1、,Department of Microbiology, Harbin Medical University,Medical Microbiology 醫(yī) 學(xué) 微 生 物 學(xué),Department of Microbiology, GMC,第9章 呼吸道傳播的病原微生物,案例9-1,劉某，男，30歲。 主訴：低熱伴咳嗽一個多月。 查體：T 38，P86次/分，R20次/分，BP120/80mmHg。一般狀況良好，右上肺叩診稍濁，語顫稍增強(qiáng)，可聞及支氣管肺泡呼吸音和少量濕啰音，心腹檢查未見異常。 實(shí)驗(yàn)室檢查：血Rt ：Hb 130g/L，WBC12109/L，N68%，L32%，PLT13810

2、9/L；尿Rt(-)；大便Rt(-) ；ESR35mm/h。,問題： 你作為主診醫(yī)生，該患者確診還需要做哪些檢查？ 患者最有可能感染哪種病原體？ 一旦確診，應(yīng)遵循的治療原則是什么？,分析,作為主診醫(yī)生，該患者確診還需要做哪些檢查？ X-ray 胸片（正、側(cè)） 痰液查致病菌+藥敏 ,患者最有可能感染哪種病原體？ 結(jié)核？肺炎？支氣管炎？,一旦確診，應(yīng)遵循的治療原則是什么？ ,第9章 呼吸道傳播的病原微生物,第1節(jié)結(jié)核分枝桿菌 Mycobacterium Tuberculosis Tubercle bacilli,流行病學(xué),結(jié)核病的病原菌 1886年德國細(xì)菌學(xué)家 Koch 證明 全球性衛(wèi)生問題 是艾

3、滋病高發(fā)區(qū)人群的首要死因 世界防治結(jié)核病日 3月24日,分枝桿菌屬（Mycobacterium）,細(xì)長略帶彎曲的桿菌 抗酸桿菌（acid-fast bacillus） 種類,分枝桿菌屬細(xì)菌種類,結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群,結(jié)核分枝桿菌 牛分枝桿菌、 非洲分枝桿菌 田鼠分枝桿菌,非典型分枝桿菌,麻風(fēng)分枝桿菌,光產(chǎn)色分枝桿菌 暗產(chǎn)色分枝桿菌 不產(chǎn)色分枝桿菌 迅速生長分枝桿菌,分枝桿菌屬,一、生物學(xué)性狀,1）、形態(tài)上：菌體細(xì)長稍彎曲。呈分枝狀生長趨勢，經(jīng)齊尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法染色后，菌體呈紅色（抗酸染色陽性），其他非抗酸菌及細(xì)胞雜質(zhì)等均被染成藍(lán)色。 無芽胞、鞭毛和莢膜,1、形態(tài)與染色,

4、2、培養(yǎng)特性,2）、培養(yǎng)上：營養(yǎng)要求特殊（常用羅氏培養(yǎng)基，L-J）；pH6.5-6.8；T：37；氣體：專性需氧，8-12%CO2可刺激其生長。生長緩慢，18h/代。 培養(yǎng)表現(xiàn)在羅氏培養(yǎng)基上經(jīng)24周培養(yǎng)后形成粗糙、干燥、不透明的乳白色或米黃色，呈顆粒狀、結(jié)節(jié)狀或菜花樣菌落。液體培養(yǎng)基中呈索狀生長（加吐溫80后可呈均勻生長）。,培養(yǎng)基含雞蛋、馬鈴薯粉、甘油、孔雀綠等,結(jié)核分枝桿菌菌落,結(jié)核分枝桿菌索狀生長,抗酸染色法,原理：結(jié)核桿菌具有要枝菌酸。 方法：制片：涂片干燥固定（同革蘭氏染色法） 染色：加石炭酸復(fù)紅覆蓋標(biāo)本片 加熱至冒蒸氣為止 維持分鐘，水洗 鹽酸酒精脫色至無紅色液體流出為止 水洗 加

5、呂氏美藍(lán)染秒至分鐘 水洗 待干，鏡檢 結(jié)果：抗酸菌紅色（結(jié)核桿菌） 非抗酸菌藍(lán)色（其他細(xì)菌或細(xì)胞等） 注意事項(xiàng)：加熱時(shí)不能把石炭復(fù)紅加沸煮干,結(jié)核分枝桿菌抵抗力與變異性,3、抵抗力特點(diǎn)：“三耐四敏” 耐干燥、耐酸堿、耐孔雀綠（1：13000） 對濕熱、70乙醇、紫外線、常用抗結(jié)核藥物（但長期使用易產(chǎn)生耐藥性） 4、變異性 典型形態(tài)多形性 R型菌落S型菌落 有毒無毒（用于制備疫苗-卡介苗- Bacilli Calmette-Gurin ，BCG） 抗結(jié)核藥敏感耐藥,二、致病性和免疫性,類脂（lipid） 分枝菌酸（mycolic acid）-抗酸性 索狀因子（cord factor） -慢性肉芽

6、腫 磷脂（phosphatide）-結(jié)核結(jié)節(jié)和干酪壞死 蠟質(zhì)D（wax-D） -具佐劑作用，引起遲發(fā)型超敏反應(yīng) 硫酸腦苷酯（sulfatide）-抗吞噬 蛋白質(zhì)：引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)和產(chǎn)生抗體 多糖（polysaccharide）：誘發(fā)速發(fā)型超敏反應(yīng),1、致病物質(zhì),2、所致疾病,結(jié)核病 經(jīng)呼吸道、消化道、 破損皮膚黏膜等進(jìn)入機(jī)體 侵犯多種組織器官,肺部感染原發(fā)感染,多發(fā)生于兒童 原發(fā)綜合征 形成結(jié)核結(jié)節(jié) 轉(zhuǎn)歸,原發(fā)感染,肺部感染繼發(fā)感染,多由原發(fā)病灶潛伏的結(jié)核菌引起 多發(fā)于成年人 病灶多局限 易發(fā)生干酪樣壞死和形成空洞 為開放性肺結(jié)核,肺外感染,免疫力低下患者 常見于腦、腎、骨、關(guān)節(jié)、生殖系統(tǒng)

7、少數(shù)形成全身粟粒性結(jié)核或播散性結(jié)核,免疫機(jī)制,感染免疫、有菌免疫（infection immunity ） 結(jié)核菌免疫依賴細(xì)胞免疫 可產(chǎn)生抗體，但其保護(hù)作用不明確,免疫與超敏反應(yīng),細(xì)胞免疫為主,遲發(fā)型超敏反應(yīng)同時(shí)存在 郭霍現(xiàn)象 免疫和超敏反應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ) 結(jié)核分枝桿菌核糖核酸（rRNA） 結(jié)核菌素蛋白、蠟質(zhì)D,結(jié)核菌素試驗(yàn),結(jié)核菌素試劑 舊結(jié)核菌素（old tuberculin，OT) 純蛋白衍化物(purified protein derivative，PPD),方法 取兩種PPD 5單位注入兩前臂皮內(nèi) 4872小時(shí)后觀察紅腫直徑 結(jié)果 陰性：5mm 陽性：5mm 強(qiáng)陽性：15mm,結(jié)核菌素試

8、驗(yàn),結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)果分析,陽性 強(qiáng)陽性 陰性,硬結(jié)、紅腫直徑 0.5-1.5cm之間,出現(xiàn)超敏反應(yīng) 不表示正患結(jié)核病,硬結(jié)直徑超過1.5cm以上,表明可能有活動性結(jié)核，應(yīng)進(jìn)一步檢查,注射部位有針眼大的紅點(diǎn)或稍有紅腫，硬結(jié)直徑小于0.5cm,無結(jié)核感染，但應(yīng)考慮： 原發(fā)感染的早期 正患嚴(yán)重結(jié)核病 正患其他傳染?。檎睿?選擇卡介苗接種對象、測定卡介苗接種后的免疫效果 了解人群自然感染率 作為嬰幼兒結(jié)核病的輔助診斷 測定腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能,結(jié)核菌素試驗(yàn)應(yīng)用,三、微生物學(xué)檢查,標(biāo)本取材 涂片染色鏡檢：抗酸染色 培養(yǎng)法：羅氏固體培養(yǎng)基 動物試驗(yàn) 細(xì)菌學(xué)基因診斷：PCR,特異性防治,卡介苗預(yù)防 接種

9、對象：新生兒和結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性的兒童 免疫時(shí)間：35年 藥物治療 聯(lián)合應(yīng)用 長期用藥,麻風(fēng)分枝桿菌,Mycobacterium leprae,麻風(fēng)分枝桿菌（M. leprae）,麻風(fēng)病的病原菌 慢性傳染病 世界各地均有報(bào)道 主要分布在亞、非和拉丁美洲,形態(tài)與染色,細(xì)長略彎曲 無芽胞，無莢膜，無鞭毛 抗酸染色陽性 典型的胞內(nèi)寄生菌,培養(yǎng)特性,不能在人工培養(yǎng)基中生長 抗酸特性 動物模型：犰狳,致病性,易感人群 人 傳播途徑 直接接觸或由飛沫傳播 潛伏期 一般是6個月至5年 發(fā)病慢、病程長 麻風(fēng)分為3種類型 瘤型麻風(fēng) 結(jié)核樣型 界線類 未定類,麻風(fēng)兩型兩類相互間的關(guān)系圖,微生物學(xué)診斷,顯微鏡檢查 PCR,防治原則,特異的預(yù)防 尚無有效的菌苗 早期發(fā)現(xiàn)、早治療 目前多采用二三種藥聯(lián)合治療 氨苯砜（dapsone，DDS）,非結(jié)核分枝桿菌,Nontuberculosis mycobacteria,非結(jié)核分枝桿菌,除人型結(jié)核分枝桿菌、牛型結(jié)核分枝桿菌與麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌菌群 多存在于自然界，是條件致病菌,分類,根據(jù)菌落色素和生長速度分為4組： 第組：光產(chǎn)色菌 第組：暗產(chǎn)色菌 第組：不產(chǎn)