與種類,例： 阿斯匹林由水楊酸乙?；频?20,第三章,制劑過程中可能產(chǎn)生新物質(zhì),21,第三章,二雜質(zhì)來源與種類,(1)保管不善或貯存時(shí)間過長(zhǎng),(2)包裝不當(dāng),2 貯藏過程中引入,22,第三章,二雜質(zhì)來源與種類,23,第三章,二雜質(zhì)來源與種類,例1: 麻醉乙醚在日光、空氣及濕氣作用下, 易氧化分解為醛及有毒的過氧化物. CH3CH2OC

7、H2CH3 CH3CHO + CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3（二羥乙基過氧化物）藥典規(guī)定:起封后24小時(shí)內(nèi)使用,24,第三章,二雜質(zhì)來源與種類,例2： 四環(huán)素在酸性條件下可發(fā)生差向異構(gòu)化反應(yīng),生成差向四環(huán)素(毒性高、活性低),25,第三章,1 雜質(zhì)限量,在不影響藥物療效、穩(wěn)定性及不發(fā)生毒性的前提下,藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量.,三 雜 質(zhì) 限 量 檢 查,百分表示( %) 百萬分表示( ppm),限量表示方 法,26,第三章,三 雜 質(zhì) 限 量 檢 查,2 雜質(zhì)檢查方法(限量檢查法),27,操作: 平行試驗(yàn)比較兩比色管的顏色或濁度,判斷雜質(zhì)限量是否符合規(guī)定.,管2 （對(duì)照管）,

8、管1 （樣品管）,第三章,取限度量的待檢雜質(zhì)對(duì)照品配成的對(duì)照溶液,與一定量供試品配成的供試品容液在相同條件下處理, 比較反應(yīng)結(jié)果, 判斷供試液中所含雜質(zhì)限度是否符合規(guī)定.,標(biāo) 準(zhǔn) 對(duì) 照 法,28,在供試品溶液中加入試劑,在試驗(yàn)條件下反應(yīng),不得出現(xiàn)正反應(yīng). 既以檢測(cè)條件下反應(yīng)靈敏度控制雜質(zhì)限量.,第三章,如：蒸餾水中氯化物的檢查,5滴 1mL,0.2mg/50mL 4g/mL,靈 敏 度 法,29,取一定量供試品,在規(guī)定條件下測(cè)定待檢雜質(zhì)吸光度, 與規(guī)定限量比較, 判斷供試品中雜質(zhì)限量.,第三章,比 較 法,30,例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查,第三章,比 較 法,規(guī)定： A310nm0.05,

9、31,寫成：,4 限量計(jì)算公式,三 雜 質(zhì) 的 限 量 檢 查,第三章,32,若用ppm表示雜質(zhì)限量 則：,注意: 單位是否統(tǒng)一 供試品是否有稀釋 表示方法%或ppm,第三章,33,例1. 對(duì)乙酰氨基酚中氯化鈉的檢查,對(duì)照品溶液: 標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液(10gCl-/ml),方法：取5.0ml同法操作比較,濁度不得更大. 計(jì)算：氯化物限量是多少(% )？,第三章,34,規(guī)定：含重金屬百萬分之五(5ppm) 計(jì)算：應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液(10gPb/ml)多少ml？,例2. 葡萄糖中重金屬的檢查 方法：,第三章,35,例3. 溴化鈉中砷鹽檢查,第三章,方法：中國(guó)藥典規(guī)定：取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2.0mL (每1mL相

10、當(dāng)于1g砷)制備砷斑 規(guī)定：含砷量不得超過4 ppm 計(jì)算：應(yīng)取供試品量(g)？,36,一 氯 化 物 檢 查 法,1. 原理 利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝 酸銀反應(yīng), 生成氯化銀白色渾濁液, 與一 定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下產(chǎn)生 的氯化銀渾濁程度比較, 濁度不得更大. Cl-+Ag+ H+ AgCl,第三章,37,2操作方法(對(duì)照法),樣品管,對(duì)照管,第三章,葡萄糖中氯化物檢查,1.0mL,用水稀釋至50mL,6.0mL,0.60g,0.010%,(濃度：10gCl/ml),一 氯 化 物 檢 查 法,38,一 氯 化 物 檢 查 法,3. 結(jié)果觀察方法 暗處放置5min(避免AgCl

11、分解),第三章,39,4注意事項(xiàng)及討論,一 氯 化 物 檢 查 法,平行試驗(yàn) 加稀硝酸的目的 氯化物的最適檢測(cè)濃度范圍 稀釋到40ml后加硝酸銀試液的目的 供試品溶液不澄清處理方法 供試品溶液有色時(shí)的處理方法 供試品溶液顯堿性的處理方法 干擾物的排除 有機(jī)藥物中氯化物的檢查,第三章,40,一 氯 化 物 檢 查 法,為了保證樣品管與對(duì)照管的反應(yīng)條件一致,要求樣品管與對(duì)照管要平行操作平行試驗(yàn).,第三章,平行試驗(yàn),41,加稀硝酸的目的,一 氯 化 物 檢 查 法,加速氯化銀混濁的生成,產(chǎn)生較好的乳濁,避免產(chǎn)生碳酸銀、氧化銀、磷酸銀沉淀. 50ml供試液含稀硝酸10ml為宜. 過多會(huì)增大氯化銀的溶解

12、度,使?jié)岫冉档?,第三章,42,一 氯 化 物 檢 查 法,氯化物的最適檢測(cè)濃度范圍,50ml供試液中含0.050.08mg的Cl-,相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液(10gCl-/ml) 5.08.0ml 時(shí),所顯渾濁梯度明顯. 根據(jù)限量取用適宜的供試品量, 使氯化物的濃度在適宜的范圍內(nèi).,第三章,43, 稀釋到40ml后加硝酸銀試液 的目的,一 氯 化 物 檢 查 法,使產(chǎn)生的AgCl渾濁均勻. 硝酸銀加得過早, 由于氯化物濃度過大而產(chǎn)生AgCl沉淀而影響比濁.,第三章,44,供試品溶液不澄清處理方法,一 氯 化 物 檢 查 法,供試品溶解后溶液不澄清,應(yīng)過濾,過濾時(shí)的濾紙要先用含硝酸的水溶液(110

13、0)洗滌, 除去濾紙中含有的氯化物.,第三章,45,供試品溶液有色時(shí)的處理方法,a.內(nèi)消色法 如枸櫞酸鐵銨中氯化物的檢查.,第三章,46,向供試品溶液中加入某種試劑,使溶液顏色褪去后再依法檢查.,一 氯 化 物 檢 查 法,例：高錳酸鉀中氯化物的檢查 因溶液呈紫色,加入適量乙醇,使顏色消失后再檢查.,第三章,b. 外消色法,47,供試品溶液顯堿性的處理方法,一 氯 化 物 檢 查 法,先中和為中性后再檢查. 避免硝酸銀在堿性條件下生成氫氧化銀和氧化銀.,第三章,48,a.碘化物中氯化物的檢查,第三章,干擾物的排除,49,b.碘中氯化物的檢查,反應(yīng)原理: 根據(jù)氨中溶解度不同 AgCl(溶解)Ag

14、Br(微溶)AgI(不溶),第三章,50,Cl的氧化電位高(1.35)不能被氧化為Cl2 Br-的氧化電位低(1.08),c.溴化物中氯化物的檢查,第三章,51,一 氯 化 物 檢 查 法,有機(jī)藥物中氯化物的檢查,第三章,a 溶于水的有機(jī)藥物直接檢查.,b 不溶于水的有機(jī)藥物,52,d 雜質(zhì)中鹵素原子連接于苯環(huán)上 先進(jìn)行有機(jī)破壞,使分解后再檢查.,第三章,氧瓶燃燒進(jìn)行樣品處理.,53,二 重 金 屬 檢 查 法,重金屬是指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬. 如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等. 重金屬存在影響藥物的穩(wěn)定性及安全性. 鉛易

15、在體內(nèi)積蓄中毒,以Pb為代表.,第三章,1.重金屬的概念,54,二 重 金 屬 檢 查 法,第二法:熾灼后檢查法 適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不 溶于水、稀酸及乙醇的有機(jī)藥物.,第一法:硫代乙酰胺法 適用于溶于水、稀酸、乙醇 的藥物,是最常用的方法.,第三章,55,二 重 金 屬 檢 查 法,第三法:硫化鈉法 適用于難溶于稀酸但能溶于 堿性溶液藥物(巴比妥類、磺胺類),第四法:微孔濾膜法. 適用于重金屬限量低(2-5g) 藥物.,第三章,56,二 重 金 屬 檢 查 法,適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物.,第三章,第一法 硫代乙酰胺法,57,二 重 金 屬 檢 查 法,硫代乙酰胺在弱酸性 (pH3.5

16、 醋酸鹽緩沖液)條件下水解,產(chǎn)生H2S,與微量重金屬離子(以Pb2+為代表)生成黃色到棕黑色的硫化物混懸液, 與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理后所呈顏色比較, 不得更深.,第三章,1 原 理,58,2 操作方法,樣品管,對(duì)照管,59,第三章,結(jié)果觀察,60,二 重 金 屬 檢 查 法,標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度 硫代乙酰胺試液 溶液的pH 供試品溶液有顏色時(shí)的處理 干擾物的排除方法,第三章,3討論,61,二 重 金 屬 檢 查 法,標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度,適宜目視比色的濃度范圍 Pb2+標(biāo)準(zhǔn)溶液10g/ml 12ml,第三章,62,二 重 金 屬 檢 查 法,硫代乙酰胺試液,H2S試液：惡臭和毒性；不穩(wěn)定；易被空氣氧

17、化而析出硫；濃度難以控制.,第三章,改用硫代乙酰胺為顯色劑（95版藥典）硫代乙酰胺在實(shí)驗(yàn)條件下水解產(chǎn)生H2S,與重金屬離子反應(yīng).,63,二 重 金 屬 檢 查 法,pH在3.03.5時(shí), 呈色較完全. 酸度增大, 呈色變淺甚至不呈色.,第三章,溶液的pH對(duì)于金屬離子與硫化氫呈色影響較大.,溶液的pH,64,二 重 金 屬 檢 查 法,供試品溶液有顏色時(shí)的處理,第三章,a.外消色法 b.內(nèi)消色法,65,二 重 金 屬 檢 查 法,a.外消色法,. 稀焦糖溶液調(diào)節(jié),. 指示劑調(diào)節(jié),第三章,66,第三章,67,二 重 金 屬 檢 查 法,干擾物的排除方法,干擾：弱酸性溶液中Fe3+氧化H2S析出S,

18、產(chǎn)生混濁影響檢查.,a.供試品中微量高價(jià)Fe3+存在,第三章,如：葡萄糖酸亞鐵中重金屬的檢查.,排除：加入抗壞血酸或鹽酸羥胺使 Fe3+還原為Fe2+.,68,b.供試品為鐵鹽（大量的Fe3+）,Fe3+在HCl溶液中能形成配位化合物用乙醚提取 Fe3+HCl HFeCl62-（黃色） 水層加氨試液調(diào)至堿性,殘存的Fe3+可用KCN掩蔽, 按第三法檢查. 如：枸櫞酸鐵銨的重金屬檢查,第三章,二 重 金 屬 檢 查 法,69,二 重 金 屬 檢 查 法,c.藥物本身能生成不溶性硫化物,加入掩蔽劑消除干擾 加掩蔽劑KCN,使銻、鋅形成穩(wěn)定的配合物后, 用第三法檢查.,第三章,如：葡萄酸銻鈉 中重金

19、屬的檢查,70,二 重 金 屬 檢 查 法,1.原理 供試品先熾灼破壞后,使有機(jī)結(jié)合的重金屬游離, 再按第一法檢查.,第三章,第二法 灼燒后檢查,適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇的有機(jī)藥物.,71,二 重 金 屬 檢 查 法,2. 操作,第三章,緩緩熾灼 放冷 H2SO4 0.5-1.0ml 供試品 炭化 加熱 HNO3 500-600 H2SO4 除盡 放冷 完全灰化 蒸干 HCl 2ml 水15ml 中性 按第一法檢查 蒸干 氨試液 注意：做空白試驗(yàn),72,二 重 金 屬 檢 查 法,a. HNO3處理后,必須蒸干除盡NO.,第三章,3. 討論,b. 熾灼溫度嚴(yán)格控制：500-6

20、00,c. 含鈉鹽或氟的有機(jī)藥物在熾灼時(shí) 改用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃 (瑪瑙) 蒸 發(fā)皿. 如：鹽酸氟奮乃靜中重金屬檢查,73,二 重 金 屬 檢 查 法,1. 原理在堿性介質(zhì)中,以Na2S為顯色劑, 使Pb2+與S2-作用生成PbS 的混懸液, 與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較, 不得更深.,第三章,第三法 硫化鈉法,74,二 重 金 屬 檢 查 法,適用于難溶于稀酸但能溶解于堿性溶液的藥物中重金屬的檢查. 如：磺胺類與巴比妥類藥物,第三章,75,二 重 金 屬 檢 查 法,2. 方法,取供試品適量,加NaOH試液5ml和水 20ml使溶解后,置納氏比色管中,加Na2S試液5滴, 搖勻,

21、與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較.,第三章,76,二 重 金 屬 檢 查 法,3. 討論,Na2S 對(duì)玻璃有腐蝕性,久置產(chǎn)生絮狀物,應(yīng)臨用新配.,第三章,77,二 重 金 屬 檢 查 法,第四法 微孔濾膜法,當(dāng)重金屬含量低(2-5g) 時(shí), 在比色管中難于目視觀察,采用本法.,第三章,78,二 重 金 屬 檢 查 法,1. 原 理,第三章,同第一法 使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上(鉛斑)提高檢查的靈敏度.,79,(二) 白田道夫法,(一) 古蔡氏法,(三) Ag-DDC法,(四) 奇列氏法(次磷酸法),第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,80,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,(一)

22、古蔡氏法（Gutzeit）,1. 原 理金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫與藥物中微量砷鹽反應(yīng)生成具揮發(fā)性的砷化氫,遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑,與同條件下一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成的砷斑比較,判斷砷鹽的含量.,81,反應(yīng)式如下：,第三章,82,第三章,C,三 砷 鹽 檢 查 法,83,2操作,加鋅粒2g, 立即將裝妥的導(dǎo)氣管 B 密塞與 A 瓶, 置25-40 水浴中, 反應(yīng)45分鐘, 取出溴化汞試紙, 比較砷斑.,第三章, 導(dǎo)氣管B中裝入醋酸鉛棉球,再于旋塞C的平面上放一片溴化汞試紙,樣品、對(duì)照品分別置于檢砷瓶中, 加鹽酸5ml與 水21ml, 再加2.5%碘化鉀試液5ml 與0.3%酸性氯化亞

23、錫試液5滴, 在室溫放置10分鐘,84,3. 討 論,1)試劑的作用,a. KI的作用還原劑：As5+As3+,五價(jià)砷生成AsH3的反應(yīng)速度比三價(jià)砷速度慢, 加入 KI 使五價(jià)砷還原為三價(jià)砷后再與活潑氫反應(yīng), 以增大AsH3的生成速度.,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,85,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,還原劑(表現(xiàn)在3方面) . 將五價(jià)砷還原為三價(jià)砷(As5+As3+),b.酸性SnCl2的作用,86,第三章,進(jìn)而促進(jìn)AsH3不斷生成,穩(wěn)定的絡(luò)離子,. 將KI被氧化生成的I2再還原為I-,87,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,. SnCl2與Zn粒表面形成Zn-Sn齊 起去極化作用,使氫氣

24、均勻而連續(xù)地發(fā)生.,88,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,c.PbAc2棉花的作用,排除硫化物的干擾(1mgS2- ),89,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,d.HgBr2試紙的作用,HgBr2試紙與AsH3作用生成砷斑.,90,2)反應(yīng)最佳條件,a. Zn粒的大小及用量 大?。耗芡ㄟ^1號(hào)篩（8502000m） 用量：約2g.,b. 標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2 ml (1 g /ml),第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,91,a. 供試品是硫化物,亞硫酸鹽,硫代硫酸鹽,排除方法：加入濃硝酸處理,第三章,3)干擾物的排除,三 砷 鹽 檢 查 法,92,Fe3+能消耗還原劑(KI、SnCl2), 并能氧化砷化氫.

25、,排除方法：先加酸性SnCl2試液使 Fe3+ Fe2+,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,b. 供試品是鐵鹽(Fe3+),93,c. 共價(jià)鍵結(jié)合的砷化物,排除方法：進(jìn)行有機(jī)破壞 酸破壞法或堿破壞法,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,94,堿破壞法 a 加入氫氧化鈣 500-600 C灼燒 例：酚磺酞 b 加入無水碳酸鈉堿融 例：苯甲酸鈉,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,酸破壞法 加稀硫酸與溴化鉀 例：葡萄糖中砷鹽檢查,95,4)古蔡氏法特點(diǎn),第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,96,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,(二) 白田道夫法,對(duì)含銻藥物中砷鹽的檢查不能用古蔡氏法,需用白田道夫法.,97,第三

26、章,三 砷 鹽 檢 查 法,1. 原 理,98,2. 白田道夫法的特點(diǎn),優(yōu)點(diǎn)：不受Sb干擾,缺點(diǎn)：靈敏度低 20gAs2O3/10ml 加入少量HgCl2,靈敏度提高至2 gAs2O3（1.5 gAs）/10ml.,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,99,(三) 二乙基二硫代氨基甲酸銀法 (Ag-DDC法) silver diethyldithiocarbamate,第三章,本法不僅用于砷鹽的限量檢查, 而且可用作微量砷鹽的含量測(cè)定.,100,第三章,1. 原 理,101,2. Ag-DDC法的特點(diǎn),a 靈敏度高 0.5 gAs/30ml b 可儀器測(cè)定,還可定量 c Sb干擾小,第三章,三 砷

27、 鹽 檢 查 法,102,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,(四)奇列氏法（次磷酸法）,103,2. 特點(diǎn),不受S2-,SO32-,Sb干擾,靈敏度較古蔡氏法低,第三章,三 砷 鹽 檢 查 法,104,四 鐵 鹽 檢 查 法,第一法 硫氰酸鹽法,1. 原理 鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配離子,與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同法處理后所呈的顏色進(jìn)行比較.,第三章,105,四 鐵 鹽 檢 查 法,第三章,2. 操作,106,四 鐵 鹽 檢 查 法,第三章,2) 最佳比色濃度 a. 儀器分析線性范圍5 90g Fe3+ /50ml b. 目視比色濃度范圍1050g Fe3+ /50ml,

28、3. 討 論,標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液硫酸鐵銨(含硫酸) 濃度10 gFe3+/ml,107,五 硫 酸 鹽 檢 查 法,硫酸鹽與氯化鋇在鹽酸酸性溶液中生成硫酸鋇的白色渾濁液,與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液與氯化鋇在相同條件下生成的渾濁比較.,第三章,1. 原 理,108,五 硫 酸 鹽 檢 查 法,第三章,2. 操作法,濃度范圍 0.1mg0.5mgSO42-/50ml,109,六 酸 堿 度 檢 查 法,第三章,(一) 酸堿滴定法,在一定指示液下,用酸或堿滴 定供試品中堿性或酸性雜質(zhì),以消 耗滴定液的ml數(shù)作為限度指標(biāo).,110,六 酸 堿 度 檢 查 法,樣品5.0g加水50ml溶解 溴麝香草酚藍(lán)指示液2滴(

29、pH6.0-7.6,黃-藍(lán)),第三章,例：NaCl的酸堿度,111,六 酸 堿 度 檢 查 法,取一定量指示液,以pH值的變色范圍作為酸堿性雜質(zhì)的限度指標(biāo).,第三章,(二) 指示液法,112,六 酸 堿 度 檢 查 法,例：蒸餾水的酸堿度 取樣品10ml pH值范圍：4.2-7.6 a 甲基紅 (pH4.2-6.3, 紅-黃) 指示液2滴,不得顯紅色; b 溴麝香草酚藍(lán)指示液5滴(pH6.0-7.6,黃-藍(lán)), 不得顯藍(lán)色.,第三章,113,六 酸 堿 度 檢 查 法,用電位法測(cè)定供試品溶液的pH值. 例：注射用水的pH值范圍 5.0-7.0,第三章,(三) pH值測(cè)定法,114,七 干 燥

30、失 重,第三章,115,七 干 燥 失 重,中國(guó)藥典采用的測(cè)定法 常壓干燥法 干燥劑干燥法 減壓干燥法 熱分析法,第三章,116,在程序控制溫度的情況下,測(cè)定物質(zhì)的物理、化學(xué)變化與溫度關(guān)系的一類儀器分析方法. (一) 熱重分析法 (二) 差示熱分析法 (三) 差示掃描量熱法,第三章,七 干 燥 失 重,熱分析法,117,測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量隨溫度變化的熱分析技術(shù),可計(jì)算出樣品在相應(yīng)溫度范圍內(nèi)減失質(zhì)量的百分率.,第三章,(一) 熱重分析法 (thermogravimetric,TGA),118,c. 測(cè)定速度快,第三章,TGA的特點(diǎn),分析樣品少, 適用于貴重藥材或在 空氣中容易氧化藥物干燥失重測(cè)定.,

31、d. 可用于判斷結(jié)晶水或吸附水, 并推斷結(jié)晶水含量.,b. 靈敏度高,可達(dá)1 g以下,119,第三章,供試品 TGA熱重曲線,W,W,1 測(cè)定曲線上平臺(tái)之間的質(zhì)量差值計(jì)算出樣品相應(yīng)溫度范圍內(nèi)減失質(zhì)量的百分率,結(jié)晶水 失重臺(tái)階,2可用于藥物結(jié)晶水與吸附水的區(qū)分,120,測(cè)量供試品和惰性參比物(常用石英砂、煅制MgO)之間的溫度差與溫度(或時(shí)間) 關(guān)系的熱分析技術(shù).,第三章,(二)差示熱分析法 (differential thermal analysis, DTA),121,第三章,供試品發(fā)生放熱反應(yīng)溫度高 于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生吸熱峰,供試品發(fā)生吸熱反應(yīng)溫度低 于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生放熱峰,差示熱分析法

32、(DTA)曲線,122,DTA用途(1) 熔點(diǎn)測(cè)定,熔程,T, T=0,第三章,123,DTA用途(2) 定性和純度檢定根據(jù)峰的數(shù)目、形狀、位置對(duì)供試品進(jìn)行純度判別, T=0,T,第三章,供試品,對(duì)照品,124,測(cè)量保持供試品和惰性參比物的溫度相同, 系統(tǒng)所需輸給供試品或參比物的能量差隨溫度(或時(shí)間)變化的熱分析技術(shù).,第三章,(三) 差示掃描量熱法 (differential scanning calorimetry, DSC),125,97.2%,98.6%,標(biāo)準(zhǔn)品,不同純度苯甲酸的DSC曲線,第三章,DSC用途：熔點(diǎn)測(cè)定、晶型鑒別和純度測(cè)定峰在橫軸上位置、形狀、數(shù)目與物質(zhì)的性質(zhì)有關(guān),12

33、6,第三章,特殊雜質(zhì),是指在該藥物生產(chǎn)和儲(chǔ)藏過程中,根據(jù)其生產(chǎn)方法、工藝條件及藥物本身結(jié)構(gòu)性質(zhì)可能引入的特有雜質(zhì). 阿司匹林水楊酸 鹽酸普魯卡因?qū)Π被郊姿?127,特殊雜質(zhì)的檢查法,二、化學(xué)性質(zhì)的差異,一、物理性質(zhì)的差異,第三章,三、光學(xué)性質(zhì)的差異,四、色譜性質(zhì)的差異,128,臭味及揮發(fā)性差異 顏色差異 溶解行為差異 旋光性質(zhì)的差異 吸附或分配性質(zhì)的差異 對(duì)光吸收性質(zhì)的差異,一 物 理 性 質(zhì) 差 異,第三章,129,第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查,2. 雜質(zhì)無揮發(fā)性 利用藥物在室溫或加熱揮發(fā)后,遺留殘?jiān)谝欢囟燃訜嶂梁阒?其重量不得超過規(guī)定. 例：乙醇中不揮發(fā)物的檢查.,一 物 理 性 質(zhì) 差 異,

34、第三章,(一) 嗅味及揮發(fā)性差異,1. 雜質(zhì)有特殊氣味： 乙醇中的雜醇油（異臭）,130,第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查,藥物自身無色 生產(chǎn)中引入有色的有關(guān)物質(zhì)或分解產(chǎn)物.,一 物 理 性 質(zhì) 差 異,第三章,例：磺胺嘧啶原料藥顏色檢查 磺胺苯環(huán)上胺基被氧化生成有色偶氮苯化合物.,(二) 顏色差異,131,第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查,根據(jù)藥物與雜質(zhì)溶解度的差異例：葡萄糖中糊精的檢查,一 物 理 性 質(zhì) 差 異,第三章,(三) 溶解行為的差異,132,第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查,1. 藥物有旋光度而雜質(zhì)沒有. 例:黃體酮在乙醇中比旋度+186-+198,一 物 理 性 質(zhì) 差 異,第三章,(四) 旋光性質(zhì)的差異,2. 雜質(zhì)

35、有旋光度而藥物沒有. 例:硫酸阿托品中莨菪堿的檢查,供試品 水溶液50mg/mL不得過-0.4 ,133,1 酸堿性的差異 例：苯巴比妥中苯基丙二酰脲檢查 甲基橙不得顯紅色,2 氧化還原性的差異 例：氯化物中碘化物檢查 供試品與含亞硝酸鈉的淀粉指示劑不得顯藍(lán) Cl的氧化電位高(1.35)不能被氧化為Cl2. I-的氧化電位低(0.53)能被氧化為I 2,第三章,二 化 學(xué) 性 質(zhì) 差 異,134,3 雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀 間苯二酚中鄰苯二酚檢查.,4 雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色 阿司匹林中游離水楊酸的測(cè)定,5 雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體 鹽酸乙基嗎啡中胺鹽檢查.,第三章,二 化 學(xué) 性

36、質(zhì) 差 異,135,二 化 學(xué) 性 質(zhì) 差 異,例1阿司匹林中游離水楊酸的檢查,雜質(zhì)來源,a. 生產(chǎn)過程中反應(yīng)不完全,b. 貯存過程中阿司匹林水解,第三章,136,紫堇色（有酚羥基）,檢查原理,阿司匹林 + Fe3+,（無酚羥基）,水楊酸+ Fe3+,第三章,137,例2對(duì)氨基水楊酸鈉中間氨基酚的檢查 雜質(zhì)來源 生產(chǎn)中引入(反應(yīng)不完全),貯存中樣品脫羧,第三章,138,第三章, 檢查原理與方法 對(duì)氨基水楊酸鈉乙醚中不溶 間氨基酚乙醚中溶解 采用雙相滴定法測(cè)定, 控制間氨基酚的限量.,139,色譜法 (一) 薄層色譜法(TLC) (二) 高效液相色譜法(HPLC) (三)氣相色譜法(GC),三

37、色 譜 行 為 差 異,第三章,140,根據(jù)藥物與雜質(zhì)對(duì)吸附劑的吸附或?qū)φ归_劑的解析能力不同(Rf值的差異), 加以分離和檢查.,三 色 譜 行 為 差 異,第三章,(一)薄層色譜法(TLC),141,三 色 譜 行 為 差 異,第三章,本法靈敏、簡(jiǎn)便、快速； 不需特殊的設(shè)備、費(fèi)用低； 分離和鑒定同步進(jìn)行.,1. TLC法特點(diǎn),142,三 色 譜 行 為 差 異,我國(guó)藥典2000年版一部 458 個(gè)中成藥品種中薄層色譜鑒別方法 341 種, 高達(dá) 75 %.,第三章,143,2.薄層色譜法應(yīng)用 1) 雜質(zhì)對(duì)照品法,適用于雜質(zhì)已知并有雜質(zhì)對(duì)照品的情況. 方法 根據(jù)雜質(zhì)限量, 取供試品溶液和一定濃

38、度的雜質(zhì)對(duì)照品溶液,分別點(diǎn)于同一薄層板上展開,定位后 進(jìn)行檢查.,第三章,三 色 譜 行 為 差 異,144,第三章,三 色 譜 行 為 差 異,適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定或 無雜質(zhì)對(duì)照品的情況.,2)供試品自身對(duì)照法,145,例：氫化可的松中“其他甾體” 檢查 供試液:3mg/ml 對(duì)照液:60g/ml(供試液稀釋50倍) 判斷:供試液的雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)3個(gè), 且供試液的雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色對(duì)照液主斑點(diǎn)顏色.,第三章,146,選用質(zhì)量符合規(guī)定的與供試品相同的藥物作為對(duì)照品.,3) 標(biāo)準(zhǔn)藥物對(duì)照法,第三章,三 色 譜 行 為 差 異,147,根據(jù)供試品與雜質(zhì)的對(duì)照品保留時(shí)間相同測(cè)定各雜質(zhì)峰面積.,第三章,三 色 譜 行 為 差 異,(二) 高效液相色譜法(HPLC),特點(diǎn) 分離效能高、應(yīng)用范圍廣， 能準(zhǔn)確、快速、分離分析同時(shí)